雷公藤多苷調(diào)控mTORC1信號通路活性改善糖尿病腎病足細胞損傷的作用和機制.pdf

1、[背景/目的]：本文分為二部分。在第一部分中，筆者綜述了糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)足細胞損傷的病理機制及中藥的干預(yù)作用。DN足細胞損傷的病理特征主要是指足細胞結(jié)構(gòu)和功能的改變，包括足突融合、足細胞數(shù)量和密度減少、足細胞凋亡、足細胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化以及足細胞肥大等。這些病理性損傷受控于腎組織內(nèi)多條信號調(diào)控途徑，如哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)

2、通路、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1）通路以及Notch通路等。以雷公藤制劑為代表的一些中藥提取物，如雷公藤多苷、雷公藤甲素、黃芪多糖、黃芪甲苷以及三七總皂苷在體內(nèi)外對DN模型鼠足細胞病變或高糖誘導的足細胞損傷都具有一定的保護作用。在第二部分中，作為本文的重點，筆者借助DN模型鼠，揭示雷公藤多苷（multiglycoside of Tripterygium wilfordii

3、 Hook.f.，GTW）在體內(nèi)改善DN足細胞損傷的作用和機制。
　　[方法]：采用單側(cè)腎切除聯(lián)合腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)的方法而建立DN大鼠模型。將20只大鼠隨機分為4組，正常組5只、模型組5只、GTW組5只、雷帕霉素(Rapamycin)組5只。DN模型建立成功后，分別經(jīng)灌胃給予相應(yīng)各組大鼠雙蒸水2 mL、GTW混懸液(50 mg·kg-1·d-1)、Rapamycin混懸液(1 mg·kg-

4、1·d-1)，每日1次，連續(xù)4周。給藥4周后，處死全部大鼠。實驗過程中，每周監(jiān)測大鼠一般情況、體重、血糖變化情況;每兩周收集大鼠尿液，觀察尿白蛋白變化情況;處死大鼠后，收集大鼠血液、腎組織，測量腎重、腎臟肥大指數(shù)，檢測血清生化指標，觀察腎小球組織形態(tài)特征、超微結(jié)構(gòu)，分析足細胞結(jié)構(gòu)分子蛋白表達特征、腎組織mTORC1相關(guān)信號通路關(guān)鍵信號分子及足細胞結(jié)構(gòu)分子蛋白表達水平。
　　[結(jié)果]：對于DN模型鼠，GTW和Rapamycin均能改

5、善腎臟外觀、腎臟肥大指數(shù)及腎小球組織形態(tài)特征;兩者均能減少尿白蛋白（urinary albumin，UAlb），而且，GTW對血清白蛋白(albumin，Alb)亦有一定的改善作用;兩者均能改善足突形態(tài)，GTW能上調(diào)腎組織podocin、CD2AP蛋白表達水平，Rapamycin只能上調(diào)腎組織podocin蛋白表達水平;兩者對足細胞結(jié)構(gòu)分子nephrin、neph1蛋白表達水平無明顯影響，但均能改善其蛋白結(jié)合水平;兩者均能不同程度地改善

6、腎組織mTORC1相關(guān)信號通路關(guān)鍵信號分子蛋白表達水平;盡管如此，兩者對DN模型鼠體重、血糖、腎功能及肝功能無明顯影響。
　　[結(jié)論]：借助DN模型鼠，筆者闡明①足突融合、podocin和CD2AP蛋白表達下調(diào)以及nephrin和neph1蛋白結(jié)合障礙是足細胞損傷的三種病理特征;②GTW和Rapamycin既能改善足細胞損傷，又能減輕相關(guān)的硬化性腎小球病變;③與Rapamycin不同，GTW既能上調(diào)podocin和CD2AP的蛋白