用L5178Y評(píng)價(jià)鎘、土荊芥揮發(fā)油遺傳毒性及其毒性機(jī)制研究.pdf

1、鎘(Cadmium)是一種重要的環(huán)境污染物。美國(guó)毒物管理委員會(huì)(ATSDR)將其列為第七位危及人體健康的有害物質(zhì)。土荊芥（Chenopodium ambrosioides L.）為傳統(tǒng)中藥，主要用來驅(qū)蟲、抑菌和抑癌。
　　 本試驗(yàn)用小鼠淋巴瘤細(xì)胞L5178Ytk+/--3.7.2C為靶細(xì)胞，通過TK基因突變?cè)囼?yàn)、微核試驗(yàn)和單細(xì)胞凝膠電泳對(duì)鎘和土荊芥揮發(fā)油進(jìn)行遺傳毒性評(píng)價(jià)。通過雜合性丟失情況對(duì)鎘的毒性機(jī)制進(jìn)行探討。
　　

2、鎘濃度設(shè)為0μg/mL、0.25μg/mL、0.50μg/mL、0.75μg/mL、1.00μg/mL、10μg/mL環(huán)磷酰胺(cyclopHosphamide，CP)為陽(yáng)性對(duì)照，TK基因突變?cè)囼?yàn)結(jié)果顯示:隨著鎘劑量的增加，相對(duì)存活率、相對(duì)懸浮生長(zhǎng)、相對(duì)總生長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，tk位點(diǎn)突變頻率明顯上升，鎘濃度為1.00μg/mL時(shí)抗性突變頻率達(dá)到786.67±17.07(×10-6)，是陰性對(duì)照的6倍。微核試驗(yàn)結(jié)果顯示:微核率隨鎘濃度增大而增

3、加，隨處理時(shí)間延長(zhǎng)而增加。染毒4h，濃度為1.25μg/mL的微核率達(dá)到9.93±0.57(‰)。單細(xì)胞凝膠電泳結(jié)果顯示:尾長(zhǎng)度、尾面積隨鎘濃度增加而增大，濃度為1.25μg/mL時(shí)，尾長(zhǎng)度與尾面積分別為61.33μm和7583.34μm2。雜合性缺失分析發(fā)現(xiàn)鎘主要誘導(dǎo)L5178Y細(xì)胞tk位點(diǎn)基因片段缺失。表明鎘對(duì)L5178Y細(xì)胞有較強(qiáng)的毒性，能損傷細(xì)胞DNA，誘發(fā)點(diǎn)突變和片段缺失、染色體斷裂，表現(xiàn)出較強(qiáng)的致突變性。
　　 土荊

4、芥揮發(fā)油濃度設(shè)為0％、0.001％、0.002％、0.004％、0.006％、0.008％，1％二甲基亞砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)為溶劑對(duì)照、10μg/mL CP為陽(yáng)性對(duì)照，TK基因突變?cè)囼?yàn)結(jié)果顯示:相對(duì)存活率、相對(duì)懸浮生長(zhǎng)、相對(duì)總生長(zhǎng)表現(xiàn)為先上升，再下降的總趨勢(shì)，tk位點(diǎn)總突變頻率明顯，濃度為0.008％時(shí)，抗性突變頻率為657.07±9.97(×10-6)，是溶劑對(duì)照組的5倍。微核試驗(yàn)結(jié)果顯示，微核率隨揮發(fā)

5、油濃度增加而增加，隨時(shí)間延長(zhǎng)而增大。染毒4h，濃度為0.004％的微核率達(dá)到13.34±0.17(‰)。單細(xì)胞凝膠電泳結(jié)果顯示:尾面積和尾長(zhǎng)度總趨勢(shì)為隨揮發(fā)油濃度的增大而增大，濃度為0.008％時(shí)，尾長(zhǎng)度與尾面積達(dá)到最大，分別為85.38μm和8451.48μm2。表明土荊芥揮發(fā)油對(duì)L5178Y有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，且毒性劑量范圍很窄，能夠損傷細(xì)胞DNA，誘發(fā)點(diǎn)突變和片段缺失、染色體斷裂，表現(xiàn)出很強(qiáng)的致突變性。
　　 基于L5178