自然感染細粒棘球蚴對腸道粘膜免疫屏障的影響研究.pdf

1、由細粒棘球絳蟲的幼蟲引起的棘球蚴病，是一種人畜共患的寄生蟲病，高發(fā)于我國及世界各地的畜牧區(qū)，分布地域相當廣闊，目前已成為全球性的公共衛(wèi)生問題。人類及部分食草類動物（如綿羊等）因為誤食了由其終末宿主排出的蟲卵成為其中間宿主，蟲卵經(jīng)過胃，最終在十二指腸及小腸上段腸粘膜內寄居，在此蟲卵孵化出六鉤蚴，穿過腸粘膜屏障入血并到達肝臟及其他器官，對機體的健康危害極大。既往研究發(fā)現(xiàn)，細粒棘球蚴之所以能夠在機體內長期生存，是其通過影響宿主Th1及Th2兩

2、型細胞免疫應答平衡因子，誘導非保護性的Th2型免疫應答成為主導，利于細粒棘球蚴在體內的生長。但是，腸粘膜免疫屏障系統(tǒng)是機體內最大的淋巴免疫系統(tǒng)，是細粒棘球蚴進入機體的第一道屏障，其對腸粘膜免疫屏障影響的相關研究鮮有報道。
　　目的：
　　本研究旨在通過自然感染細粒棘球蚴的綿羊做為大動物研究對象，采取隨機對照實驗，應用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)及免疫組化等方法，分析Th1/Th2相關的部分免疫因子(IL-6，IL-10及I

3、FN-γ)在外周血和小腸粘膜組織內的水平變化;同時，應用阿苯達唑質脂體治療自然感染細粒棘球蚴感染的綿羊，進一步評價細粒棘球蚴感染后對外周血及腸粘膜內Th1/Th2所介導的免疫反應的影響;此外，通過對肝細粒棘球蚴患者與正常人群中幽門螺桿菌感染率的進行病例對照研究，以期從腸道微生態(tài)角度來探討，腸道微生態(tài)變化對細粒棘球蚴影響腸粘膜免疫屏障功能可能起到的作用。最終來研究，自然感染細粒棘球蚴對腸道粘膜免疫屏障可能發(fā)生的影響，為今后預防和治療細粒棘

4、球蚴感染提供可行性研究方向。
　　方法:
　　用B超初檢和CT復檢的方法，從新疆巴音布魯克草原986只綿羊中，篩選出年齡在24-36月左右，自然感染細粒棘球蚴的雌性綿羊20只，按隨機數(shù)字表法，分為兩組，分別為使用阿苯達唑治療組和細粒棘球蚴感染組，以及按同法篩選出未感染組綿羊10只，做為正常對照組。嚴格隨機三盲方法，對上述三組實驗對象進行治療及飼養(yǎng)3月后，進行外周血采集、處死后小腸粘膜標本收集。用ELISA法對外周血中IL-6

5、，IL-10及IFN-γ等免疫因子水平進行測定，分析細粒棘球感染及阿苯達唑質脂體治療后外周血中免疫因子的變化;同時通過對小腸粘膜石蠟切片進行免疫組化染色，比較IL-6，IL-10及IFN-γ等免疫因子的陽性表達水平;此外，通過隨機選取臨床確診感染細粒棘球蚴患者51例及正常健康體檢人群30例成人做為對照組，使用化學發(fā)光法檢測幽門螺桿菌感染情況，進一步探討，腸道微生態(tài)對細粒棘球蚴作用于腸粘膜免疫屏障過程中的可能影響。
　　結果:

6、>　　1）ELISA法對自然感染細粒棘球蚴綿羊外周血免疫因子IL-6、IL-10、IFN-γ進行測定提示:感染組上述3種免疫因子水平均高于對照組，但只有IL-10具有統(tǒng)計學意義(P＜0.001);免疫組化法對自然感染細粒棘球蚴綿羊腸粘膜內免疫因子IL-6、IL-10、IFN-γ進行測定提示:感染組僅有IFN-γ明顯高于對照組，并有統(tǒng)計學意義(P＜0.005);
　　2）阿苯達唑脂質體治療干預后，ELISA法測定外周血Th2相關免疫

7、因子IL-6，IL-10均有降低，但僅有IL-10具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);阿苯達唑脂質體治療后，腸粘膜免疫組化結果示:腸粘膜內Th1相關免疫因子IFN-γ保持在較高水平，并具有統(tǒng)計學意義（P＜.01），腸粘膜內Th2相關免疫因子IL-10有所降低，但沒有統(tǒng)計學意義(P=0.893);
　　3）用化學發(fā)光法對51例細粒棘球感染患者進幽門螺桿菌抗體檢測發(fā)現(xiàn)陽性率達74.51％，而對照組為50.00％，兩者具有統(tǒng)計學差異(P=0

8、.025)。
　　結論:
　　本研究利用自然感染細粒棘球蚴綿羊做為研究對象，更接近同樣做為細粒棘球感染中間宿主的人類感染模式。研究發(fā)現(xiàn)，自然感染細粒棘球蚴綿羊外周血中免疫反應主要以Th2型為主，而腸粘膜免疫反應可能以Th1型為主;行阿苯達唑質脂體進行干預治療后結果提示:阿苯達唑質脂體可增強機體體液及腸粘膜免疫屏障的Th1型免疫反應，對Th2類免疫因子有抑制作用;在對人細粒棘球蚴感染與幽門螺桿菌感染相關性病例對照研究結果提示: