2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  本實驗以體外培養(yǎng)的細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)為研究對象,觀察維甲酸(RA)對細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)內(nèi)Nrf2信號通路的抑制作用,并進(jìn)一步探討Nrf2信號通路抑制后體外對細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)的作用。
  方法:
  無菌條件下,從自然感染細(xì)粒棘球蚴病的綿羊肝臟中獲取細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié),并置RPMI1640培養(yǎng)基中體外培養(yǎng)。將不同濃度的RA(2、4、6、8和10μmol/L)體外作用于細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié),并設(shè)立空白對照組。采用共聚焦免

2、疫熒光技術(shù)檢測原頭節(jié)內(nèi)Nrf2的定位及表達(dá)變化;通過WST法及ELISA法測定RA作用后原頭節(jié)GST及HO-1的活性變化。各組原頭節(jié)經(jīng)0.1%伊紅溶液染色后于光鏡下觀察活力及形態(tài)變化,實驗獨立重復(fù)3次,并繪制活力曲線。用掃描電子顯微鏡(SEM)觀察原頭節(jié)表面超微結(jié)構(gòu)改變。不同濃度RA作用原頭節(jié)24h、48h后,用caspase-3檢測試劑盒檢測caspase-3酶活性。
  結(jié)果:
  免疫熒光定位表明Nrf2綠色熒光主要分

3、布于細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)的細(xì)胞質(zhì)中,8μmol/LRA作用后,綠色熒光強(qiáng)度及定位均未見明顯改變。RA作用后的原頭節(jié)GST和HO-1活性均顯著下降(P<0.05),且呈時間及劑量依賴性。不同濃度RA均有抑制原頭節(jié)生長的作用,以8μmol/L和10μmol/LRA對原頭節(jié)殺傷作用較明顯,至培養(yǎng)第5d,8μmol/L組原頭節(jié)活力僅為9.58%,而10μmol/L組原頭節(jié)已全部死亡。隨著藥物作用時間的延長,RA對原頭節(jié)的殺傷作用越明顯。SEM觀察顯

4、示, RA可明顯破壞原頭節(jié)表面超微結(jié)構(gòu),引起蟲體表層塌陷、頂突變形及微毛脫落,當(dāng)藥物濃度及作用時間增加后,損傷加重,出現(xiàn)頂突界面缺損、吸盤變形,體表還可見大量蟲蝕樣改變及指狀突起。此外,不同濃度RA作用原頭節(jié)24h、48h后,caspase-3酶活性較正常對照組顯著增高(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1.維甲酸可有效抑制細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)內(nèi)Nrf2調(diào)控的下游GST、HO-1的活性,但對Nrf2的表達(dá)水平?jīng)]有影響。
 

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