簡介：本文分為兩個部分進行探討第一部分IL10極化巨噬細胞的體外研究目的體外研究觀察IL10極化在磨損顆粒刺激骨髓來源的巨噬細胞中的作用1確定IL10極化巨噬細胞的理想用量。2觀察IL10對磨損顆粒刺激的骨髓來源的巨噬細胞的基因表達的影響。3觀察IL10對磨損顆粒刺激的骨髓來源的巨噬細胞的蛋白表達的影響。材料和方法1將RAW2647細胞種入六孔板中（2105個孔），46小時后細胞貼壁，加入IL10進行刺激，細胞分為三組不加IL10（對照組）加入10ΜGIL10加入20ΜGIL10。加入IL10進行刺激后48小時收集細胞提取蛋白。WESTERNBLOT方法檢測STAT3和磷酸化STAT3的表達。2原代骨髓起源的巨噬細胞的分離與培養(yǎng)CO2氣體法處死SPRAGUEDAWLEY大鼠，75％酒精中浸泡3次，每次10分鐘。分離大鼠股骨和脛骨，用注射器和DMEM完全型培養(yǎng)基將骨髓細胞沖入50ML無菌離心管中，用細胞過濾器過濾細胞并離心，接著加入4攝氏度預冷的紅細胞裂解液裂解30分鐘，裂解紅細胞完成后，用1PBS清洗細胞2次，用70％DMEM完全培養(yǎng)基和30％L929細胞培養(yǎng)上清重懸細胞進行培養(yǎng)。過夜后將未貼壁的細胞丟棄。3將骨髓起源的巨噬細胞種入12孔盤中（5105個孔），待細胞貼壁后，將其分為三組第一組不加任何刺激（陰性對照組）第二組加入2MGPMMA顆粒（陽性對照組）第三組加入2MGPMMA顆粒和20NGIL10（處理組）。細胞刺激5天后收集細胞提取總RNA進行基因表達檢測。RTPCR法檢測IL1Β、CD80、MHCⅡ、CD163、IL10、TGFΒ1和CCR2基因表達的變化。4將5103個細胞種入8孔CHAMBERSLIDE里，待細胞貼壁后，將細胞隨機分為三組第一組不加任何刺激（陰性對照組）第二組加入2MGPMMA顆粒（陽性對照組）第三組加入2MGPMMA顆粒和20NGIL10處理組。刺激一周后進行細胞免疫化學染色，檢測INOS和CD163的表達情況。結(jié)果1WESTERNBLOT法檢測RAW2647細胞經(jīng)過不同濃度IL10刺激后總的STAT3和磷酸化的STAT3表達情況。從實驗結(jié)果看，經(jīng)過IL10刺激的RAW2647表達總的STAT3沒有變化，但是磷酸化的STAT3的表達隨著IL10濃度的增加表達逐漸增強。2實時定量RTPCR方法檢測經(jīng)過PMMA顆?；騊MMA顆粒與IL10共同刺激的骨髓起源的巨噬細胞中IL1Β、CD80、MHCⅡ、CD163、IL10、TGFΒ1和CCR2基因表達的變化。實驗數(shù)據(jù)表明PMMA顆粒刺激組能夠誘導骨髓起源的巨噬細胞IL1Β、CD80和MHCⅡ的基因表達。經(jīng)過IL10處理的組能夠減少PMMA顆粒刺激骨髓起源的巨噬細胞中IL1Β的基因表達P＜001。而其他的M1標記物CD80、MHCⅡ的基因表達沒有明顯的變化。同時，IL10處理組能明顯的增加骨髓起源的巨噬細胞中CD163、IL10、TGFΒ1和CCR2的基因表達P＜001。3細胞免疫組織化學染色用于檢測特異性M1標記物INOS和M2標記物CD163的表達。細胞免疫組織化學染色顯示PMMA顆粒能夠顯著誘導INOS的表達P＜0001。IL10處理組能明顯抑制PMMA顆粒誘導INOS表達的作用。IL10處理組還可以明顯促進骨髓起源的巨噬細胞表達CD163P＜0001。結(jié)論120NGIL10是理想的實驗研究用量。2IL10可以促進M2型巨噬細胞的基因表達。3IL10能夠促進PMMA顆粒刺激的骨髓來源的巨噬細胞分化為M2型巨噬細胞并且減少PMMA顆粒刺激的骨髓來源的巨噬細胞的分化為M1巨噬細胞。第二部分IL10通過極化巨噬細胞減輕磨損顆粒誘導的骨溶解目的1建立模仿假體松動的AIRPOUCH動物模型。2觀察IL10能否改善磨損顆粒引起的骨溶解。3探討IL10減輕磨損顆粒引起的骨溶解的具體機制。材料和方法1建立實驗動物模型剔除BALBC小鼠背部毛發(fā)露出背部部分，用碘伏消毒背部皮膚，用5毫升注射器皮下注射3毫升過濾過的無菌空氣在皮下形成一個空氣囊泡。每隔一天向空氣囊泡中注射一次空氣以維持空氣囊泡形態(tài)。6天后，通過手術方法從供體小鼠得到一部分股骨（約05厘米）或一部分頭蓋骨（約06厘米03厘米）并手術置入空氣囊泡中。24小時后，所有小鼠分為三組（每組8只）第一組只注射200ΜLPBS陰性對照組第二組注射200ΜLUHMWPE顆粒（2毫克）（陽性對照組）第三組注射200ΜLUHMWPE顆粒并且20NGIL10溶解其中（處理組）。IL10或PBS每隔一天補注射一次。2MICROCT掃描在手術置入股骨或頭蓋骨24后和處死小鼠之前分別進行MICROCT掃描。掃描參數(shù)設置為30ΜMISOTROPICVOXELSIZE400PROJECTIONS200MSEXPOSURETIME70KWVOLTAGE114ΜACURRENT。用MICROCT分析軟件進行三維圖像的重建和骨密度分析。用骨體積與總體積的比值分析總的骨質(zhì)丟失情況。3組織病理學檢測從第一次注射IL10開始開始記錄，七天后處死所有實驗小鼠，收集股骨或頭蓋骨及其周圍完整的炎性反應膜。一部分炎性膜凍存于負80攝氏度低溫冰箱中用于實時定量RTPCR和WESTERNBLOT分析STAT1、NFΚ3P65、JNK1、STAT3、SHIP、STAT6和PPARΓ的基因或蛋白表達水平。頭蓋骨和炎性反應膜包埋于冰凍切片包埋液中凍存于負80攝氏度低溫冰箱，制備冰凍切片，用于檢測TRAP陽性細胞的數(shù)量。股骨和炎性反應膜用10％的福爾馬林固定液固定，用10％EDTA溶液脫鈣一周后制備石蠟切片。HE染色用于觀察不同組別之間的炎性反應膜的厚度以及細胞的浸潤情況。免疫組織化學染色用于檢測INOS或CD163的表達情況。結(jié)果1炎性反應膜的特征UHMWPE顆粒誘發(fā)了明顯的局部炎癥，導致與陰性對照組相比，其他兩組炎性反應膜的厚度和細胞浸潤數(shù)量的明顯增加。陰性對照組的炎性反應膜的平均厚度為1258±558ΜM，而陽性對照組的炎性反應膜的平均厚度為44981±1059ΜMP＜0001。同時細胞計數(shù)顯示細胞浸潤數(shù)量從4749±144個細胞平方毫米（陰性對照組）增加到6564±144個細胞平方毫米（陽性對照組）P＜0001。盡管在所有UHMWPE顆粒處理組中巨噬細胞的比例與陰性對照組相比明顯增加，但是，IL10處理組的細胞浸潤數(shù)量明顯減少（5674±139個細胞平方毫米，P＜0001）。2IL10在M2型巨噬細胞極化和骨溶解中的作用包裹有股骨的炎性反應膜的組織學評估表明與陰性對照組相比其他兩組炎性反應膜中INOS陽性巨噬細胞和CD163陽性巨噬細胞明顯增多P＜001。然而與只有UHMWPE顆粒處理的陽性對照組相比IL10處理組減弱了INOS蛋白的表達P＜005，另一方面IL10處理組明顯增強了CD163蛋白的表達P＜005。TRAP染色表明IL10處理組的切片中TRAP陽性細胞的數(shù)量明顯減少，而只有UHMWPE顆粒處理的切片表現(xiàn)為很強的TRAP活性P＜0001。MICROCT掃描顯示IL10能夠明顯的減輕UHMWPE顆粒誘導的骨溶解，骨密度BMD分析表明IL10處理組的骨密度明顯高于只有UHMWPE處理的陽性對照組P＜0001，同時，骨體積與總體積的比值分析表明IL10處理組的骨體積比例更高P＜0001。3實時定量RTPCR檢測STAT1、NFΚBP65、JNK1、STAT3、SHIP、STAT6和PPARΓ的基因表達數(shù)據(jù)顯示經(jīng)過IL10處理后不僅抑制了STAT1P＜005、NFΚBP65P＜005和JNK1P＜001的基因表達，而且誘導了STAT3P＜005的基因表達。然而，STAT6、SHIP和PPARΓ的基因表達沒有明顯的差異。4WESTERNBLOT檢測信號通路蛋白IL10處理組的樣品與只有UHMWPE顆粒處理組樣品相比表現(xiàn)為低表達磷酸化的STAT1和磷酸化的NFΚBP65。同時有趣的是IL10除了增強磷酸化的STAT3蛋白表達外還可以增加總的STAT3的蛋白表達。結(jié)論1IL10能夠減輕磨損顆粒誘導的骨溶解。2IL10能夠極化巨噬細胞分化為M2型巨噬細胞。3IL10主要是通過抑制JAKSTAT1和NFΚBP65信號通路對的活性和增強JAKSTAT3信號通路的活性極化巨噬細胞。

簡介：分類號R782密級公開⑧單位代碼10422SHANDONGUNIVERSITY博士學位論文DISSERTATIONFORDOCTORALDEGREE同等學力申請博士學位論文題目糖尿病對口腔種植體骨整合影響的作用機制研究THEEFFECTANDMECHANISMOFDIABETESONOSSEOINTEGRATIONOFDENTALIMPLANTS作者培養(yǎng)姓名單位柳忠豪口腔醫(yī)學院專業(yè)名稱口腔臨床醫(yī)學指導合作教師導師徐欣教授2015年9月1O日00●10●■I202號7子學辦●象∥山東大學博士學位論文目錄中文摘要1英文摘要6縮略詞8前言9日U舌。。。。。。。。。。。。。。。‘‘‘‘‘?！！?。’。。9第一部分高糖對MC3T3一E1細胞成骨分化的影響及其機制研究16材料與方法16結(jié)果25討{侖33結(jié)論35參考文獻35第二部分糖尿病對大鼠種植體周圍骨結(jié)合的影響及其機制研究39材料與方法39結(jié)果47討{侖52結(jié)論53參考文獻54總結(jié)57致謝58攻讀博士學位期間發(fā)表論文情況59綜J苤60

簡介：目前國際上已將旋毛蟲屬分為8個種即旋毛蟲TRICHINELLASPIRALIST1、鄉(xiāng)土旋毛蟲TNATIVET2、布氏旋毛蟲TBRITOVIT3、偽旋毛蟲TPSEUDOSPIRALIST4、米氏旋毛蟲TMURRELLIT5、納氏旋毛蟲TNELSONIT7、巴布亞旋毛蟲TPAPUAET10、津巴布韋旋毛蟲TZIMBABWENSIST11以及3個分類地位尚未確定的基因型GENOTYPE即TRICHINELLAT6、T8和T9。其中偽旋毛蟲、巴布亞旋毛蟲和津巴布韋旋毛蟲為無囊包的旋毛蟲。由于不同種旋毛蟲的地理分布、宿主范圍、對宿主的致病性及宿主對不同蟲種的免疫應答等方面存在有明顯差異故旋毛蟲抗原的研究對旋毛蟲病的發(fā)病機理、免疫診斷及免疫預防等均具有重要意義。為了觀察旋毛蟲和偽旋毛蟲抗原的差異本文應用十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳SDSPAGE和雙向電泳技術TWODIMENSIONALELECTROPHESIS2DE對旋毛蟲和偽旋毛蟲肌幼蟲的蟲體可溶性抗原SOLUBLEANTIGENSAG及排泄分泌EXCRETYSECRETYES抗原進行了分析。材料與方法1旋毛蟲種與感染動物本實驗所用的旋毛蟲蟲種為旋毛蟲T1和偽旋毛蟲T4均引自國際旋毛蟲參考中心由本教研室昆明小鼠傳代保種。4周齡健康雄性SD大鼠購自鄭州大學醫(yī)學院實驗動物中心。將不同旋毛蟲蟲種感染SD大鼠后8周處死全身肌肉人工消化后收集純凈的肌幼蟲。2肌幼蟲可溶性抗原與ES抗原的制備將人工消化后收集純凈的旋毛蟲肌幼蟲加入組織裂解液放入勻漿器中在冰浴上研磨約12H隨后在超聲波細胞粉碎機破碎離心收集上清。將純凈的旋毛蟲肌幼蟲置于含有1640培養(yǎng)基不含血清的培養(yǎng)皿中在5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2024H收集上清透析和冷凍干燥后得到純化ES抗原。BRADFD方法測蛋白濃度后分裝80℃保存。3十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳SDSPAGE將制備好的T1、T4肌幼蟲可溶性抗原和ES抗原進行SDSPAGE染色后觀察不同分子量的電泳條帶然后用GENEGENIUS凝膠圖像分析儀獲得圖像并加以分析尋找T1和T4的差異蛋白帶。4雙向電泳2DE應用等電聚焦IEF電泳和SDSPAGE將T1、T4肌幼蟲可溶性抗原和ES抗原的蛋白分離每種樣品重復3次染色后得到蛋白雙向電泳圖譜應用POWERLOOK1120型圖像掃描儀分辨率為300BPI像素8BITS獲得凝膠圖像經(jīng)IMAGEMASTER2DPLATINUM60凝膠圖像分析軟件進行圖像調(diào)整、點檢測、點匹配、數(shù)據(jù)分析后找出差異蛋白點。結(jié)果1T1、T4肌幼蟲可溶性抗原的SDSPAGE結(jié)果通過SDSPAGE分析發(fā)現(xiàn)T1肌幼蟲可溶性抗原蛋白有22條帶22162KDA1488KDA其中主帶5條11519、6556、5393、2908、1488KDA的蛋白量占可溶性抗原蛋白總量的474％。T4肌幼蟲可溶性抗原蛋白有18條帶18528KDA1427KDA其中主帶7條11930、6856、561、4850、4074、2836、1427KDA的蛋白量占可溶性蛋白總量的667％。T1肌幼蟲可溶性抗原具有6條特異的蛋白帶5972、4437、2366、2236、1826、1634KDA而T4肌幼蟲可溶性抗原具有4條特異的蛋白帶13260、11930、3526、3102KDA。2T1、T4肌幼蟲ES抗原的SDSPAGE結(jié)果通過SDSPAGE分析發(fā)現(xiàn)T1肌幼蟲ES抗原具有10條蛋白帶11321KDA1437KDA其中4條主帶5565、5041、4361、1437KDA的蛋白量占ES抗原蛋白總量的857％。T4肌幼蟲ES抗原9條蛋白帶10471KDA1451KDA其中4條主帶5458、3680、2170、1451KDA的蛋白量占ES抗原蛋白總量的813％。T1、T4肌幼蟲ES抗原的蛋白帶均不相同。3T1、T4肌幼蟲可溶性抗原、ES抗原的SDSPAGE結(jié)果比較T1肌幼蟲可溶性抗原的8條蛋白帶11519、5394、4897、4437、2908、2236、1927、1488KDA與ES抗原的8條蛋白帶11321、5565、5041、4361、3142、2221、1967、1437KDA分子量相近。T4肌幼蟲可溶性抗原的5條蛋白帶5611、3526、2836、2065、1427KDA與ES抗原的5條蛋白帶5458、3680、2891、2170、1451KDA分子量相近。4T1、T4肌幼蟲可溶性抗原的雙向電泳結(jié)果T1肌幼蟲可溶性抗原具有193±12個蛋白點匹配點數(shù)為150個匹配率為81％分子量主要為1122KDA、2564KDA及100144KDA所對應的等電點ISOELECTRICPOINTPI分別為4782、4565及57T4肌幼蟲可溶性抗原具有175±9個蛋白點匹配點數(shù)為141個匹配率為82％分子量主要為1221KDA及2590KDA所對應的PI分別為495及4596。5T1、T4肌幼蟲ES抗原的雙向電泳結(jié)果T1肌幼蟲ES抗原具有82±6個蛋白點匹配點數(shù)為74個匹配率為84％分子量主要為1316KDA、1822KDA及4055KDA所對應的P1分別為47、3862及59T4肌幼蟲ES抗原69±5個蛋白點匹配點數(shù)為57個匹配率為80％分子量主要為1015KDA、1725KDA及2955KDA所對應的PI分別為4765、466及57。結(jié)論1旋毛蟲與偽旋毛蟲肌幼蟲可溶性抗原蛋白組份均多于其ES抗原。2旋毛蟲肌幼蟲可溶性抗原及ES抗原的蛋白組份與偽旋毛蟲的均不相同。旋毛蟲肌幼蟲可溶性抗原及ES抗原的蛋白組份均比偽旋毛蟲的復雜。

簡介：目的支氣管哮喘以下簡稱哮喘是以氣道高反應性為特征的慢性炎癥性疾病被世界醫(yī)學界公認為四大頑癥之一。其病理學改變以氣道內(nèi)嗜酸性粒細胞、肥大細胞、淋巴細胞和巨噬細胞浸潤為主。盡管近年來對哮喘發(fā)病機制和治療的研究取得了一定進展但其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)仍有增高的趨勢并且部分病例常規(guī)治療效果不理想。因此對哮喘發(fā)病機理的深入研究和尋找其他有效的治療方法具有非常重要的意義。本文旨在通過在體和離體氣管環(huán)試驗探討過氧化物酶體增殖物活化受體ΓPEROXISOOMEPROLIFERATACTIVATEDRECEPTΓPPARΓ配體激動劑羅格列酮ROSIGLITAZONERSG對氣道平滑肌收縮作用的影響為其是否能應用于哮喘的臨床治療提供新的理論依據(jù)。方法1、雄性SD大鼠75只采用隨機數(shù)字表法將其分為正常組A組、哮喘組B組、RSG治療組C組每組25只制備各組大鼠的離體去上皮氣管環(huán)分別為A、B、C組。2、哮喘大鼠模型的建立第1D、第7DB、C組大鼠腹腔注射10％的卵蛋白OVALBUMINOVA10MG卵蛋白和100MGALOH3溶解于1ML蒸餾水中1ML致敏A組給予等量蒸餾水腹腔注射。第14D30DB、C組大鼠用50UL的2MGML1濃度OVA滴鼻C組大鼠在滴鼻前用4MGKG1的鹽酸羅格列酮片稀釋于5ML生理鹽水中灌胃治療B組大鼠用等量生理鹽水灌胃A組大鼠用等量生理鹽水滴鼻和灌胃。3、末次激發(fā)后每組取出5只大鼠肺組織HE染色比較支氣管粘膜和粘膜下嗜酸性粒細胞和淋巴細胞浸潤情況。4、末次激發(fā)后測定三組大鼠的引喘潛伏期。5、將大鼠離體氣管環(huán)置于37℃裝有KREBSHENSELEIT液和95％O2、5％CO2的浴槽中通過張力換能器、生物放大器與生理記錄儀相連采用T軟件采集記錄氣管環(huán)張力變化。1比較005MMOLL1、05MMOLL1、5MMOLL1濃度梯度乙酰膽堿ACETYCHOLINEACH激發(fā)下三組大鼠離體氣管環(huán)收縮張力大小。2比較001MMOLL1、01MMOLL1、1MMOLL1三種濃度RSG對ACH預收縮的A、B組離體氣管環(huán)的舒張作用。3觀察吲哚美辛、亞甲基藍、普萘洛爾、左旋硝基精氨酸甲NGNITROLARGININEMETHYLESTERHYDROCHLIDELNAME、伊比蝎毒素IBERIOTOXINIBTX對RSG舒張A、B組氣管環(huán)作用的影響。4觀察001MMOLL1、01MMOLL1、1MMOLL1三種濃度RSG對A、B組離體氣管環(huán)的ACH量效曲線的影響。結(jié)果1、肺組織HE染色B組支氣管粘膜和粘膜下嗜酸性粒細胞和淋巴細胞浸潤較其余兩組明顯增高差異有統(tǒng)計學意義均P005N20。3吲哚美辛、LNAME、亞甲基藍普萘洛爾不能阻斷A組大鼠氣管環(huán)RSG引起的舒張差異無統(tǒng)計學意義均P005N20LNAME能阻斷B組RSG引起的舒張IBTX對A組和B組RSG引起的舒張均有阻斷作用且對A組的阻斷作用更強其差異有統(tǒng)計學意義均P005N20。4三種濃度RSG使A、B組大鼠立體氣管環(huán)ACH量效曲線明顯右移。結(jié)論RSG能減輕哮喘大鼠氣道炎癥細胞浸潤RSG能延長哮喘潛伏期RSG能降低氣道收縮張力RSG對ACH預收縮的大鼠氣管環(huán)可產(chǎn)生舒張作用此作用可能與前列環(huán)素、胞漿可溶性鳥苷酸環(huán)化酶、Β腎上腺素受體無關而可能與大電導鈣激活鉀通道LARGECONDUCTANCECALCIUMACTIVATEDPOTASSIUMCHANNELSBKCA、一氧化氮NITRICOXIDENO有關RSG使ACH收縮氣道平滑肌量效曲線右移。

簡介：目的探討壯骨方防治2型糖尿病性骨質(zhì)疏松的作用機理，為其臨床應用提供科學的實驗依據(jù)。方法從100只WISTAR大鼠中隨機抽取24只作為正常對照組（NC組）喂以標準飼料，其余76只大鼠作為糖尿病組（DM組）喂以高脂飼料。喂養(yǎng)4周后，對DM組大鼠注射40MGKG鏈脲佐菌素（STZ）造模，注射STZ72小時后測大鼠空腹血糖。將符合糖尿病動物模型標準的大鼠74只按照隨機分組原則分為以下三組糖尿病對照組（DC組），羅格列酮鈉治療組（RS組），中藥治療組（TCM組）。TCM組用壯骨方灌胃，2ML100G，其中含生藥075GML，用蒸餾水溶解。RS組用羅格列酮鈉片灌胃，2ML100G，其中含羅格列酮鈉0072MGML，用蒸餾水溶解。NC組及DC組用蒸餾水灌胃，2ML100G。四組大鼠灌胃均為1次天，灌胃后正常進食。經(jīng)以上處理后第4、8、12周末分別處死各組大鼠7～8只。給藥前后均測定血清空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、腫瘤壞死因子?。═NFΑ）、骨鈣素（BGP）水平，并計算出胰島素敏感性指數(shù)（ISI）。取大鼠右后肢脛骨制成脫鈣骨切片并在光鏡下觀察骨組織形態(tài)學變化，并測定與骨量及骨結(jié)構密切相關的幾個重要靜態(tài)參數(shù)。數(shù)據(jù)結(jié)果用X±S描述，組間比較采用T檢驗。結(jié)果1高脂飼料喂養(yǎng)的DM組大鼠體重、身長、肥胖指數(shù)（LEE，指數(shù)）均較NC組升高，差異具有顯著性（P2給藥前，DC組、RS組、TCM組FBG、FINS均高于NC組（P3給藥前，DC組、RS組、TCM組TNFΑ水平高于NC組，BGP水平低于NC組且差異均具有顯著性（P4骨計量學結(jié)果給藥后DC組與NC組、RS組、TCM組相比，TBAR、TBPM、％TBAR、TBN和TBSP差異都有非常顯著性意義（P5光鏡下觀察與DC組比較，給藥后的RS組、TCM組大鼠骨組織病理改變明顯減輕，表現(xiàn)為骨小梁數(shù)目逐漸增多，骨小梁逐漸增粗，小梁間的間隙逐漸變小，且小梁表面成骨細胞數(shù)也逐漸增多，以TCM組效果更明顯。但與NC組比較，給藥后的RS組、TCM組骨組織形態(tài)稍差。結(jié)論1DM組大鼠高脂飲食后注射小劑量STZ，建立了實驗性2型糖尿病大鼠模型，與人類2型糖尿病的臨床特征類似。2壯骨方能有效的降低2型糖尿病大鼠的血清TNFΑ水平，升高血清BGP水平，從而對抑制骨吸收、促進骨形成有一定作用。32型糖尿病大鼠存在明顯的骨組織微結(jié)構改變，壯骨方對其骨質(zhì)疏松病理狀態(tài)有一定的改善作用。4壯骨方能有效的降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖、空腹胰島素水平，對提高胰島素敏感性，改善胰島素抵抗狀態(tài)有一定作用。

簡介：目的研究預注法對維庫溴銨、阿曲庫銨和羅庫溴銨肌松效應的作用，評價預注法應用于臨床的可行性。方法選擇山西省腫瘤醫(yī)院擬行下腹部手術的住院病人90例，采用隨機方法將其分為九組其中Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組為常規(guī)組，Ⅳ組、Ⅶ組預注維庫溴銨，預注劑量分別為001MGKG、002MGKG；Ⅴ組、Ⅷ組預注阿曲庫銨，預注劑量分別為005MGKG、01MGKG；Ⅵ組、Ⅸ組預注羅庫溴銨，預注劑量分別為006MGKG、012MGKG，每組10例。術前靜脈注入咪唑安定004MGKG，三角肌肌肉注射氟哌利多004MGKG，嗎啡008MGKG，阿托品05MGKG。采用芬太尼3～4UGKG，異丙酚1～2MGKG行麻醉誘導，患者入睡后啟動肌松監(jiān)測儀定標，將此時單刺激引起的肌顫搐反應強度T1定為100％作為對照T0，T1穩(wěn)定在100％35分鐘后，從下肢靜脈快速5秒鐘內(nèi)注入肌松劑。當神經(jīng)肌肉阻滯達最大程度時T10完成氣管內(nèi)插管并對氣管插管條件作出評價。2％普魯卡因持續(xù)靜脈輸注，復合吸入安氟醚，根據(jù)麻醉深度調(diào)整其吸入濃度。當肌松恢復至T1T025％時間斷給予肌松劑。采用GANONTEKNIKAIREL公司生產(chǎn)的TOFWATCHSX加速度肌松監(jiān)測儀監(jiān)測拇內(nèi)收肌的肌顫搐變化，測定肌松起效時間、三分鐘末神經(jīng)肌肉阻滯程度、達最大阻滯時強直刺激后肌顫搐計數(shù)PTC計數(shù)等指標。結(jié)果各組患者的年齡、性別構成比、體重、血紅蛋白含量經(jīng)統(tǒng)計學檢驗總體差別無顯著性P＞005；麻醉誘導前后、插管過程的血壓和心率經(jīng)統(tǒng)計學檢驗總體差別無顯著性P＞005。肌松起效時間①Ⅰ組～Ⅲ組肌松起效時間分別為26729±2191秒，19155±2960秒，9952±942秒，經(jīng)檢驗P＜001差別有統(tǒng)計學意義，即羅庫溴銨Ⅲ組起效最快，阿曲庫銨Ⅱ組次之，維庫溴銨Ⅰ組最慢。②Ⅳ組和Ⅶ組起效時間分別為12653±1228秒、12072±793秒明顯快于Ⅰ組P＜001；Ⅴ組和Ⅷ組起效時間分別為11948±1130秒、11859±790秒明顯快于Ⅱ組P＜001；Ⅵ組和Ⅸ組起效時間分別為9607±1160秒、10010±863秒與Ⅲ組9952±942秒相比，P＞005，尚不能認為其有差別。③分別將Ⅳ組和Ⅶ組、Ⅴ組和Ⅷ組、Ⅵ組和Ⅸ組相比，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗P＞005，其差別無顯著性。④維庫溴銨達最大阻滯速度快于阿曲庫銨和羅庫溴銨，且預注法并不影響肌松藥的此效應。⑤預注量為誘導劑量的20％時，維庫溴銨組和阿曲庫銨組各有1例患者T1T0下降約20％，羅庫溴銨組有1例下降幅度達48％。⑥各組氣管插管條件均達到了較高的優(yōu)良率，且各組兩兩比較無顯著性差異。本試驗中各組均未發(fā)現(xiàn)患者在注射肌松藥后出現(xiàn)皮膚潮紅、皮疹、血壓下降、支氣管痙攣等不良反應。結(jié)論預注法可縮短維庫溴銨和阿曲庫銨肌松起效時間，但增加預注劑量不能進一步縮短其起效時間，且有出現(xiàn)嚴重神經(jīng)肌肉阻滯的危險，故采用10％誘導劑量進行預注，應用于臨床安全可靠。而對于羅庫溴銨，預注法效果不明顯。三種非去極化肌松藥起效時間存在差異，維庫溴銨、阿曲庫銨較長，羅庫溴銨較短；肌松作用深度神經(jīng)肌肉達最大阻滯時PTC值亦有顯著差別，維庫溴銨對神經(jīng)肌肉的阻滯作用較強，阿曲庫銨和羅庫溴銨的阻滯作用相對較弱；預注給藥對肌松藥的神經(jīng)阻滯強度無顯著影響。

簡介：研究背景肩袖損傷后，其腱骨愈合受到多方面因素的影響，包括機械應力、炎癥反應和細胞因子等很多方面，腱骨界面BTJ常常被認為是關節(jié)損傷修復早期的薄弱點。臨床資料顯示，外科手術修補后的肩袖以瘢痕重塑的形式愈合，由多種炎癥因子和生長因子參與修復重建過程。這種非完全重建式的愈合使得肩袖組織的生物力學強度遠遠低于正常水平，最終結(jié)果往往導致術后肩袖再撕裂的發(fā)生。TGFΒ1是促使BTJ愈合中瘢痕形成的關鍵因子，前人研究發(fā)現(xiàn)，通過抑制TGFΒ1SMAD信號通路可以抑制瘢痕增生。在此基礎上，本研究擬構建SD大鼠岡上肌BTJ損傷的修復模型，在體研究TGFΒ1及SMAD在其愈合過程中的分布與瘢痕形成的相關性分別在愈合與重塑的不同時期，用針對沉默TGFΒ1、SMAD蛋白家族設計的慢病毒感染BTJ，抑制TGFΒ1SMAD信號通路，觀察抑制后的BTJ細胞和細胞外基質(zhì)的變化及相關生物學、生物力學的改變，探究此信號通路對肩袖BTJ愈合的調(diào)節(jié)機制，為臨床治療提供新思路。研究目的本課題擬通過構建SD大鼠單側(cè)岡上肌損傷修復模型，在體研究TGFΒ1及SMAD在其愈合過程中的分布與瘢痕形成的相關性分別在愈合與重塑的不同時期，用針對沉默TGFΒ1、SMAD蛋白家族表達的慢病毒感染BTJ，抑制TGFΒ1SMAD信號通路，觀察抑制后的BTJ細胞和細胞外基質(zhì)的變化及相關生物學、生物力學的改變，探究此信號通路對肩袖BTJ愈合的調(diào)節(jié)機制。研究方法1、實驗設計選取雄性SD大鼠50只（第二軍醫(yī)大學動物實驗中心提供），體重150200G，其中10只不做手術處理作為①空白對照組。剩余40只模擬行單側(cè)（左上肢）岡上肌肩袖組織撕裂修補術，術后平均分為4組，在術后3D、5D、10D在岡上肌肩袖局部分別給予不同藥物注射處理，根據(jù)注射藥物的不同分為②生理鹽水對照組、③TGFΒ1抑制組、④SMAD2抑制組、⑤TGFΒ1SMAD2共同抑制組，藥物注射治療后分別在第7D、14D、21D、28D各處死2只SD大鼠，留取左上肢岡上肌局部標本，進行生物力學檢測和組織學、免疫組化觀察，評估肩袖愈合效果。2、模型制備的手術方法SD大鼠采用10％水合氯醛生理鹽水溶液（按照體重標準04ML500G）腹腔注射麻醉，麻醉完成后，在固鼠板上用皮筋固定大鼠四肢（俯臥位固定），用剃毛器刮凈左上肢局部毛發(fā)，用1％醫(yī)用碘伏消毒備皮區(qū)，鋪無菌單。縱行切開皮膚，長約34CM，分離淺筋膜至暴露肩胛區(qū)及上臂肌肉，找到斜方肌附著部，沿斜方肌境界輕柔切開此肌肉，向前上方翻開即可見岡上肌正位于斜方肌覆蓋之下。仔細分離整條岡上肌至肱骨大結(jié)節(jié)止點，切斷少許三角肌充分暴露岡上肌在肱骨大結(jié)節(jié)的附著部位，鈍性撕脫岡上肌在肱骨大結(jié)節(jié)處的附著，用巾鉗在肱骨大結(jié)節(jié)上建立骨隧道，方向與岡上肌在骨質(zhì)表面的附著走形一致，再用不可吸收縫線分別在岡上肌組織末端間隔152MM縫合組織，并將縫線穿過骨道打結(jié)固定，將岡上肌腱縫合在原來的足印區(qū)，建立SD大鼠單側(cè)岡上肌損傷修復模型備用。3、分階段抑制TGFΒ1SMAD信號通路1針對TGFΒ1、SMAD2的SIRNA的設計、合成和篩選根據(jù)SIRNA設計原理和要求，針對SD大鼠TGFΒ1、SMAD2基因序列特征，為每個基因分別設計合成三對熒光報告基因標記SIRNA脂質(zhì)體包裹SIRNA，以相同濃度，相同作用時間轉(zhuǎn)染SD大鼠成纖維細胞RTPCR，WESTERNBLOT篩選高效特異的SIRNA確定最佳轉(zhuǎn)染濃度和時間。2TGFΒ1、SMAD2的慢病毒感染效果及評價根據(jù)SIRNA的位點序列合成相應的SHRNA質(zhì)粒，并包裝出相應的慢病毒，感染大鼠成纖維細胞驗證其對靶基因的抑制效率3分階段抑制注射在BTJ愈合和重塑的不同階段，注射慢病毒抑制TGFΒ1SMAD通路，術后3D、5D、10D連續(xù)給藥3次，注射慢病毒感染大鼠單側(cè)（左上肢）BTJ部位。4、取材及制作標本藥物注射治療后每組分別在第7D、14D、21D、28D各處死2只SD大鼠，留取左上肢岡上肌局部標本，進行生物力學檢測和組織學、免疫組化觀察，評估肩袖愈合效果切取肩胛骨及與其相連的肱骨為一個完整部位行生物力學抗拉力測試，同時取1只正常組大鼠的左側(cè)BTJ樣本為對照。生物力學測試完成后的標本，取大結(jié)節(jié)足印區(qū)的組織厚約5MM進行脫鈣固定留備，染色、免疫組化檢測，比較愈合過程不同時間BTJ中瘢痕組織的形成和轉(zhuǎn)歸的特點，以及纖維軟骨的分布及其與正常BTJ的差別。5、觀察方法和結(jié)果測定生存狀態(tài)觀察首先在取材之前對于不同實驗組的SD大鼠，比較其在術前、術后不同時間節(jié)點的生存狀態(tài)，比如動物活動狀態(tài)、手術切口愈合情況（有無感染等炎癥反應）、肢體活動度等等。HE染色觀察組織經(jīng)過固定、脫鈣、脫水、清洗、包埋、切片和染色，可見細胞核呈藍色，細胞質(zhì)呈淡紅色。MASSON三色法染色觀察膠原纖維呈藍色，肌纖維、細胞質(zhì)、纖維素、角蛋白和紅細胞呈紅色，細胞核呈藍褐色。6、統(tǒng)計學分析各組動物之間在各時間點的生物力學數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析采用SNKQ檢驗STUDENTNEWMANKEULSTEST，以明確各組之間各個時間節(jié)點的腱骨愈合是否存在差異。研究結(jié)果1、大體結(jié)果手術組與非手術組對比手術組動物在術后出現(xiàn)活動度減退，肢體活動度受限的情況，影響大鼠行走步態(tài)（跛行或者拖行），部分出現(xiàn)傷口崩裂、局部組織感染化膿（感染率為20％）飲食無明顯變化手術組動物易激惹。接受手術的動物，不同給藥治療組之間的比較大鼠生存狀態(tài)無明顯異常，感染率無明顯差別20％。2、組織切片染色結(jié)果1手術組動物②③④⑤肩袖BTJ最終達到瘢痕愈合局部瘢痕生成的量有所不同2⑤組動物最終愈合結(jié)果的瘢痕與②③④組比較明顯減少，愈合效果最好，肉眼觀察有差異②③④組間結(jié)果比較，在肉眼下觀察無明顯差異，BTJ處有較多的瘢痕組織及雜亂的新生膠原纖維3成纖維細胞含量①空白對照組45％②生理鹽水對照組78％③TGFΒ1抑制組70％④SMAD2抑制組75％⑤TGFΒ1SMAD2共抑制組50％。3、免疫熒光、RTPCR、WESTERNBLOT檢測結(jié)果1細胞基質(zhì)成分中AGGRECAN、BIGLYCAN、ELASTIN、TENINC的含量在③④⑤組均有升高，⑤組升高最明顯2基質(zhì)酶的改變中，MMP在③④⑤組均呈降低趨勢，在第②組呈增高趨勢，TIMP的變化趨勢與MMP相反3COX酶含量的化各不相同，各組之間無可比性4轉(zhuǎn)錄因子SOX9的含量與第①組相比在②③④⑤組呈增高趨勢，各組之間無明顯差異5凋亡相關因子P53NFΚB，熱休克蛋白的變化③④⑤組總體呈降低趨勢，⑤組最明顯而第②組結(jié)果與其他相反，呈上升趨勢，提示有組織退變的可能。4、生物力學檢測結(jié)果肩袖愈合的總體趨勢隨著時間的推移體現(xiàn)為腱骨愈合部位的終末拉力值的增強，其中，第⑤組的終末抗拉力結(jié)果優(yōu)勢最明顯。同一時間節(jié)點，各分組生物力學數(shù)據(jù)樣本均數(shù)兩兩之間的全面比較比較采用SNKQ檢驗STUDENTNEWMANKEULSTEST，按照Α005水準第⑤組與②③④組在各時間節(jié)點數(shù)據(jù)比較均有統(tǒng)計學意義第①組與②③④組在前3周數(shù)據(jù)比較有統(tǒng)計學意義，最后一周數(shù)據(jù)之間無統(tǒng)計學意義第①組與第⑤組之間在最后一周數(shù)據(jù)相比有統(tǒng)計學意義，前三周數(shù)據(jù)相比無明顯統(tǒng)計學意義②③④三組之間各時間節(jié)點數(shù)據(jù)比較，無明顯統(tǒng)計學差異。研究結(jié)論單側(cè)SD大鼠岡上肌損傷修復模型具有易操作、成功率高、可重復性好、模型動物生存質(zhì)量穩(wěn)定、取材方便等方面的優(yōu)點，是研究肩袖病變發(fā)病機制的良好模型HE染色是組織切片常用的染色方法，操作簡便，可以大體觀察到BTJ的組織層次，初步評價愈合效果MASSON染色可以特異性的觀察膠原纖維的分布，有助于評價肩袖愈合的效果免疫組化、RTPCR和WESTERNBLOT對于生長因子，蛋白、酶類以及信號通路上的其他物質(zhì)的變化可以檢測的更為精確，發(fā)現(xiàn)信號通路抑制后愈合過程中物質(zhì)含量的變化，為進一步揭示其作用機制提供了依據(jù)。研究表明，抑制TGFΒ1SMAD信號通路可以改善BTJ的瘢痕愈合狀況，促進肩袖愈合過程中的合成代謝過程，降低肩袖疾病進一步惡化的風險，但詳細的作用機制有待進一步深入研究。TGFΒ1SMAD共抑制組所表現(xiàn)的愈合結(jié)果較單方面抑制兩者其中之一的效果好，愈合區(qū)域瘢痕組織產(chǎn)生較少。本研究有助于為臨床治療肩袖疾病RCD提供新的思路。

簡介：目的在體研究狼瘡鼠骨髓間充質(zhì)干細胞BMMSCS成骨分化能力缺陷的信號通路調(diào)節(jié)機制，探索SLE骨質(zhì)疏松發(fā)病的新機制。方法1、分離狼瘡鼠及對照組小鼠腎臟，制備組織切片，HE染色觀察腎臟病變情況。2、全骨髓培養(yǎng)及貼壁篩選法分離培養(yǎng)狼瘡鼠及對照鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)及生長狀況，選取第3代BMMSCS用于實驗。3、免疫組織化學法觀察兩組BMMSCS中腫瘤壞死因子ΑTNFΑ、核因子ΚBP50NFΚBP50、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2BMP2、PSMAD158蛋白表達情況。4、定向誘導兩組小鼠BMMSCS向成骨細胞分化，ALP染色鑒定早期成骨情況，RTPCR法檢測BMMSCS中ALP、RUNX2基因MRNA表達情況。5、將BMMSCS、重組人BMP2及羥基磷灰石共孵育后包埋入裸鼠皮下，HE染色及MASSONTRICHOME染色觀察異位成骨情況。6、將2組狼瘡鼠分別于皮下注射重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白（益賽普）及生理鹽水，四周后觀察狼瘡鼠BMMSCS其異位成骨能力。結(jié)果1、HE染色顯示狼瘡鼠腎小球炎性細胞明顯浸潤，腎小球增生硬化，腎小管內(nèi)可見大量蛋白管型，提示其病變嚴重。2、倒置顯微鏡下觀察，狼瘡鼠BMMSCS形成融合單層約需710D，而對照組約需57D形成融合單層，兩組BMMSCS形態(tài)以短梭形為主，貼壁生長。3、免疫組化結(jié)果顯示狼瘡鼠BMMSCSTNFΑ、NFΚBP50表達較對照鼠明顯增強P＜001，而BMP2、PSMAD158表達則明顯減弱P＜001。4、ALP染色及RTPCR法分別檢測BMMSCSBMP2誘導下的成骨能力及成骨相關基因表達，結(jié)果提示狼瘡鼠BMMSCSALP活性較對照組減低，ALP及RUNX2基因MRNA表達水平亦較對照組下調(diào)，提示其在BMP2誘導下的成骨分化能力減低P＜005。5、BMMSCS異位成骨能力與對照組相比，狼瘡鼠組BMMSCS的皮下異位成骨包塊體積減小，HE及MASSONTRICHOME染色顯示，狼瘡鼠BMMSCS的骨基質(zhì)生成量比對照明顯減少，MASSONTRICHOME染色發(fā)現(xiàn)其類骨質(zhì)較多，表明其骨的成熟度比較低，而予注射益賽普后狼瘡鼠BMMSCS的異位成骨能力較前有所恢復。結(jié)論1、狼瘡鼠BMMSCS體外生長、分化能力較正常鼠BMMSCS減低。2、狼瘡鼠BMMSCS的TNFΑNFΚBP50信號通路異常激活，而BMPSMADS信號通路則處于抑制狀態(tài)。3、狼瘡鼠BMMSCSBMP2誘導下的成骨分化能力及在體異位成骨能力均減弱。4、抑制TNFΑ活性后狼瘡鼠BMMSCS體內(nèi)異位成骨能力較前增強。5、推測異?；罨腡NFΑNFΚBP50信號通路抑制了狼瘡鼠BMMSCS成骨分化的BMPSMADS信號通路因此參與了骨質(zhì)疏松的發(fā)生。

簡介：目的研究轉(zhuǎn)錄因子CBFCZL、PPARΓ在骨質(zhì)疏松、低骨量和骨密度正常組中表達的調(diào)控作用，探討骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機制。方法選取腰椎手術病人42人，使用QDR4500A扇型DXA骨密度儀測量病人腰椎骨密度，根據(jù)WHO推薦診斷標準和中國人骨質(zhì)疏松建議診斷標準，分為骨密度正常組、低骨量組和骨質(zhì)疏松組；通過塑料包埋椎骨組織，GOLDNERS三色法染色，用BIOQUANT98圖像分析軟件計算三組椎骨骨組織形態(tài)計量學參數(shù)的變化；采用免疫組織化學的方法，檢測不同組基質(zhì)細胞中CBFCZL、PPAR7蛋白陽性表達率在三組中的差異及其與骨計量學參數(shù)的相關性。結(jié)果1骨質(zhì)疏松組與骨密度正常組相比，骨小梁數(shù)目、骨小梁體積百分比分別下降了061／MM和822％，骨小梁間隔則由63633±9790ΜM上升至90205士12625ΜM，均有顯著性差異P005。2骨質(zhì)疏松組與骨密度正常組相比，表達CBFAL蛋白的基質(zhì)細胞陽性百分率下調(diào)1268％，兩組間有顯著性差異P005。低骨量組基質(zhì)細胞中CBFCZL蛋白的表達介于兩組之間。CBFCZL蛋白與骨形態(tài)計量學參數(shù)的相關分析表明，CBFAL表達水平與骨小梁間隔TBSP呈負相關，與骨小梁數(shù)目TBN、骨小梁占全部骨組織體積比TBV／TTV呈正相關。3骨旨質(zhì)疏松組與正常組相比，表達PPARΓ蛋白的基質(zhì)細胞陽性百分率增加1617％，兩組問有顯著性差異P005。低骨量組PPARΓ蛋白的表達介于兩組之間。PPARΓ蛋白與骨形態(tài)計量學參數(shù)的相關分析表明，PPARΓ表達水平與骨小梁間隔TBSP呈正相關，與骨小梁數(shù)目TBN、骨小梁占全部骨組織體積比TBV／TTV呈負相關。結(jié)論1CBFΓ1蛋白表達下調(diào)，提示骨髓微環(huán)境發(fā)生變化，在骨重建的啟動激活和骨轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮重要作用，使基質(zhì)細胞向成骨細胞分化的能力下降而引起成骨細胞數(shù)目減少，骨量丟失和骨質(zhì)疏松發(fā)生。2PPARΓ蛋白表達上調(diào)，將誘導骨髓中成脂分化增強，而成骨分化降低，故骨髓中脂肪細胞數(shù)目明顯增多，導致成骨細胞分化受抑，從而引起骨質(zhì)疏松發(fā)生。3CBFΑ1和PPARΓ蛋白表達異常使脂肪細胞與成骨細胞比例失衡，提示CBFΑ1蛋白和PPARΓ蛋白參與介導了成骨細胞的“轉(zhuǎn)分化”和“去分化”，為開發(fā)骨組織工程學及骨質(zhì)疏松癥的防治提供客觀、科學、可靠的依據(jù)。

簡介：ATHESISSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTER上89S69LTHEGENEDETECTIONANDANALYSISOFAHEREDITARYMULTIPLEOSTEOCHONDROMAFAMILYBYFENGYAOSUPERVISORPROFYINGTAIWANGMEDICINEBASICSCIENCEOFMEDICINESCHOOLMAY2010摘要一個遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤家系的基因檢測與分析研究生姚豐導師王應太研究員董子明教授鄭州大學基礎醫(yī)學院病理學與病理生理學鄭州450052摘要目的通過對一個遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤家系的基因突變進行檢測和分析，確定這個遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤家系的致病基因，建立遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤病的基因診斷實驗室方法，為患者生育后代提供遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷，從而降低HME的發(fā)病率；同時也為進一步研究該病的分子機制和基因治療該病提供依據(jù)。方法收集一個遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤大家系，另隨機選取與該家系均無關的健康個體30例作為對照。由于80％以上的HME患者是由EXTL和EXT2基因突變導致，本實驗首先選取與候選基因EXTL、EXT2緊密連鎖、多態(tài)性好、雜合率高的短串聯(lián)重復序列SHORTTANDEMREPEAT，STRD8S522、D8S1694、D11S1355、D11S986、D11S903，對家系內(nèi)18名采血成員的4個STR位點行PCR非變性聚丙烯凝膠電泳分型后，根據(jù)家系成員關系構建單體型進行連鎖分析，確定候選基因。然后分段擴增覆蓋候選基因編碼區(qū)及剪切位點的序列，再進行單鏈構象

簡介：試驗設計制備兔橈骨遠端骨缺損2CM的動物模型，使用不同劑量的由大腸桿菌DH5A高度表達的RHMNVBMP2（0、05MG和10MG），以纖維蛋白膠原為載體植入骨缺損區(qū)域，通過比較各劑量組促進骨缺損愈合的效果來評價由大腸桿菌DH5A高度表達的RHMNVBMP2的有效性和劑量成骨關系。目的評價由大腸桿菌DH5A高度表達的RHMNVBMP2促進兔橈骨遠端2CM骨缺損愈合的有效性和劑量成骨關系。方法成年新西蘭白兔72只被隨機等分為3組BMP0組（N24），BMP05MG組（N24）和BMP10MG組（N24），均接受右橈骨遠端截骨術，骨缺損長度為2CM，按分組于骨缺損處植入含不同劑量的RHMNVBMP2的纖維蛋白膠原載體釋放系統(tǒng)，于術后2周、4周和8周每組分別處死動物模型8只，收集標本，通過鉬鈀X線攝片、MICROCT、硬組織切片和三點彎曲最大承載力測定等影像學、組織細胞學和生物應力學檢查來評估其有效性和劑量成骨關系。結(jié)果對比三個劑量組在術后2、4、8周的鉬鈀X線以及MICROCT影像，發(fā)現(xiàn)各組間骨愈合均存在明顯的差異，表現(xiàn)為BMP10組和BMP05組明顯優(yōu)于空白對照的BMP0組，而BMP10組又明顯優(yōu)于BMP05組。硬組織切片的觀察對比也符合以上結(jié)果。所有相關的實驗數(shù)據(jù)均使用SPSS130FWINDOWS軟件行統(tǒng)計學分析，分析結(jié)果同樣符合以上結(jié)果①三個劑量組術后8周的鉬鈀X線攝片根據(jù)LANEMERCHANT評分標準獲得的骨愈合率使用卡方檢驗顯示各組間均存在統(tǒng)計學顯著性差異（P0078）的前提下，行三個劑量組術后2、4、8周缺損區(qū)骨密度數(shù)據(jù)的兩兩均數(shù)間團隊T檢驗，顯示各組間均存在統(tǒng)計學顯著性差異（P005）；③三個劑量組術后2、4、8周的三點彎曲最大承載力數(shù)據(jù)使用兩兩均數(shù)間的團隊T檢驗，顯示各組間均存在統(tǒng)計學顯著性差異（P005）。結(jié)論由大腸桿菌DH5A高度表達的RHMNVBMP2（0，05MG、10MG）能夠有效地促進兔橈骨遠端2CM骨缺損愈合，其劑量成骨關系在一定范圍內(nèi)存在劑量依賴性。纖維蛋白膠原載體有著良好的生物相容性和相對較快的降解速度，術后2周即已經(jīng)完全降解，但對限制RHMNVBMP2的釋放，提高局部有效藥物濃度維持時間的作用有限。

簡介：流行病學資料表明，2型糖尿病、脂肪肝和心血管疾病等慢性病隨著年齡的增長而增加。胰島素抵抗INSULINRESISTANCE，IR是這些代謝性疾病的共同病理基礎。本課題觀察了老年和高脂環(huán)境因素對大鼠骨骼肌和肝臟脂肪酸代謝及AMPK信號通路中關鍵信號分子表達和活性的影響，探討老年相關IR的可能機制。研究內(nèi)容包括以下三部分第一部分高脂飲食對老年大鼠骨骼肌和肝臟脂肪酸代謝及胰島素敏感性的影響目的探討老年和高脂飲食對大鼠骨骼肌和肝臟脂肪酸代謝的影響及其與IR的相關性，進一步了解老年IR的發(fā)病機制。方法2224月齡雄性WISTAR大鼠32只隨機分為老年對照組OC組N16、高脂組HF組，N16；45月齡大鼠16只作為青年對照組YC組。老年對照組和青年對照組給基礎飼料，熱量組成碳水化合物655％，脂肪103％，蛋白質(zhì)242％，總熱量為348KCAL100G；高脂組給予高脂飼料，其熱量組成碳水化合物201％，脂肪598％，蛋白質(zhì)201％，總熱量為501KCAL100G。老年兩組大鼠每日等熱量投喂飼料，每周稱體重1次，喂養(yǎng)8周。第4周末從各組隨機選8只大鼠行高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗評價IR狀態(tài)。第8周末各組剩余8只大鼠再次行鉗夾實驗，實驗前抽取血樣用于測定血清各項指標；實驗結(jié)束后頸動脈放血處死動物，立即取出股四頭肌和肝臟組織放入液氮中冷凍，然后保存于70℃低溫冰箱。骨骼肌和肝臟甘油三酯經(jīng)氯仿甲醇抽提后用全自動生化分析儀測定；骨骼肌長鏈脂酰COA用熒光分光光度計測定。結(jié)果1各組一般項目的比較與青年對照組比較，老年對照組體重明顯增加P005。老年對照組空腹血糖、胰島素和游離脂肪酸高于青年對照組，高脂組這幾項指標進一步升高，并且出現(xiàn)血清甘油三酯和總膽固醇水平增高P005；老年對照組骨骼肌和肝臟PACC蛋白水平均低于青年對照組，高脂組與老年對照組相比進一步降低P005，高脂組比老年對照組下降明顯P005。3老年對照組骨骼肌MCD活性低于青年對照組，高脂喂養(yǎng)后進一步降低P005。4相關性分析骨骼肌甘油三酯和長鏈脂酰COA均與PACC蛋白水平呈負相關、與MCD活性呈負相關，長鏈脂酰COA還與MCD表達具有相關性；肝臟甘油三酯與PACC蛋白表達呈負相關P005骨骼肌AMPKΑ2MRNA表達在老年對照組低于青年對照組，高脂組低于老年對照組P005；肝臟AMPKΑ2MRNA表達在三組之間亦無差別P005。4肝臟AMPKΑ1和AMPKΑ2蛋白表達在三組之間無明顯差別P005；肝臟PAMPKΑ蛋白表達在老年對照組低于青年對照組，高脂組與老年對照組相比進一步下降P005；骨骼肌CR在老年對照組低于青年對照組，高脂組低于老年對照組P001；AMPATP及CRPCR比率在老年對照組低于青年對照組，高脂組低于老年對照組P005。7肝臟ATP含量在老年對照組與青年對照組之間、高脂組與老年對照組之間均無明顯差別；而AMP含量在老年對照組低于青年對照組，高脂組與老年對照組相比進一步降低P001。AMPATP比率在老年對照組低于青年對照組，高脂組低于老年對照組P005。結(jié)論1老年大鼠骨骼肌AMPKΑ2表達、AMPKΑ活性和肝臟AMPKΑ活性均低于青年大鼠。2高脂飲食導致老年大鼠骨骼肌AMPKΑ2表達和AMPKA活性進一步下降，肝臟AMPKΑ活性也明顯降低。3增齡和高脂飲食導致AMPKΑ表達和或活性的改變可能參與了骨骼肌和肝臟脂質(zhì)堆積及IR的發(fā)生。4老年和高脂環(huán)境因素可能通過導致骨骼肌和肝臟細胞能量狀態(tài)的變化影響了AMPKΑ的表達和活性。

簡介：進入新世紀以后，公平正義等價值正越來越受到國家和社會各界的重視，而社會政策對于促進社會公平、推動社會和諧發(fā)展方面有著獨特的作用，因此正日益受到政府和學術界的關注。然而，畢竟我國真正意義上的社會政策建設與發(fā)展還不完善，尤其在保障特殊弱勢群體的基本權利和利益上仍然存在不足。罕見病群體作為一個特殊的弱勢群體，由于長期以來得不到政府和公眾的關注，在治療、康復、心理、社會生活的參與等方面均面臨著較大的困難，因此亟需通過相關社會政策的制定和完善從而改善他們的生活狀態(tài)。為此，本文以改善罕見病群體的生存、生活狀態(tài)，完善相關社會政策體系為落腳點，以杜氏肌營養(yǎng)不良群體為例，真實展示了當前罕見病群體的生存現(xiàn)狀和政策需求，并且對應的介紹了當下對于該群體的的社會政策供給情況。在此基礎上，對當前罕見病群體社會政策供需矛盾進行了分析，并從歷史成因和現(xiàn)實成因兩個方面對矛盾的成因進行了分析。最后，結(jié)合當下社會經(jīng)濟的有利條件，并借鑒發(fā)達國家應對罕見病問題的經(jīng)驗，為推動罕見病群體社會政策的發(fā)展提出相應的路徑建議。

簡介：目的探討經(jīng)椎旁肌入路MISPLIF（MINIMALLYINVASIVEPOSTERILUMBARINTERBODYFUSION，MISPLIF聯(lián)合經(jīng)皮置入長臂椎弓根螺釘固定治療中央型腰椎間盤突出及中央型椎管狹窄癥的治療效果和安全性。方法對2012年4月一2014年4月間，由同一術者完成的采用經(jīng)椎旁肌入路的MISPLIF聯(lián)合經(jīng)皮長臂椎弓根螺釘固定治療中央型腰椎間盤突出癥或中央型腰椎管狹窄患者共49例進行隨訪和分析。收集、分析手術時間手術出血量、術后住院時間及術中后近期并發(fā)癥；術后1周、3月、6月、12月腰腿痛VAS評分、JOA評分；術后CT掃描中經(jīng)皮椎弓根螺釘位置的準確度和末次患者椎間隨訪融合情況。結(jié)果本組患者隨訪時間為5～18個月，平均11個月。平均手術時間117±20MIN，平均出血量為113±39ML。術后平均住院時間7天，術后1周及末次隨訪時腿痛VAS評分及腰腿痛JOA評分與術前相比有統(tǒng)計學差異P結(jié)論經(jīng)椎旁肌入路MISPLIF聯(lián)合經(jīng)皮置入長臂椎弓根螺釘系統(tǒng)固定治療中央型腰椎間盤突、中央型腰椎管狹窄癥具有術中暴露充分、創(chuàng)傷小、手術出血少、神經(jīng)并發(fā)癥少、術后疼痛輕；經(jīng)皮椎弓螺釘置入準確度及安全性高等特點。療效確切，術后癥狀緩解快，中期效果穩(wěn)定，值得推廣應用。

簡介：點擊查看更多前臂肌內(nèi)神經(jīng)血管構筑的解剖學研究.pdf精彩內(nèi)容。