MiR-181a對PTZ致癇大鼠認知功能影響的研究.pdf

1、目的：近年來microRNA調(diào)控備受關(guān)注，越來越多的研究證實miRNAs在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和神經(jīng)元分化過程扮演著重要角色。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)miRNAs與癲癇及癲癇的認知障礙密切相關(guān)，初步研究顯示PTZ（pentylenetetrazol，戊四氮）致癇大鼠記憶障礙組miR-181a表達明顯上調(diào)，但是miR-181a是如何影響PTZ致癇大鼠的認知功能目前尚不清楚?；谝陨涎芯勘尘?，我們設(shè)計以下實驗對miR-181a可能的生物學機制進行初步探討。

2、
　　方法：采用SD雄性大鼠，通過PTZ腹腔注射（60mg/kg）建立癲癇模型，隨機分為癲癇對照組、干預對照組、miR-181a激動劑干預組，另設(shè)正常對照組，每組各12只。28天后進行Morris水迷宮實驗，然后處死大鼠取海馬組織，檢測海馬組織中miR-181a的表達、海馬神經(jīng)元凋亡情況。
　　結(jié)果：⑴認知行為學研究：定位航行實驗中，隨著訓練天數(shù)的增加，各組的逃避潛伏期逐漸縮短。miR-181a激動劑干預組在各個時間點均高于

3、其余組，正常對照組在各個時間點均低于其余各組。在試驗第5天，與正常對照組比較，癲癇對照組潛伏期明顯延長，P<0.05，具有統(tǒng)計學意義。癲癇對照組與干預對照組潛伏期無明顯差異（P>0.05）。miR-181a激動劑干預組的潛伏期明顯高于癲癇對照組（P<0.05）。miR-181a激動劑干預組與干預對照組相比無明顯差異（P>0.05）。第6天撤掉平臺進行空間探索實驗，與正常對照組比較，癲癇對照組的穿越平臺次數(shù)明顯減少。癲癇對照組、干預對照組

4、和miR-181a激動劑干預組的穿越平臺次數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。正常對照組在目標象限的運動時間比明顯高于癲癇對照組（P<0.05）。與干預對照組比較，miR-181a激動劑干預組在目標象限的運動時間比顯著減少（P<0.05）。⑵miR-181a agomir干預前后miR-181a基因表達：與正常對照組比較，癲癇對照組miR-181a表達明顯上調(diào)（P<0.05），具有統(tǒng)計學意義。與干預對照組比較，miR-181a激動劑干預

5、組表達上調(diào)明顯，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。⑶miR-181a agomir干預前后海馬神經(jīng)元凋亡研究：通過TUNEL檢測發(fā)現(xiàn)與正常對照組比較，癲癇對照組凋亡細胞增加，P<0.05，具有統(tǒng)計學意義。癲癇對照組和干預對照組凋亡細胞無明顯差異。與癲癇對照組比較，miR-181a激動劑干預組凋亡細胞增加12.83％，具有統(tǒng)計學意義。miR-181a激動劑干預組與干預對照組比較，凋亡細胞增加7.67%，差異不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

6、另外，采用Western blot檢測細胞凋亡因子Bcl-2顯示：與正常對照組比較，癲癇對照組Bcl-2蛋白表達明顯減少，P<0.05，差異具有統(tǒng)計學差異。miR-181a激動劑干預組Bcl-2蛋白表達量較干預對照組減少38.88%，差異具有統(tǒng)計學意義
　　結(jié)論：①MiR-181a對PTZ致癇大鼠的認知功能具有負向調(diào)控作用。②MiR-181a明顯減少Bcl-2蛋白表達，顯著增加海馬神經(jīng)元凋亡，這可能是miR-181a引起致癇大鼠認