3個(gè)早發(fā)糖尿病家系HNF1α基因篩查研究.pdf

1、目的：通過對(duì)3個(gè)疑為青少年成人起病型糖尿病3型(MODY3)的早發(fā)糖尿病家系成員HNF1α基因分子篩查，明確所研究家系中是否存在HNF1α基因突變位點(diǎn)，探討該基因分子缺陷是否為其主要致病因素。
　　方法：選擇3個(gè)臨床疑似MODY3的早發(fā)糖尿病家系(F1、F2、F3)，調(diào)查各家系成員糖尿病的發(fā)病情況;抽取3個(gè)家系共27例成員的外周靜脈血，其中F1家系15人、F2家系7人、F3家系5人，采集受試者身高、體重、血清生化等相關(guān)臨床指標(biāo)，提

2、取外周血基因組DNA，應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)對(duì)HNF1α基因全部外顯子及外顯子內(nèi)含子拼接區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物直接測序，測序結(jié)果與NCBI數(shù)據(jù)庫中標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對(duì)，對(duì)發(fā)現(xiàn)的堿基改變進(jìn)行分析。該研究另選16例無血緣關(guān)系的健康人群作為對(duì)照組，男性8人，女性8人，均無糖尿病家族史。
　　結(jié)果：⑴發(fā)現(xiàn)3個(gè)編碼區(qū)錯(cuò)義突變:R272S、I27L、S487N，2個(gè)同義突變:I17L、L459L，6個(gè)非編碼區(qū)堿基改變:IVS1+91A＞

3、G、IVS5+9C＞G、IVS7+7G＞A、IVS8-24T＞C、IVS9+197G＞T、IVS9+438G＞A。⑵堿基改變?cè)贔1家系中均有存在，并且R272S、IVS5+9C＞G、IVS8-24T＞C、IVS9+197G＞T、IVS9+438G＞A只出現(xiàn)于該家系中;其他4種編碼區(qū)堿基改變及2種非編碼區(qū)堿基改變?cè)?個(gè)家系及健康對(duì)照組均有檢出。⑶F1家系中糖尿病患者均攜帶HNF1α基因4號(hào)外顯子雜合突變c.814C＞A，該突變位點(diǎn)導(dǎo)致第2