別嘌噙醇及β內(nèi)酰胺類抗生素誘發(fā)漢族人群皮膚藥物不良反應(yīng)與人類白細(xì)胞抗原基因關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:
　　 別嘌呤醇因其無可媲美的多重降尿酸機(jī)制，長(zhǎng)久以來被廣泛用于治療高尿酸血癥及其并發(fā)癥。β內(nèi)酰胺類抗生素是一類臨床使用最廣泛的抗菌藥物。兩類藥物均具有重要的臨床地位，但卻都存在較高的皮膚藥物不良反應(yīng)(cutaneous adverse drugreactions，cADRs)發(fā)生率，致使患者的臨床治療受到影響。近來研究發(fā)現(xiàn)，人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)與某些藥物所致cADRs有

2、關(guān)。其中HLA-B*5801與別嘌呤醇所致重癥藥疹(severe cutaneous adverse drug reactions，SCARs)之間存在強(qiáng)關(guān)聯(lián)。而阿莫西林-克拉維酸鉀所致藥物性肝炎也與某些HLAⅠ類及Ⅱ類等位基因相關(guān)。因此，本課題的研究目的共分兩部分，其一是在前期工作基礎(chǔ)上對(duì)別嘌呤醇所致cADRs的相關(guān)HLA-B基因進(jìn)行定位，評(píng)估其臨床表型特異性及預(yù)測(cè)價(jià)值。另一方面，利用全基因組關(guān)聯(lián)分析方法(genome-wide as

3、sociation study，GWAS)篩查阿莫西林與頭孢菌素所致cADRs相關(guān)的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)并探索相關(guān)候選基因。
　　 方法:
　　 收集2008年至2011年期間于復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院皮膚科住院確診為單一別嘌呤醇、阿莫西林或頭孢菌素所致cADRs病例。對(duì)其中38例別嘌呤醇所致cADRs進(jìn)行HLA-B基因分型，包括22位發(fā)疹型藥疹、13位Ste

4、vens-Johnson綜合征/中毒性表皮壞死松解癥型藥疹以及3位藥物超敏反應(yīng)綜合征患者。評(píng)估相關(guān)基因的臨床表型特異性及預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性。對(duì)17例阿莫西林及16例頭孢菌素所致cADRs患者，采用GWAS篩查可能相關(guān)的SNPs，通過查詢其位置及與周圍SNPs的連鎖不平衡(linkagedisequilibrium，LD)關(guān)系探索可能相關(guān)的基因。
　　 結(jié)果:
　　 所有別嘌呤醇cADRs患者(38/38)均攜帶HLA-B*580

5、1等位基因，而該基因僅存在于11.11％(7/63)的別嘌呤醇耐受組人群(OR=580.07，95％CI=32.18-10456.80，p<0.0001)及13.99％(80/572)的健康對(duì)照組人群(OR=471.09，95％ CI=28.66-7744.39，p<0.0001)。各類型別嘌呤醇所致cADRs均與HLA-B*5801呈顯著相關(guān)。除了重癥藥疹外(OR=248.60，95％CI=13.48-4585.35，p<0.0001

6、)，HLA-B*5801等位基因在普通發(fā)疹型藥疹組及對(duì)照組中也具有顯著性分布差異(OR=339.00，95％CI=18.58-6186.39，p<0.0001)，與健康人群組相比顯示同樣差異(OR=275.31，95％CI=16.54-4583.53，p<0.0001)。HLA-B*5801用于預(yù)測(cè)該人群中別嘌呤醇cADRs發(fā)生的敏感度為100％，特異度為88.89％，陽(yáng)性及陰性預(yù)測(cè)值分別為84.44％及100％。對(duì)各臨床類型的進(jìn)一步分

7、析同樣顯示該預(yù)測(cè)試驗(yàn)具有較高的準(zhǔn)確性。
　　 在MHC相關(guān)區(qū)域中，GWAS結(jié)果顯示rs11968268(OR=7.041，p=1.90×10-6)，rs61235149(OR=6.537，p=5.03×10-6)，rs9258756(OR=5.551，p=3.64×10-5)，rs9258631(OR=5.400，p=4.96×10-5)，rs13207945(OR=5.148，p=3.20×10-5)與阿莫西林cADRs關(guān)聯(lián)最

8、為顯著，分別位于HLA-A/W、HLA-H/G以及HLA-DRBl/DQA1區(qū)域。與頭孢菌素cADRs關(guān)聯(lián)密切的MHC相關(guān)區(qū)域主要位于6p21.33，相關(guān)SNPs分別為rs17206757(OR=4.091，p=7.67×104)、rs9765960(OR=4.079，p=7.90×104)和rs1076829(OR=3.988，p=5.43×104)。其中，NFKBIL1基因上的rs2523500(OR=3.298，p=6.04×10

9、4)及rs6916921(OR=3.196，p=8.18×104)分別與阿莫西林cADRs、頭孢菌素cADRs呈顯著相關(guān)性。除去MHC相關(guān)基因后，結(jié)果顯示有多個(gè)基因可能與兩類β內(nèi)酰胺抗生素所致cADRs相關(guān)。包括阿莫西林cADRs組中ARHGAP10、CNTN5、KCNJ3、HOXA以及頭孢菌素cADRs組中的KSR2、GPC6、FNDC3B和ENTPD3。但由于樣本數(shù)量有限，有必要擴(kuò)大樣本量對(duì)本結(jié)果進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。
　　 結(jié)論

10、:
　　 1.在華東地區(qū)大陸漢族人群中，我們觀察到別嘌呤醇所致普通型及重癥cADRs(MPE、SJS/TEN、DRESS)均與HLA-B*5801強(qiáng)關(guān)聯(lián)。
　　 2.HLA-B*5801可以作為標(biāo)志基因較準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)別嘌呤醇所致cADRs的發(fā)生。
　　 3.在MHC相關(guān)區(qū)域中，rs11968268，rs61235149，rs9258756，rs9258631和rs13207945與阿莫西林所致cADRs關(guān)聯(lián)最為顯著

11、，分別位于HLA-A/W、HLA-H/G以及HLA-DRB1/DQA1區(qū)域。
　　 4.與頭孢菌素cADRs關(guān)系密切的MHC相關(guān)區(qū)域主要位于6p21.33。
　　 5.NFKBIL1基因與阿莫西林及頭孢菌素所致cADRs均呈顯著相關(guān)性。
　　 6.ARHGAP10、CNTN5、KCNJ3、HOXA可能與阿莫西林cADRs相關(guān)。
　　 7.KSR2、GPC6、FNDC3B和ENTPD3可能與頭孢菌素cADR