MicroRNA-328a對(duì)PTZ致癇大鼠記憶功能影響的研究.pdf

1、目的：癲癇患者認(rèn)知功能損害的產(chǎn)生機(jī)制一直備受關(guān)注。前期研究提示存在記憶功能障礙的PTZ(pentylenetetrazole，戊四氮)致癇大鼠腦中海馬組織所表達(dá)的miR-328a明顯下調(diào)，但miR-328a的下調(diào)是否為癲癇大鼠產(chǎn)生記憶功能障礙的原因，以及其發(fā)生作用的潛在機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)通過以下設(shè)計(jì)驗(yàn)證miR-328a在PTZ致癇大鼠海馬組織中的表達(dá)變化，研究其與癲癇大鼠記憶障礙產(chǎn)生的可能關(guān)系及其潛在機(jī)制。
　　方法：48只成年

2、雄性SD大鼠隨機(jī)均分為4組:正常對(duì)照組、PTZ對(duì)照組、miR-328a抑制組、抑制劑對(duì)照組。各組大鼠除特殊干預(yù)外，其他生存條件均相同。飼養(yǎng)28天后分別進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)比較各組大鼠學(xué)習(xí)、記憶功能，并在完成后提取海馬組織，行RT-qPCR檢測(cè)miR-328a表達(dá)量，Targetscan預(yù)測(cè)潛在靶基因，Western Blotting檢測(cè)其潛在下游靶蛋白表達(dá)差異。
　　結(jié)果：
　　(1) Morris水迷宮:①前5日各組

3、大鼠逃避潛伏期均逐日下降。②第5日逃避潛伏期:PTZ對(duì)照組較正常對(duì)照組延長(zhǎng)(P＜0.05);PTZ對(duì)照組與抑制劑對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對(duì)照組延長(zhǎng)(P＜0.05)。③第6日目標(biāo)象限累計(jì)時(shí)間:PTZ對(duì)照組較正常對(duì)照組減少(P＜0.05);PTZ對(duì)照組與抑制劑對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對(duì)照組減少(P＜0.05)。④第6日目標(biāo)象限累計(jì)距離:PTZ對(duì)照組較

4、正常對(duì)照組減少(P＜0.05);PTZ對(duì)照組與抑制劑對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對(duì)照組減少(P＜0.05)。
　　(2) RT-qPCR示各組大鼠海馬miR-328a表達(dá)量:PTZ對(duì)照組較正常對(duì)照組減少(P＜0.05);PTZ對(duì)照組與抑制劑對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對(duì)照組減少(P＜0.05)。
　　(3) Targetscan: miR-3

5、28a在BACE1 mRNA的3'非編碼區(qū)408-415 nt存在互補(bǔ)區(qū)。
　　(4) Western Blotting示各組大鼠海馬BACE表達(dá)量:PTZ對(duì)照組較正常對(duì)照組增多(P＜0.05);PTZ對(duì)照組與抑制劑對(duì)照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對(duì)照組減少(P＜0.05)。其中PTZ對(duì)照組BACE表達(dá)量較正常對(duì)照組增高0.65倍;miR-328a抑制組較抑制劑對(duì)照組BACE表達(dá)量增高0.38