慢性淋巴細胞白血病的分子細胞遺傳學研究.pdf

1、目的:探討常規(guī)細胞遺傳學(conventional cytogenetics，CC)分析、組合探針熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)技術對慢性淋巴細胞白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)患者染色體異常的檢測價值，研究我國CLL患者染色體異常的特點，并分析染色體異常對CLL患者的預后價值及同其他預后指標，包括ZAP-70(70-kD zeta

2、-associated protein)、CD38、血清乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)及淋巴細胞絕對計數(shù)的相關性。 方法:對61例CLL患者的骨髓或外周血標本，加入植物血凝素(phytohemagglutinin，PHA)刺激CLL白血病細胞的增殖及分裂，采用短期培養(yǎng)法培養(yǎng)72h制備染色體標本；采用常規(guī)R顯帶技術進行常規(guī)核型分析；同時

3、應用一組探針(LSI D13S319、LSI p53和CEP17，LSI ATM，CEP 12，LSI MYB，LSI IGH Dual Color,Break ApartRearrangement Probe)進行FISH檢測；采用多參數(shù)流式細胞術(flowcytometry，F(xiàn)CM)檢測CD5+CDl9+細胞CD38、ZAP-70的表達。 結果: 61例CLL患者中60例進行了CC檢測，結果顯示：11.7％存在異常，其中3例

4、(5.0％)未見分裂象；61例患者的FISH檢測結果顯示：49例(80.3％)存在一種及一種以上細胞遺傳學異常，34例(55.7％)顯示存在del(13q14)異常，13例(21.3％)有del(17p13)異常，13例(21.3％)檢出+12異常，13例(21.3％)顯示存在涉及14q32的IgH重排，del(11q22)異常者7例(11.5％)，del(6q23)異常者3例(4.9％)。在50例CC結果核型正常的CLL患者中，應用組

5、合探針FISH技術檢測顯示41例存在異常；7例CC異常核型的患者中，3例患者FISH技術未檢測出異常；3例CC未見分裂象的CLL患者中，應用FISH技術檢測發(fā)現(xiàn)2例存在單一的del(13q14)，1例存在del(13q14)伴+12異常。del(17p13)、del(11q22)異常多見于淋巴細胞絕對計≥50×10<'9>/L組、以及LDH、β2-MG、CD38高表達水平組，而FISH檢測無染色體異常和單一del(13q14)異常多見于

6、淋巴細胞絕對計數(shù)≤50×10<'9>/L組、以及LDH、β2-MG、CD38低表達水平組。伴有del(13q14)異常的患者存期明顯長于無del(13q14)異常者[(166.83±13.85)個月vs(86.18±7.55)個月]，但兩組之間無統(tǒng)計學差異(P=0.053)；伴有del(17p13)異?；颊叩纳嫫诿黠@短于無del(17p13)異常患者[(65.11±13.45)個月vs(175.30±6.53)個月]，且差異具有統(tǒng)計學

7、意義(P=0.000)；del(11q22)異常(P=0.479)、IgH重排(P=0.287)及del(6q23)(P=0.742)其差異均無統(tǒng)計學意義。 結論:由于CLL白血病細胞有絲分裂低下，雖加入刺激劑PHA，但是CC的染色體異常檢出率仍很低；組合探針FISH技術則大大提高了異常染色體的檢出率，del(13q14)異常是CLL最常見的染色體異常。單-del(13q14)異?；颊叨嘁娪诹馨图毎^對計數(shù)低于50×10<'9>