阿托伐他汀在大鼠頸總動(dòng)脈球囊損傷模型中對(duì)NF-κB及其相關(guān)炎性因子的影響.pdf

1、目的：
　　 近年來(lái)，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。┏蔀槲：θ祟惤】档淖锟?zhǔn)字?，隨著醫(yī)學(xué)水平的進(jìn)步，經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(PCI)成為治療冠心病的有效手段，但是再狹窄(RS)仍是制約這一技術(shù)應(yīng)用的主要問(wèn)題。大量研究證實(shí)，再狹窄的機(jī)制主要由于球囊擴(kuò)張和支架置入時(shí)導(dǎo)致血管壁損傷，斑塊破裂，引起局部的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞的增殖和移行。本文通過(guò)模擬臨床PCI術(shù)后再狹窄，建立大鼠頸總動(dòng)脈球囊損傷模型，觀察阿托伐他汀(ato

2、rvastatin)對(duì)血管壁損傷后內(nèi)膜增生及對(duì)細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)及其相關(guān)下游因子的影響，探討阿托伐他汀防治再狹窄的可能作用機(jī)制。
　　 實(shí)驗(yàn)方法:
　　 1、建立大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷模型：健康雄性Wista大鼠48只，體重300～350g，隨機(jī)分為三組，各為16只，阿托伐他汀干預(yù)組為實(shí)驗(yàn)組，通過(guò)灌胃法給予阿托伐他汀(10mg/kg/d)；安慰劑對(duì)照組為模型組，給予等量水：空白對(duì)照組為假手術(shù)組，只分離出左頸總動(dòng)

3、脈后縫合，不作球囊損傷處理，給予等量水。藥物干預(yù)3天后實(shí)驗(yàn)組與模型組行左側(cè)頸總動(dòng)脈內(nèi)膜球囊損傷術(shù)，術(shù)后實(shí)驗(yàn)組繼續(xù)每日給予阿托伐他汀，模型組及假手術(shù)組給予等量水，每組中各有4只于術(shù)后1、3、7、14天分別處死，采集頸動(dòng)脈損傷段標(biāo)本。
　　 2、采用HE染色方法觀察內(nèi)膜增生，并應(yīng)用Image J圖像分析軟件進(jìn)行圖像編輯，分別測(cè)量血管內(nèi)膜和中膜橫斷面的面積，以及外彈力膜內(nèi)橫截面積(EEL)，計(jì)算內(nèi)膜／中膜面積比。每只動(dòng)物隨機(jī)選取5張切

4、面進(jìn)行圖像分析，取平均值。
　　 3、采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)血管平滑肌特異肌動(dòng)蛋白(α-SMA)及VCAM-1、ICAM-1、MCP-1炎性因子的表達(dá)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比。通過(guò)下面公式計(jì)算：陽(yáng)性細(xì)胞百分比=DAB（顯色劑）顯色的陽(yáng)性細(xì)胞核或胞質(zhì)／（蘇木素染色的細(xì)胞核或胞質(zhì)+DAB染色的陽(yáng)性細(xì)胞核或胞質(zhì)）×100％。并隨機(jī)選取5張切片，以PBS替代一抗作為陰性對(duì)照組，
　　 4、結(jié)果采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，

5、兩個(gè)均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組樣本間均數(shù)兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　 1、血管形態(tài)學(xué)動(dòng)態(tài)變化
　　 光鏡下，假手術(shù)組大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜僅見(jiàn)單層內(nèi)皮細(xì)胞，內(nèi)彈力膜完整。球囊損傷后即刻，可見(jiàn)動(dòng)脈內(nèi)皮剝脫；模型組球囊損傷術(shù)后14天，頸動(dòng)脈新生內(nèi)膜呈均一或不均增厚，管腔呈向心性或偏心性狹窄，內(nèi)膜增生明顯，說(shuō)明已形成典型的損傷后內(nèi)膜增生動(dòng)物模型。治療組與同一時(shí)間點(diǎn)模型組相

6、比，內(nèi)膜增生明顯減輕，差異有顯著性（P＜0.01）。
　　 2、免疫組化染色后NF-κB、α-SMA及ICAM-1、VCAM-1、MCP-1炎性因子的表達(dá)
　　 陰性對(duì)照組可見(jiàn)背景為棕褐色，蘇木素復(fù)染后胞核呈藍(lán)色，未見(jiàn)特異性染色。α-SMA免疫組化染色表明新內(nèi)膜中增生的細(xì)胞主要為平滑肌源性。模型組血管新生內(nèi)膜中NF-κB及炎性因子ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的表達(dá)顯著高于假手術(shù)組(P＜0.001)；阿托伐他汀組