睡眠呼吸暫停綜合征伴高血壓患者CST的變化和CST防治間歇低氧致大鼠高血壓的作用及機(jī)制.pdf

1、第一部分:兒茶酚抑素在睡眠呼吸暫停綜合征伴高血壓患者中的變化和意義
　　[目的]
　　1、觀察睡眠呼吸暫停綜合征伴高血壓患者血中兒茶酚抑素的變化;
　　2、探討兒茶酚抑素在睡眠呼吸暫停綜合征伴高血壓患者中變化的意義。
　　[方法]
　　選擇2014年3月至2015年3月于溫州醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢中心健康體檢者212人作為正常組(Normal，N組)。在附一院心血管內(nèi)科就診，臨床診斷為高血壓的患者且排除睡

2、眠呼吸暫停綜合征(sleep apnea syndrome，SAS)的66人作為高血壓組（Hypertension，H組），在睡眠監(jiān)測(cè)中心進(jìn)行多導(dǎo)聯(lián)睡眠呼吸監(jiān)測(cè)（polysomngraphy, PSG）的患者中，根據(jù)其臨床表現(xiàn)和PSG結(jié)果，篩選出臨床診斷為單純患有睡眠呼吸暫停綜合征且無(wú)高血壓患者52人作為SAS組，睡眠呼吸暫停綜合征伴高血壓患者216人作為SAS+H組。對(duì)每組病人的一般資料進(jìn)行整理、篩查。隨后，每組抽其晨起空腹血，收集血

3、漿樣本。用美國(guó)Rapidbio(RB)公司Elisa試劑盒檢測(cè)血漿中兒茶酚抑素(catestatin，CST)、腎上腺素、去甲腎上腺素及各項(xiàng)生化指標(biāo)的變化。并檢測(cè)各組血漿中有關(guān)氧化/抗氧化損傷指標(biāo)的變化。最后對(duì)CST與血壓、睡眠指標(biāo)、氧化/抗氧化損傷指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　[結(jié)果]
　　1、臨床資料發(fā)現(xiàn)，H組、SAS組和SAS+H組，男性的患病率均顯著高于女性，年齡在40-52歲間。與N組相比，三個(gè)患病組的體重指數(shù)(bod

4、y mass index，BMI)值、頸腰臀圍值均顯著高了，反應(yīng)睡眠質(zhì)量的睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)(apnea hyponea index，AHI)，SAS病人顯著比N組高，而最低血氧、平均血氧則顯著比N組低。H組、SAS組、SAS+H組的收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)均顯著高于N組。
　　2、與N組相比，SAS+H組血中谷氨酸氨基

5、轉(zhuǎn)移酶活性(alanineaminotransferase，ALT)、尿素氮(blood urea nitrogen，BUD)、尿酸(uric acid，UA)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)的含量均顯著高了（均p＜0.05），而高密度脂蛋白含量低了(p＜0.05);與H組相比，SAS+H組的ALT活

6、性，BUD，UA，TC的含量均顯著高了（均p＜0.05）。
　　3、與N組相比，H組、SAS組、SAS+H組病人血漿中的CST水平顯著低了（均p＜0.05），而腎上腺素(epinephrine，E)、去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)水平顯著高了（均p＜0.05）;與H組相比，SAS+H組病人血漿中的CST水平顯著低了（＜0.05），而NE水平顯著高了(p＜0.05)。
　　4、與N組相比，SAS+H組血漿中

7、微量丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量、髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性顯著高了（均p＜0.01），而谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-PX)活性、過(guò)氧化氫酶(catalase，CAT)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、羥自由基抑制率顯著低了(均p＜0.01)。
　　5、SAS+H組患者血漿中CST濃度與

8、各項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)性分析。
　　5.1、Pearson相關(guān)性分析顯示:SAS+H組患者血漿中CST濃度與動(dòng)脈血氧濃度呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.378，p＜0.05;而與體重指數(shù)，AHI，AHI分級(jí)，呼吸紊亂指數(shù)(respiratory disturbance index，RDI)，呼吸暫停指數(shù)（apnea index，AI），SBP，DBP呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為:-0.430、-0.542、-0.832、-0.542、-0.519

9、、-0.762、-0.670，均p＜0.05。
　　5.2、Pearson相關(guān)性分析顯示:SAS+H組患者血漿中CST濃度和病人ALT，AST，ALT/AST，TC，TG，LDL呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為:-0.548、-0.448、-0.555、-0.428、-0.479、-0.442，均p＜0.05。
　　5.3、Pearson相關(guān)性分析顯示:SAS+H組患者血漿中CST濃度和病人血漿MDA濃度呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r為-0

10、.418，p＜0.05;而和病人血漿中GSH-PX，CAT，SOD，羥自由基抑制率呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.464、0.477、0.414、0.424，均p＜0.05。
　　[結(jié)論]
　　1、SAS伴高血壓患者血漿CST表達(dá)水平下調(diào)，這可能是SAS伴高血壓發(fā)生的因素之一。
　　2、SAS伴高血壓患者CST表達(dá)水平的降低可能與氧化應(yīng)激機(jī)制有關(guān)。
　　第二部分:兒茶酚抑素防治間歇低氧致大鼠高血壓的作用及機(jī)制

11、>　　[目的]
　　1、探討CST防治間歇低氧致大鼠高血壓的作用是否與氧化應(yīng)激有關(guān);
　　2、探討CST參與氧化應(yīng)激反應(yīng)的調(diào)節(jié)是否與Nrf2-ARE信號(hào)通路有關(guān)。
　　[方法]
　　1、模型建立:成年健康雄性SPF級(jí)SD大鼠30只，體重220～250g，隨機(jī)均分為三組:Control組、IH（間歇低氧組）組、IH+CST組，每組10只。后兩組置于循環(huán)充入氮?dú)夂蛪嚎s空氣的透明有機(jī)玻璃密封的間歇低氧艙中，艙內(nèi)氧濃度最

12、高為21+0.5％、最低為5±0.5％，間歇低氧-復(fù)氧循環(huán)時(shí)間為120s(60s-60s)，Control組置于循環(huán)充入壓縮空氣的常氧艙內(nèi)，每天8小時(shí)，連續(xù)3周。IH+CST組于間歇低氧前3天皮下埋植含CST的微量滲透泵(20 nmol/kg.d)，其余兩組皮下埋植含生理鹽水的微量滲透泵。
　　2、DSI無(wú)線遙測(cè)系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)評(píng)估動(dòng)脈血壓的動(dòng)態(tài)變化。
　　3、左心導(dǎo)管法測(cè)量各組大鼠收縮壓、舒張壓和平均壓。
　　4、用南京

13、建成試劑盒檢測(cè)各組大鼠血漿中氧化/抗氧化損傷指標(biāo)的變化。
　　5、用Western Blot法檢測(cè)各組大鼠主動(dòng)脈和腎組織中核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor E2 related factor2，Nrf2)、血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)蛋白表達(dá)的變化。
　　[結(jié)果]
　　1、DSI無(wú)線遙測(cè)系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)艙內(nèi)大鼠的動(dòng)態(tài)血壓發(fā)現(xiàn):第8天后，IH組大鼠血壓開(kāi)始升高，至第10天起

14、血壓顯著高于Control組（P＜0.05）;IH+CST組在第12天開(kāi)始下降，至第14天，IH+CST組血壓明顯低于IH組（P＜0.05）。
　　2、左心導(dǎo)管法測(cè)定大鼠收縮壓、舒張壓和平均壓顯示:IH組大鼠收縮壓、舒張壓、平均壓均比Control組高（P＜0.01）;而IH+CST組則顯著低于IH組（P＜0.01）。
　　3、與Control組相比，IH組大鼠的血漿MPO，MDA含量顯著高了(p＜0.05)，SOD、羥自由

15、基抑制率顯著低了（均p＜0.01）;而與IH組相比，IH+CST組大鼠的血漿MPO，MDA顯著低了(p＜0.05)，SOD、羥自由基抑制率顯著高了(均p＜0.01)。
　　4、與Control組相比，IH組大鼠主動(dòng)脈和腎組織胞漿、胞核中Nrf2蛋白的表達(dá)均顯著下調(diào)（均p＜0.05）;當(dāng)給予CST治療后，與IH組相比，胞漿中Nrf2蛋白的表達(dá)顯著下調(diào)(p＜0.05)，而胞核中Nrf2蛋白的表達(dá)顯著上調(diào)(p＜0.05)。與Contro