卡瓦胡椒素B(Flavokawain B)的抗肺癌活性與分子機(jī)制研究.pdf

1、目的:探討卡瓦胡椒素B對(duì)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系的增殖抑制和促凋亡的作用及其分子機(jī)理。
　　 方法:應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)不同濃度卡瓦胡椒素B(0、1.1、2.2、4.4、8.8、17.6、44、87.9μM)在48h后對(duì)肺癌細(xì)胞A549、H446和H460的增殖抑制,計(jì)算卡瓦胡椒素B對(duì)肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率與半數(shù)抑制濃度IC50;將不同濃度梯度的卡瓦胡椒素B分別處理非小細(xì)胞肺癌A549、H460細(xì)胞1d、3d、5d從而確定其對(duì)A549

2、、H460細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。流式細(xì)胞儀分析A549、H460細(xì)胞在0.1％DMSO對(duì)照與8.8μM、17.61μM、44μM卡瓦胡椒素B處理24h后的細(xì)胞周期分布狀況,采用DAPI染色法觀測(cè)卡瓦胡椒素B對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征。收集各組藥物處理后的A549、H460細(xì)胞,采用RIPA裂解法提取總蛋白,通過Western-blot法檢測(cè)藥物作用后PARP、Caspase-7、XIAP、Survivin表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果

3、:卡瓦胡椒素B對(duì)這三個(gè)肺癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)均具有顯著的抑制作用,在44μM濃度下具有大約90％的抑制率(P<0.05),在48小時(shí)處理?xiàng)l件下其IC50值分別為16.56μM(A549)、23.30μM(H446)與18.24μM(H460)(P<0.05)。卡瓦胡椒素B處理組G2／M期細(xì)胞比例明顯增加,與空白對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肺癌細(xì)胞在8.8μM卡瓦胡椒素B處理48h后明顯出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)變化,包括細(xì)胞皺縮、胞膜皺摺或出泡以及核碎裂