骨巨細胞瘤中ANGPTL4的調控機制研究.pdf

1、研究背景及目的：骨巨細胞瘤是一種較為常見的原發(fā)性骨腫瘤，好發(fā)于人體長骨的干骺端，也可見于骶骨，骨盆和脊柱部位。骨巨細胞瘤主要由三種細胞成分構成:破骨細胞樣的多核巨細胞，梭形基質細胞和單核前體細胞。其中，梭形基質細胞起源于人體骨髓間充質干細胞，被認為是骨巨細胞瘤中的腫瘤成分。骨巨細胞瘤是一種良性腫瘤，但是具有一定程度的潛在侵襲性生物學行為，可以發(fā)生惡變，
　　甚至出現遠處轉移。目前，手術切除治療是骨巨細胞瘤的主要治療方式，但是文獻報

2、道的手術切除后的腫瘤復發(fā)率仍有18％到60％之高。骨質破壞是骨巨細胞瘤的典型的生物學特征，但其發(fā)生發(fā)展機制仍然沒有被完全研究清楚，因此進一步研究骨巨細胞瘤的生物學特點有助于腫瘤的防治。
　　ANGPTL4是血管生成素相關蛋白家族中的一員，主要參與人體的血管形成和糖脂代謝。在人體中，ANGPTL4主要由肝臟，脂肪組織，胎盤以及缺血組織分泌，并且受饑餓和缺氧等因素調控，其可通過旁分泌或內分泌途徑調節(jié)脂肪代謝并作為PPARs的靶向受體。

3、近些年來，由于ANGPTL4在血管生成，炎癥和缺氧中的作用，其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展和轉移中的作用備受關注，但ANGPTL4在腫瘤中的研究程度遠不及在糖脂代謝中的清楚。已有研究表明，ANGPTL4在透明細胞腎癌和口腔鱗狀細胞癌中表達明顯升高，此外，由腫瘤分泌的ANGPTL4可以介導乳腺癌的肺部轉移。但是，ANGPTL4在骨巨細胞瘤中的表達和作用少有研究。
　　TGF-β信號通路在人體幾乎所有細胞類型中都起著關鍵作用，該通路在胚胎發(fā)育和維

4、持組織穩(wěn)態(tài)中也起著重要作用。細胞因子TGF-β具有多種功能，參與調節(jié)人體微環(huán)境中傳感器和調節(jié)器的生成，如細胞因子，細胞外基質成分和細胞表面受體。TGF-β信號通路在腫瘤中的作用存在爭議，有的研究認為該通路可以抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展;有研究表明該通路參與細胞侵襲，免疫調節(jié)和微環(huán)境修改，從而促進了腫瘤惡化。有研究表明，TGF-β作用于發(fā)基因ANGPTL4，通過肺部破壞毛細血管內皮細胞穩(wěn)定性，進而促進乳腺癌的肺部轉移。但是，TGF-β-ANGPT

5、L4信號通路在其他類型腫瘤中仍無研究。
　　研究內容及方法：在該實驗中，首先通過WB，qRT-PCR，IHC和HE染色證明了ANGPTL4在骨巨細胞瘤基質細胞中表達明顯增高，進一步發(fā)現TGF-β2在骨巨細胞瘤中表達增高并證明TGF-β2對ANGPTL4的調控作用，隨后構建了ANGPTL4-/-Knockout穩(wěn)轉株，并在細胞水平證明了ANGPTL4介導破骨細胞分化及成血管作用，最后構建了骨巨細胞瘤的雞胚模型，以觀察ANGPTL4在

6、體內水平對骨巨細胞瘤的作用及成血管功能。
　　研究結果及結論：證明了ANGPTL4在骨巨細胞瘤中表達增高，并首次在骨巨細胞瘤中證明了ANGPTL4對破骨細胞分化和血管形成的重要作用，證據如下:1、證實了ANGPTL4在骨巨細胞瘤中的高表達，并發(fā)現TGF-β2上調表達及其對ANGPTL4的調控作用;2、通過構建ANGPTL4-/-Knockout穩(wěn)轉株，在細胞水平闡述了ANGPTL4介導破骨細胞分化，骨質溶解及成血管作用;3、構建了