簡介：復旦大學碩士畢業(yè)論文上海地區(qū)諾如病毒分子流行病學調(diào)查及GII．4流行株進化規(guī)律的初步研究MOLECULAREPIDEMIOLOGYOFNOROVIRUSASSOCIATEDWITHACUTEGASTROENTERITISINSHANGHAIANDTHEPRELIMINARYINVESTIGATIONOFEVOLUTIONARYMECHANISMSOFTHEGII．4EPIDEMICSTRAINS院系專業(yè)姓名指導教師導師組成員公共衛(wèi)生臨床中心臨床檢驗診斷學沈震張軍副研究員朱召芹副研究員張萬菊助理研究員完成日期2014年4月10日GII．4流行株的進化規(guī)律。結(jié)果I．上海地區(qū)成人諾如病毒的分子流行病學調(diào)查2012年1月至2013年12月，共采集846份成人≥16歲急性腹瀉患者糞便樣本，其中2012年度387份，2013年度459份，全部樣本均完成常規(guī)分子檢測。GI群檢出22例，檢出率為2．60％；GII群檢出117例，檢出率13．83％。GI群呈現(xiàn)低位流行、全年散發(fā)的狀態(tài)，無明顯的季節(jié)分布GII群在2012年10月．12月出現(xiàn)高位流行，檢出率均在30％以上，11月份的檢出率高達60％。同時發(fā)現(xiàn)，GII群諾如病毒相關(guān)的急性腹瀉好發(fā)于中老年人，特別是46．55歲個體，檢出率達20．30％，相比于35歲以下個體，46歲以上人群GII群檢出率明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義P0．05。GI群在成人中的流行無明顯年齡分布特征。對諾如病毒陽性樣本進行基因分型發(fā)現(xiàn)，近兩年來上海地區(qū)GI群主要的流行株為GI．3和GI．4。GII群中絕大部分為GII．4型，占93．40％，除既往DENHAAG_2006B及NEWORLEANS一2009流行株外，首次檢測到新型變異株SYDNEY_2012。同時發(fā)現(xiàn)，2012年10．12月在上海地區(qū)高位流行的GII群均是該新型GII．4變異株，表明其已成為上海地區(qū)的優(yōu)勢株?；仡櫡治霭l(fā)現(xiàn)，SYDNEY_2012新型變異株在2012年9月份已經(jīng)在上海地區(qū)出現(xiàn)。進一步分析證實SYDNEY2012變異株為GII．E型ORFL與GII．4型ORF2的重組體，重組位點處于基因組5037BP．5062BP。2．GII．4流行株體外分子進化模擬的研究通過對188條VPL全長序列的比對分析，共檢出57處變異頻繁的氨基酸位點，其中40個突變位點集中在P2區(qū)，不同時期的流行株也出現(xiàn)重復使用相同氨基酸殘基的現(xiàn)象。對VPL全長序列的系統(tǒng)進化分析顯示，不同時期的流行株存在一定的進化距離，在進化樹中以單一的簇存在。對VPL不同區(qū)域分別進行系統(tǒng)進化分析發(fā)現(xiàn)，僅P2區(qū)的進化趨勢與VPL全長基因高度一致，而S區(qū)和P1區(qū)的進化分析顯示各個時期流行株交錯分布，無法表征不同時期流行株間的分子進化距離。正向選擇分析共檢出13處關(guān)鍵信息位點，其中9處集中于P2區(qū)。3．GII．4流行株進化規(guī)律的初步研究通過體外蛋白表達對近期DENHAAG2006B、NEWORLEANS2009及SYDNEY_2012三種流行株的受體識別模式鑒定發(fā)現(xiàn)，三種流行株對不同型別的

簡介：華中科技大學碩士學位論文WEB20時代的病毒式營銷的傳播學解讀姓名甘藝娜申請學位級別碩士專業(yè)傳播學指導教師陳少華20090529華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文IIABSTRACTINRECENTYEARS,THENEWAPPLICATIONSTYLESUCHASTHEBLOG,RSS,HASQUICKLYCHANGEDTHEINTERNET,INDICADINGTHECOMINGOFWEB20THEINTERNETHASCOMEINTOAPERIODWHENCUSTOMERSPARTICIPATEANDSHAREBROADLYWITHTHEDEVELOPMENTOFWEB20ANDTHEGROWTHINTHENUMBEROFINTERNETUSERS,VIRALMARKETINGHASBECOMEAHOTTOPICINPRACTICEVIRALMARKETINGONTHEINTERNETHASGOTTHEMOSTPERFECTEMBODIMENTTHISARTICLEEXPOUNDSTHEVIRALMARKETINGISAKINDOFNETWORKMARKETINGMETHODS,ITUSESWORDOFMOUTHCOMMUNICATIONPRINCIPLE,USERSTRANSMITINFORMATIONSPONTANEOUSLYTHISKINDOFINFORMATIONTRANSFERMODEJUSTLIKETHEVIRUSREPLICATION,ITTRANSMITTOTHOUSANDSANDMILLIONSOFAUDIENCESFAST,WITHLOWCOSTANDHIGHEFFICIENCYBECAUSEOFWEB20,VIRALMARKETINGBECOMESMOREANDMOREVALUEDATNUMEROUSBUSINESSMANMARKETINGMETHODSALTHOUGHSINCE2005,WEB20BECOMESONEOFTHEHOTTOPICINTHEINTERNETRESEARCHHOWEVER,FEWPEOPLEWILLCOMBINEWEB20ANDVIRALMARKETINGTORESEARCH,EVENNOMORESYSTEMATICRESEARCHEVENINPRACTICEVIRALMARKETINGHASPRESENTEDA“THRIVEINWEB20STATE“,BUTTHEYARENOTTHEORETICALLYMENTIONEDANDSUMMARIZEDTHISARTICLEBASEDONPROFESSIONALCOMMUNICATION,INVOLVESWEB20ANDVIRALMARKETINGARTICLESANDNUMEROUSCASESTUDYING,ANDAPPLYCOMMUNICATIONTHEORYTOINTERPRETVIRALMARKETINGINWEB20ERAITUSESTHECLASSICALCASESANALYSISINTHETHEORETICALSTUDY,INCLUDINGTHELATESTCASEOFTHE2008OLYMPICSVIRUSCOMMUNICATION,ANDAPPLIESTHEVIRALMARKETINGCOMMUNICATIONSKILLSINWEB20INEACHANGLEHOPETHATITCANGIVEMORETHEORETICALGUIDANCEFORVIRALMARKETINGCOMMUNICATIONSINTHEPRACTICALWORLD,ANDDEVOTEMYOWNSTRENGTHINTHISASPECTOFTHEORETICALRESEARCHKEYWORDSWEB20VIRALMARKETINGCOMMUNICATION

簡介：點擊查看更多partⅰ.人巨細胞病毒重組蛋白的表達純化和免疫學性質(zhì)研究partⅱ.風疹病毒igg抗體檢測方法的研究精彩內(nèi)容。

簡介：山東省醫(yī)學科學院碩士學位論文1重組腺病毒載體乙肝疫苗的免疫學研究2人巨細胞病毒PP150蛋白基因的原核表達姓名李妍申請學位級別碩士專業(yè)病原微生物學指導教師孟紅20040401學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文系在導師指導下本人獨立完成的研究成果。文中引用他人的成果，均已做出明確標注或得到許可。論文內(nèi)容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他學位申請的論文或成果。學位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明本人在導師指導下所完成的論文及相關(guān)的職務作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬山東省醫(yī)學科學院。山東省醫(yī)學科學院享有以任何方式發(fā)表、復制、公開閱覽、借閱以及申請專利等權(quán)利。本人離校后發(fā)表或使用學位論文或與該論文直接相關(guān)的學術(shù)論文或成果時，署名單位仍然為山東省醫(yī)學科學院。論文作者簽名盔逝導師簽名玉蘭日期Ⅻ生年直月3生一日

簡介：分類號分類號學號學號D200778043D200778043D200778043D200778043學校代碼學校代碼10487104871048710487密級密級博士學位論文博士學位論文表達顆粒溶素的重組腺病毒基因治療結(jié)核病小表達顆粒溶素的重組腺病毒基因治療結(jié)核病小鼠模型鼠模型內(nèi)皮內(nèi)皮細胞細胞特異性分子特異性分子2222（ECSM2ECSM2ECSM2ECSM2）的細胞定位的細胞定位及功能學研究及功能學研究學位申請學位申請人盧佳盧佳學科專業(yè)學科專業(yè)病原生物學病原生物學指導教師指導教師黃漢菊黃漢菊教授教授范雄林范雄林教授教授黃瑤黃瑤博士博士答辯日期答辯日期2012012012012222年5555月√獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師的指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者簽名日期年月日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密□，在______年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□（請在以上方框內(nèi)打“√”）學位論文作者簽名指導教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：點擊查看更多1.丙型肝炎病毒核心蛋白通過自誘導方式可溶性表達及其生物學功能鑒定2.深度測序分析hbv感染中多基因型混合感染精彩內(nèi)容。

簡介：分類號R733密級非密。學校代碼學號1006220041087天滓醬斜太垮節(jié)LANJL掛豫EOLEALUKLVERSLTY博士學位論文DOCTORALDISSERTATION實驗部分SURVIVINRNAI重組慢病毒的構(gòu)建CONSTRUCTIONOFLENFIVIRALVECTOROFRNAINTERFERENCEOFSURVIVINGENE臨床部分鼻咽癌調(diào)強放療的劑量學研究DOSIMETRICSTUDYOFINTENSITYMODULATEDRADITIONTHERAPYINNASOPHARYNGEALCARCINOMA一級學科臨床醫(yī)學二級學科腫瘤學論文作者姜海平指導教師于金明天津醫(yī)科大學研究生院2007年5月入門克隆質(zhì)粒。2．成功構(gòu)建PLENTI．SURVIVINA、PLENTI．SURVIVINB和PLENTISURVIVINC慢病毒表達載體。3．包裝生產(chǎn)了重組慢病毒LENTISURVIVINA，LENTISURVIVINB，LENTISURVIVINC。重組慢病毒LENTI．SURVIVINA、LENTI．SURVIVINB和LENTISURVIVINC的RNA分子拷貝數(shù)分剮為6．11017『MI，5．6X1017，MF和1．6X1010，MI。結(jié)論成功構(gòu)建了表達SURVIVINSHRNA的3種重組慢病毒載體。關(guān)鍵詞RNA干擾SURVIVIN；慢病毒載體基因治療臨床部分鼻咽癌調(diào)強放療的劑量學研究鼻咽癌是頭頸部常見惡性腫瘤，放療是其主要治療手段。調(diào)強放療提高了鼻咽癌的治療效果，減少了正常組織放射性損傷。目的研究鼻咽癌調(diào)強放療計劃中靶區(qū)和正常組織劑量分布，比較調(diào)強放療和常規(guī)放療計劃中腮腺劑量的差別。方法在10例鼻咽癌患者的定位CT圖像上制定調(diào)強放療和常規(guī)放療計劃。計算靶區(qū)的平均劑量、靶區(qū)覆蓋率V95。、不均勻指數(shù)以及正常組織的劑量分布。比較調(diào)強放療計劃和常規(guī)放療計劃中的腮腺劑量。結(jié)果1．PTVINX、PTVLND、PTV2和PTV3的平均劑量分別是66．80士0．93、66．2141．43、59．65士2．84和54．21士3．90。2．PTVLNX、PTVLND、PTV2和PTV3的劑量不均勻指數(shù)分別是1．06士0．02、1．08士0．03、1．16士O．05和1．28士0．08。3．PTVLNX、PT、，1RID、PTV2和PTV3的靶區(qū)覆蓋率V95％均大于99％。4．調(diào)強放療計劃和常規(guī)放療計劃中腮腺的劑量分別是32．67士5．71和61．44I3．52T13．27，P3．25X10‘7。結(jié)論調(diào)強放療能夠形成比較理想的劑量分布。與常規(guī)放療相比，調(diào)強放療顯著降低了腮腺受量。關(guān)鍵詞調(diào)強放射治療劑量分布腮腺Ⅱ

簡介：2007年12月下半月電影文學88影視傳播摘要“病毒性”營銷是與傳統(tǒng)營銷截然不同的營銷理念和營銷方式?！安《拘浴睜I銷理念是建立在“以允許為基礎(chǔ)”上的推銷方式?！安《拘浴睜I銷廣告作為影響消費者態(tài)度和行為的主要來源之一對提高組織信息傳播能力和效能起著重要的作用并引起傳播學、心理學和營銷學者們的關(guān)注。本文是在傳播學的基礎(chǔ)上對“病毒性”營銷廣告進行一系列的研究與應用關(guān)鍵詞傳播學；病毒性；營銷；廣告◆楊君順曹?。兾骺萍即髮W設計學院，陜西西安710021）一、提出背景1網(wǎng)絡的發(fā)展促使廣告的傳播方式出現(xiàn)了轉(zhuǎn)變。國際互聯(lián)網(wǎng)絡INTERNET是當今世界上最為熱門的話題之一。隨著互聯(lián)網(wǎng)的用途由學術(shù)研究向商業(yè)應用的逐步轉(zhuǎn)變，世界各地企業(yè)紛紛上網(wǎng)為消費者提供各種類型的信息服務，并把搶占這一科技制高點視為獲取未來競爭優(yōu)勢的重要途徑?！盎ヂ?lián)網(wǎng)正在持續(xù)性地重構(gòu)媒體版圖，更多地廣告費投入到了在線廣告?！逼杖A永道的PETERPETRUSKY說，“網(wǎng)絡廣告正在驅(qū)動品牌和銷售結(jié)果的雙豐收。”2受眾心理和行為方式的變化。在網(wǎng)絡世界每時每刻都在發(fā)生著難以意料的變化。21世紀“新新人類”的出現(xiàn)，網(wǎng)絡傳播中受眾各種心理的出現(xiàn)喜歡獵奇的心理、參與的心理、信息尋求的心理、要求被認同的心理、渴望交流的心理、代入的心理、逃避的心理等。這些受眾心理和行為方式的轉(zhuǎn)變促使廣告形式也發(fā)生了變化。3“PLAY”的思維?！癙LAY”在英語中有“戲劇”和“角色”的意思。在傳播的世界里，沒有“人”，只有“角色”。傳播在人類社會中一直是“角色”的工具。在現(xiàn)代社會中廣告的作用是把人們代入到廣告所扮演的角色中去，實現(xiàn)人們的角色欲望，進而達到廣告的目的。4由“PUSH”到“PULL”。傳統(tǒng)廣告是通過強制性的方式把信息強制性地傳播到消費者的耳朵中，這就是“PUSH”，也可以稱之為“暴力廣告”。然而現(xiàn)在的消費者既是產(chǎn)品消費者，也是資訊消費者。他們不喜歡廣告，也不喜歡像廣告一樣的文章，除非這些東西對他們有用，或者讓他們感興趣。這就是“PULL”，也是“誘惑性廣告”，這是一種自發(fā)性的行為?！安《拘浴睜I銷廣告與傳統(tǒng)廣告有著截然不同的廣告理念和廣告方式。它以類似病毒的形式深入肌體、繁殖快捷、傳播廣泛和發(fā)展迅速為特征來借以網(wǎng)上一種全新的營銷廣告活動。它像病毒一樣在不知不覺中侵入你的肌體讓你對它產(chǎn)生好感。這時你的購物潛意識被激活產(chǎn)生要購買這種產(chǎn)品的欲望。隨著這種營銷理念誕生，廣告形式也應運而生。在這么一系列的背景下，本文將對“病毒性”營銷廣告的研究與應用進行一系列的闡述。二、“病毒性”營銷廣告的研究內(nèi)容與應用1“病毒性”營銷廣告的含義?！安《拘浴睜I銷廣告VIRALMARKETING也可稱為病毒式營銷是一種常用的網(wǎng)絡營銷方法，常用于進行網(wǎng)站推廣、品牌推廣等?！安《拘浴睜I銷廣告利用的是用戶口碑傳播的原理，在互聯(lián)網(wǎng)上，這種“口碑傳播”更為方便，可以像病毒一樣迅速蔓延，因此“病毒性”營銷廣告病毒式營銷成為一種高效的信息傳播方式，而且，由于這種傳播是用戶之間自發(fā)進行的，因此幾乎是不需要費用的網(wǎng)絡營銷手段。2“病毒性”營銷廣告的特點。“病毒性”營銷是一靠口碑傳播價值信息的營銷方式，特別在互聯(lián)網(wǎng)營銷上有重點應用。其一般特點包括免費的產(chǎn)品、服務、利益點可輕松快捷地傳遞給朋友受眾規(guī)模可無限大利用受眾的關(guān)系渠道作為傳播媒介。3“病毒性”營銷廣告的基本要素。（1）創(chuàng)建有感染力的“病源體”，使其成為爆炸性的傳播話題，通過心靈的溝通感染消費者，進而不斷蔓延開來。（2）針對性的選擇傳播目標群體（意見領(lǐng)袖），使其成為“病毒”的最初“感染”者和傳播者。（3）創(chuàng)建“病毒”感染途徑傳遞渠道，在消費者日常生活中頻繁出現(xiàn)，潛移默化地影響消費者。（4）通過有效的載體為病毒預埋管線，利用公眾的積極性參與行為，讓“病毒”很容易從小到大規(guī)模擴散。“一切為了銷售”是營銷的最終目標，病毒營銷的殺傷力就在于讓消費者感染病毒后主動對企業(yè)的產(chǎn)品產(chǎn)生購買興趣。4網(wǎng)絡媒介基礎(chǔ)上的“病毒性”營銷廣告雙向傳播模式。“病毒性”營銷廣告并非真的以傳播病毒的方式開展營銷，而是通過用戶的口碑宣傳網(wǎng)絡，信息像病毒一樣傳播和擴散，利用快速復制的方式傳向數(shù)以千計、數(shù)以百萬計的受眾。在網(wǎng)絡媒介發(fā)展的基礎(chǔ)上，作為病毒源的傳播者通過網(wǎng)絡媒介來感染受眾，在受眾被感染的同時，自己成為傳播者。這樣在網(wǎng)絡媒介的基礎(chǔ)上，傳播者與受眾互相感染，形成一個圍繞網(wǎng)絡的雙向傳播模式。三、“病毒性”營銷廣告的研究模型“病毒性”營銷廣告研究模型由前因、內(nèi)容、結(jié)果和影響因素四個方面組成。在強調(diào)“病毒性”傳播結(jié)果的同時也要注重對“病毒性”營銷廣告的前因和“病毒性”營銷廣告的影響因素的研究從而把“病毒性”營銷廣告的傳者和接收者都視為“病毒性”營銷廣告的研究對象兼顧“病毒性”營銷廣告的正面和負面效應。1“病毒性”營銷廣告發(fā)生的前因。發(fā)生在網(wǎng)絡營銷背景下的“病毒性”營銷廣告行為有三大前因新奇的方式，免費的產(chǎn)品、服務、利益點，輕松快捷地傳遞。2“病毒性”營銷廣告的內(nèi)容層次?！安《拘浴睜I銷廣告的層次性主要是從“病毒性”營銷廣告的內(nèi)涵出發(fā)的一種分層?！安《拘浴睜I銷廣告的內(nèi)涵包括“病毒性”營銷廣告活動和“病毒性”營銷廣告效應兩個層面。從廣告角度出發(fā)傳者的行為更為重要即“病毒性”營銷廣告的活動本身的研究更重要。本研究模型把“病毒性”營銷廣告的內(nèi)涵分為“病毒性”營銷廣告活動、“病毒性”營銷廣告表揚效應和“病毒性”營銷廣告負面效應三個層次。3“病毒性”營銷廣告的影響因素。“病毒性”營銷廣告的影響因素主要有病毒的主動搜尋，硬件設施的缺陷，感知風險，傳播者的角色制造，接受者的角色代入。4“病毒性”營銷廣告的結(jié)果。“病毒性”營銷廣告結(jié)果主要體現(xiàn)在消費者購買前和購買后兩個階段。處于購買前決策階段的消費者會受“病毒性”營銷廣告信息的影響從而產(chǎn)生一定的購買行為；同樣處于購買后評價階段的消費者也會受“病毒性”傳播信息的影響并做出正面或負面的評價。四、結(jié)語病毒營銷實質(zhì)就是制造出獨特的利益點，通過口碑傳播以迅速達到極高的知名度。病毒式營銷是一種“以默許為基礎(chǔ)”的營銷方式，讓所營銷的產(chǎn)品如病毒一樣在不知不覺中侵入人的大腦，讓人對它產(chǎn)生認同甚至是依賴，到這時，人的購物潛意識已形成，產(chǎn)生要購買這種品牌的欲望。但這種購物欲望只是一種潛意識，必須通過后期營銷活動來激活，這也就是傳統(tǒng)營銷活動中的臨門一腳。實現(xiàn)從“購買潛意識”到“購買行動”這一過程的跳躍。作者簡介楊君順，（1947），男，福建龍海人，教授、碩士生導師；曹健（1982），男，漢，山東臨沂人，陜西科技大學設計藝術(shù)學在讀研究生?；趥鞑W的“病毒性”營銷廣告的研究與應用探討2007年12月下半月電影文學88影視傳播摘要“病毒性”營銷是與傳統(tǒng)營銷截然不同的營銷理念和營銷方式?！安《拘浴睜I銷理念是建立在“以允許為基礎(chǔ)”上的推銷方式?！安《拘浴睜I銷廣告作為影響消費者態(tài)度和行為的主要來源之一對提高組織信息傳播能力和效能起著重要的作用并引起傳播學、心理學和營銷學者們的關(guān)注。本文是在傳播學的基礎(chǔ)上對“病毒性”營銷廣告進行一系列的研究與應用關(guān)鍵詞傳播學；病毒性；營銷；廣告◆楊君順曹?。兾骺萍即髮W設計學院，陜西西安710021）一、提出背景1網(wǎng)絡的發(fā)展促使廣告的傳播方式出現(xiàn)了轉(zhuǎn)變。國際互聯(lián)網(wǎng)絡INTERNET是當今世界上最為熱門的話題之一。隨著互聯(lián)網(wǎng)的用途由學術(shù)研究向商業(yè)應用的逐步轉(zhuǎn)變，世界各地企業(yè)紛紛上網(wǎng)為消費者提供各種類型的信息服務，并把搶占這一科技制高點視為獲取未來競爭優(yōu)勢的重要途徑?！盎ヂ?lián)網(wǎng)正在持續(xù)性地重構(gòu)媒體版圖，更多地廣告費投入到了在線廣告。”普華永道的PETERPETRUSKY說，“網(wǎng)絡廣告正在驅(qū)動品牌和銷售結(jié)果的雙豐收?！?受眾心理和行為方式的變化。在網(wǎng)絡世界每時每刻都在發(fā)生著難以意料的變化。21世紀“新新人類”的出現(xiàn)，網(wǎng)絡傳播中受眾各種心理的出現(xiàn)喜歡獵奇的心理、參與的心理、信息尋求的心理、要求被認同的心理、渴望交流的心理、代入的心理、逃避的心理等。這些受眾心理和行為方式的轉(zhuǎn)變促使廣告形式也發(fā)生了變化。3“PLAY”的思維。“PLAY”在英語中有“戲劇”和“角色”的意思。在傳播的世界里，沒有“人”，只有“角色”。傳播在人類社會中一直是“角色”的工具。在現(xiàn)代社會中廣告的作用是把人們代入到廣告所扮演的角色中去，實現(xiàn)人們的角色欲望，進而達到廣告的目的。4由“PUSH”到“PULL”。傳統(tǒng)廣告是通過強制性的方式把信息強制性地傳播到消費者的耳朵中，這就是“PUSH”，也可以稱之為“暴力廣告”。然而現(xiàn)在的消費者既是產(chǎn)品消費者，也是資訊消費者。他們不喜歡廣告，也不喜歡像廣告一樣的文章，除非這些東西對他們有用，或者讓他們感興趣。這就是“PULL”，也是“誘惑性廣告”，這是一種自發(fā)性的行為?！安《拘浴睜I銷廣告與傳統(tǒng)廣告有著截然不同的廣告理念和廣告方式。它以類似病毒的形式深入肌體、繁殖快捷、傳播廣泛和發(fā)展迅速為特征來借以網(wǎng)上一種全新的營銷廣告活動。它像病毒一樣在不知不覺中侵入你的肌體讓你對它產(chǎn)生好感。這時你的購物潛意識被激活產(chǎn)生要購買這種產(chǎn)品的欲望。隨著這種營銷理念誕生，廣告形式也應運而生。在這么一系列的背景下，本文將對“病毒性”營銷廣告的研究與應用進行一系列的闡述。二、“病毒性”營銷廣告的研究內(nèi)容與應用1“病毒性”營銷廣告的含義?！安《拘浴睜I銷廣告VIRALMARKETING也可稱為病毒式營銷是一種常用的網(wǎng)絡營銷方法，常用于進行網(wǎng)站推廣、品牌推廣等。“病毒性”營銷廣告利用的是用戶口碑傳播的原理，在互聯(lián)網(wǎng)上，這種“口碑傳播”更為方便，可以像病毒一樣迅速蔓延，因此“病毒性”營銷廣告病毒式營銷成為一種高效的信息傳播方式，而且，由于這種傳播是用戶之間自發(fā)進行的，因此幾乎是不需要費用的網(wǎng)絡營銷手段。2“病毒性”營銷廣告的特點。“病毒性”營銷是一靠口碑傳播價值信息的營銷方式，特別在互聯(lián)網(wǎng)營銷上有重點應用。其一般特點包括免費的產(chǎn)品、服務、利益點可輕松快捷地傳遞給朋友受眾規(guī)模可無限大利用受眾的關(guān)系渠道作為傳播媒介。3“病毒性”營銷廣告的基本要素。（1）創(chuàng)建有感染力的“病源體”，使其成為爆炸性的傳播話題，通過心靈的溝通感染消費者，進而不斷蔓延開來。（2）針對性的選擇傳播目標群體（意見領(lǐng)袖），使其成為“病毒”的最初“感染”者和傳播者。（3）創(chuàng)建“病毒”感染途徑傳遞渠道，在消費者日常生活中頻繁出現(xiàn)，潛移默化地影響消費者。（4）通過有效的載體為病毒預埋管線，利用公眾的積極性參與行為，讓“病毒”很容易從小到大規(guī)模擴散?！耙磺袨榱虽N售”是營銷的最終目標，病毒營銷的殺傷力就在于讓消費者感染病毒后主動對企業(yè)的產(chǎn)品產(chǎn)生購買興趣。4網(wǎng)絡媒介基礎(chǔ)上的“病毒性”營銷廣告雙向傳播模式?！安《拘浴睜I銷廣告并非真的以傳播病毒的方式開展營銷，而是通過用戶的口碑宣傳網(wǎng)絡，信息像病毒一樣傳播和擴散，利用快速復制的方式傳向數(shù)以千計、數(shù)以百萬計的受眾。在網(wǎng)絡媒介發(fā)展的基礎(chǔ)上，作為病毒源的傳播者通過網(wǎng)絡媒介來感染受眾，在受眾被感染的同時，自己成為傳播者。這樣在網(wǎng)絡媒介的基礎(chǔ)上，傳播者與受眾互相感染，形成一個圍繞網(wǎng)絡的雙向傳播模式。三、“病毒性”營銷廣告的研究模型“病毒性”營銷廣告研究模型由前因、內(nèi)容、結(jié)果和影響因素四個方面組成。在強調(diào)“病毒性”傳播結(jié)果的同時也要注重對“病毒性”營銷廣告的前因和“病毒性”營銷廣告的影響因素的研究從而把“病毒性”營銷廣告的傳者和接收者都視為“病毒性”營銷廣告的研究對象兼顧“病毒性”營銷廣告的正面和負面效應。1“病毒性”營銷廣告發(fā)生的前因。發(fā)生在網(wǎng)絡營銷背景下的“病毒性”營銷廣告行為有三大前因新奇的方式，免費的產(chǎn)品、服務、利益點，輕松快捷地傳遞。2“病毒性”營銷廣告的內(nèi)容層次?！安《拘浴睜I銷廣告的層次性主要是從“病毒性”營銷廣告的內(nèi)涵出發(fā)的一種分層。“病毒性”營銷廣告的內(nèi)涵包括“病毒性”營銷廣告活動和“病毒性”營銷廣告效應兩個層面。從廣告角度出發(fā)傳者的行為更為重要即“病毒性”營銷廣告的活動本身的研究更重要。本研究模型把“病毒性”營銷廣告的內(nèi)涵分為“病毒性”營銷廣告活動、“病毒性”營銷廣告表揚效應和“病毒性”營銷廣告負面效應三個層次。3“病毒性”營銷廣告的影響因素。“病毒性”營銷廣告的影響因素主要有病毒的主動搜尋，硬件設施的缺陷，感知風險，傳播者的角色制造，接受者的角色代入。4“病毒性”營銷廣告的結(jié)果?！安《拘浴睜I銷廣告結(jié)果主要體現(xiàn)在消費者購買前和購買后兩個階段。處于購買前決策階段的消費者會受“病毒性”營銷廣告信息的影響從而產(chǎn)生一定的購買行為；同樣處于購買后評價階段的消費者也會受“病毒性”傳播信息的影響并做出正面或負面的評價。四、結(jié)語病毒營銷實質(zhì)就是制造出獨特的利益點，通過口碑傳播以迅速達到極高的知名度。病毒式營銷是一種“以默許為基礎(chǔ)”的營銷方式，讓所營銷的產(chǎn)品如病毒一樣在不知不覺中侵入人的大腦，讓人對它產(chǎn)生認同甚至是依賴，到這時，人的購物潛意識已形成，產(chǎn)生要購買這種品牌的欲望。但這種購物欲望只是一種潛意識，必須通過后期營銷活動來激活，這也就是傳統(tǒng)營銷活動中的臨門一腳。實現(xiàn)從“購買潛意識”到“購買行動”這一過程的跳躍。作者簡介楊君順，（1947），男，福建龍海人，教授、碩士生導師；曹?。?982），男，漢，山東臨沂人，陜西科技大學設計藝術(shù)學在讀研究生?；趥鞑W的“病毒性”營銷廣告的研究與應用探討

簡介：腸道感染病毒,經(jīng)腸道感染的病毒,,,,,,,,,,,,,,,,,26,腸道病毒,第,章,小RNA病毒科,1、脊髓灰質(zhì)炎病毒POLIOVIRUS1、2、3三型脊髓灰質(zhì)炎（小兒麻痹癥）2、柯薩奇病毒COXSACKIEVIRUS分A、B兩組A組包括A1～A22、A24型皰疹性咽峽炎等B組包括B1～B6型心肌炎等3、?？刹《綞CHOV1～9、11～27、29～33型無菌性腦膜炎等4、新型腸道病毒（NEWENTEROVIRUSES）68、69、70、71型手足口并病等,小RNA病毒科,生物學特性,小球形病毒（24～30NM），無包膜核酸為SSRNA，有感染性衣殼有VP1VP4四種蛋白，VP1VP3分布在表面，VP4與內(nèi)部RNA結(jié)合在胞漿增殖，破胞釋放,迅速產(chǎn)生CPE抵抗力強，耐酸耐乙醚，但鼻病毒除外,小RNA病毒科,致病特點,糞口傳播，隱性感染為主。胃腸道感染，卻引起胃腸道外感染性疾病。一種病毒血清型可引起幾種不同的疾病綜合征，而幾種不同的血清型又可引起同一種疾?。ㄒ奝253）。,一、脊髓灰質(zhì)炎病毒POLIOMYELITIS,脊髓灰質(zhì)炎，即小兒麻痹癥，是一種多發(fā)生于夏秋季由脊髓灰質(zhì)炎病毒引起的急性消化道傳染病?；颊咴诙嗪拱l(fā)熱、周身疼痛數(shù)日后常會手足軟綿、不會動彈，稱為“弛緩性麻痹”，嚴重者病毒可侵入腦神經(jīng)，出現(xiàn)面癱，吞咽和呼吸困難，乃至危機生命。,1938年，羅斯福簽署文件成立脊髓灰質(zhì)炎研究基金會,在脊髓灰質(zhì)炎患者中，部分病人留有永久的肢體癱瘓后遺癥，是致殘的主要疾病之一。,1954年，SALK研制出疫苗，美國發(fā)行紀念郵票,形態(tài),球形，28NM，無包膜,核衣殼二十面體立體對稱,基因組單正鏈RNA，長約74KB,結(jié)構(gòu),基因組和編碼蛋白,5’端共價結(jié)合一小分子蛋白VPG與病毒RNA合成與基因組裝配有關(guān),3’端帶有POLY（A）尾加強病毒的感染性,,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,病毒蛋白質(zhì)合成以病毒基因組為模板翻譯前體蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白酶蛋白VP1VP3VP0VP2VP4,,,,,病毒RNA復制基因組RNA（）復制互補RNA（）復制子病毒RNA（）,,,受體免疫球蛋白超家族的細胞粘附分子脊髓前角運動神經(jīng)元,,不耐熱，56℃30MIN可使之滅活煮沸和紫外線照射可迅速將其殺死對高錳酸鉀、過氧化氫、漂白粉等敏感，可將其殺死,抵抗力,耐化學消毒劑,耐酸、蛋白酶和膽汁,耐乙醚等脂溶劑,耐潮濕和寒冷,強,致病性,人是脊灰病毒唯一的自然宿主，且普遍易感,夏秋季高發(fā)，15歲兒童是主要易感者。,脊髓灰質(zhì)炎的致病機理,脊髓灰質(zhì)炎的臨床表現(xiàn),免疫性,根據(jù)抗原可以分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗原性相對穩(wěn)定型與型之間有廣泛的共同抗原中和試驗無型間無交叉反應,同型免疫牢固,免疫性,腸道局部SIGA血液中和性IGG、IGM抗體中和抗體可長時間維持（終生）,體液免疫為主,脊灰病毒分離,發(fā)病2周內(nèi)采集的標本進行病毒分離陽性率高約70患兒糞便中帶有病毒12周，少數(shù)患兒帶病毒38周,自潛伏期開始到癱瘓后12周排毒率最高69100,糞便、咽分泌物、腦脊液、腦或脊髓,,,,微生物學檢查,微生物學檢查,病毒分離糞便抗生素猴腎細胞或人胚腎細胞37℃/710天細胞病變型別鑒定,微生物學檢查,正常的VERO細胞,感染脊灰病毒的VERO細胞,微生物學檢查,病毒抗體檢測,不能區(qū)別疫苗株和野毒株,感染1015天內(nèi)應用ELISA法，查IGM早期快速特異診斷方法,或恢復期血清中和抗體或特異性IGG抗體滴度比急性期≥4倍升高,,微生物學檢查,病毒基因檢測核酸雜交，PCR等,WHO規(guī)定與疫苗株（SABIN株）相比VP1區(qū)核苷酸變異率≥15的脊灰病毒定義為脊灰野病毒,防治原則,人工主動免疫嬰兒（2月齡內(nèi)）,接種三價疫苗2月齡兒童,滅活疫苗IPV，SALK苗肌注減毒活疫苗OPV，SABIN苗口服三價口服減毒活疫苗（TOPV）三次連服TOPV（間隔一個月），抗體陽性率可到100，4歲加強。,脊髓灰質(zhì)炎疫苗的種類,2000年7月11日，國家消滅脊髓灰質(zhì)炎證實委員會在衛(wèi)生部舉行“中國消滅脊髓灰質(zhì)炎證實報告簽字儀式”,脊髓灰質(zhì)炎死活苗的比較,疫苗相關(guān)麻痹性脊髓灰質(zhì)炎VDPV發(fā)生,2006年7月，來自不同省份的數(shù)位家長帶著肢體異常的孩子到北京兒童醫(yī)院求醫(yī)。家長驚訝地發(fā)現(xiàn)，他們的孩子有個共同點出生后均服用了脊髓灰質(zhì)炎疫苗。,新的免疫程序增效疫苗IPVOPV聯(lián)合應用,第一、二兩次IPV，第三次用OPV,免疫效果穩(wěn)定良好,脊灰的處理原則,傳染病報告各級醫(yī)療機構(gòu)和人員發(fā)現(xiàn)病例后，城市在12小時，農(nóng)村在24小時內(nèi)以最快方式報告到當?shù)剌爡^(qū)疾控機構(gòu),隔離進行消化道隔離，隔離期限40天，糞便進行消毒后排放,治療急性期治療支持治療、對癥治療和治療并發(fā)癥恢復期治療一旦麻痹不再進展，立即康復治療,脊髓灰質(zhì)炎雖無特效治療，但可防可控，疫苗可有效預防,,27,急性胃腸炎病毒,第,章,主要包括輪狀病毒杯狀病毒腸道腺病毒星狀病毒,胃腸炎病毒引起的急性胃腸炎病毒性腹瀉,特點1無細菌病原2突發(fā)，恢復快3相似的中度腹瀉與嘔吐4無年齡與地域限制,二、輪狀病毒（ROTAVIRUS）,輪狀病毒輪狀病毒（ROTAVIRUS）屬于呼腸病毒科，是人類、哺乳動物和鳥類腹瀉的重要病原體。根據(jù)VP6抗原性，分為A～G7組，A～C組引起人類、動物腹瀉，D～G組引起動物腹瀉，A組是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體。,形態(tài)1、大小不等的圓球形2、雙層衣殼，每層衣殼呈20面體對稱3、殼粒呈放射狀排列，形同車輪輻條,病毒內(nèi)衣殼,病毒外衣殼,電鏡下，病毒酷似“車輪狀”,病毒核心為DSRNA，由11個不連續(xù)的節(jié)段組成，分別編碼6個結(jié)構(gòu)蛋白和6個非結(jié)構(gòu)蛋白。,基因組及其編碼的蛋白質(zhì),VP1VP3位于核心，分別為病毒RNA多聚酶，轉(zhuǎn)錄酶和與帽形成有關(guān)的蛋白VP6位于內(nèi)衣殼，有組和亞組特異性抗原VP7（表面糖蛋白）和VP4（血凝素）位于外衣殼，確定血清型，是中和抗原，與病毒吸附有關(guān)非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP1NSP5）為病毒酶或調(diào)節(jié)蛋白，在病毒復制和毒力產(chǎn)生中起主要作用。如NSP4有腸毒素樣的作用，與致病有關(guān),VP5VP8，增強病毒的感染,,QUESTION,,QUESTION,復制,腸道蛋白酶,躲在殼里的秘密復制,分型與分組,VP6抗原性AG七個組,VP6蛋白差異A組內(nèi)分4個亞組,A組引起嬰幼兒急性胃腸炎B組主要引起成人腹瀉C組主要感染豬，但近年來也在人群檢出該病毒D～G組僅引起動物腹瀉,G和P雙命名系統(tǒng)可用于確定毒株類型，占人類輪狀病毒感染90左右的5種GP組合血清型G1P8、G2P4、G3P8、G4P8和G9P8，其中以G1P8最常見。,VP7抗原性A組分為14個G血清型,VP4抗原性A組分為19個P血清型,抵抗力,耐酸、耐堿、耐乙醚、耐反復凍融,,強,55℃，30MIN滅活,室溫中傳染性可保持7個月,致病性,傳染源病人和無癥狀帶毒者傳播途徑主要通過糞口途徑傳播，也可通過呼吸道傳播多發(fā)于深秋初冬季節(jié)，在我國常稱為秋季腹瀉,感染最為常見；引起6個月～2歲嬰幼兒嚴重胃腸炎，常稱為秋季腹瀉。,致病機理,臨床表現(xiàn)突然發(fā)病發(fā)熱、水樣腹瀉、伴嘔吐一般為自限性重者脫水和酸中毒，導致死亡,免疫性,型特異性抗體（IGM、IGG、SIGA）腸道SIGA最為重要,微生物檢查,檢測病毒或病毒抗原患者糞便中有大量病毒顆粒，且形態(tài)結(jié)構(gòu)特殊，用電鏡或免疫電鏡法檢查。2ELISA直接法或間接法檢查病毒抗原。3核酸雜交法、PCR法檢測病毒核酸。,4聚丙烯酰胺凝膠電泳法根據(jù)A、B、C三組輪狀病毒11個基因片段的特殊分布圖形進行分析判斷，在臨床病因診斷和流行病學調(diào)查中有重要意義。,防治原則,對癥治療為主，注意補液，糾正電解質(zhì)平衡,,預防,控制傳染源切斷傳播途徑注意飲食消毒衛(wèi)生減毒活疫苗,課堂小結(jié),1、經(jīng)腸道感染病毒的種類及疾病。2、脊髓灰質(zhì)炎病毒的生物學特征。3、脊髓灰質(zhì)炎的有效預防。4、輪狀病毒的結(jié)構(gòu)特征。5、輪狀病毒的致病性。,復習思考題,1、簡述脊髓灰質(zhì)炎病毒的生物學特征和致病性。2、如何有效的預防脊髓灰質(zhì)炎。3、簡述輪狀病毒的結(jié)構(gòu)特征。4、如何理解輪狀病毒的生命活動與其致病性。,

簡介：病毒性心肌炎,廣州中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院王云飛,,目的要求【掌握】本病的診斷及鑒別診斷【熟悉】本病的中醫(yī)病因病機和治療及本病的西醫(yī)病因和病理【了解】本病的防治原則,概述,病毒性心肌炎（VIRALMYOCARDITIS）是指病毒感染過程中引起的以心肌非特異性炎癥為主要改變的心肌疾病，常常為各種病毒全身性感染的一部分表現(xiàn)，是常見的心肌炎之一,,病毒感染的人群中5的病人發(fā)生心肌炎潛伏期1～4周可見于各年齡組，小兒尤易罹患成人發(fā)病年齡以20～30歲居多男性較女性多見夏、秋兩季多見,病因病理,病因腸道病毒和呼吸道病毒感染柯薩奇B組病毒（50）柯薩奇A組病毒（23）?？刹《?、流感病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒此外風疹、腮腺炎、水痘、天花、皰疹副流感、肝炎、帶狀皰疹、艾滋病等病毒,,柯薩奇病毒心肌病模型一般認為該病過程有兩個階段第1階段為病毒復制期該階段是病毒經(jīng)血液直接侵犯心臟，損害心肌，使心肌細胞溶解破壞急性暴發(fā)性心肌炎在病毒感染1～2周內(nèi)猝死者,,第2階段為免疫變態(tài)反應期大多數(shù)病毒性心肌炎慢性期病毒性心肌炎患者病毒在該時期內(nèi)可能已不存在，但心肌仍持續(xù)受損免疫變態(tài)反應主要是T細胞免疫損傷,,局限性的心肌炎癥心律失常，如早搏、房室傳導阻滯重癥彌漫性的心肌炎急性心力衰竭，心臟顯著擴大，心源性休克，乃至突然死亡,較少見,,中醫(yī)病因病機病因1稟賦不足、正氣虛弱正虛2感受外邪，內(nèi)舍于心邪實,,病機1先天稟賦不足，或后天失養(yǎng)，或久病體虛不能抵御外邪，溫熱毒邪由鼻咽或衛(wèi)表而入，肺衛(wèi)不宣惡寒發(fā)熱、頭痛身疼、咽痛咳嗽2熱毒不解逆?zhèn)餍陌貝灐⑿耐?熱毒犯心，損傷心氣，燒灼心陰而致心氣虛弱、心陰不足心悸氣短、頭暈乏力、脈律不整4病久不愈，陰損及陽，陰陽兩虛尿少水腫、心悸喘促等癥,,病位心與肺、脾、腎有關(guān)發(fā)病正氣不足，邪毒侵心病性本虛標實，虛實夾雜1正虛為本2熱毒、濕毒、痰濁、瘀血為標,臨床表現(xiàn),臨床分為急性、亞急性、慢性發(fā)病3個月以內(nèi)稱為急性病毒性心肌炎3～6個月為亞急性病毒性心肌炎半年以上為慢性病毒性心肌炎,,癥狀1原發(fā)病癥狀發(fā)病前有發(fā)熱、全身酸痛、咽痛、腹瀉等癥狀，反映全身性病毒感染有部分患者原發(fā)病癥狀輕而不顯著，需仔細追問方被注意到2心肌炎癥狀胸悶、心前區(qū)隱痛、心悸、乏力、惡心、頭暈,體征,1輕者心臟不擴大心臟擴大顯著反映心肌炎廣泛而嚴重2心率心律心率增速與體溫不相稱心率異常緩慢心律失常極常見3心音心尖區(qū)第一心音可減低或分裂，可呈胎心音樣,,常見并發(fā)癥（一）心律失常（CARDIACARRHYTHMIA）早搏50房性與室性早搏房室傳導阻滯（AVB）心房顫動、病態(tài)竇房結(jié)綜合征猝死的原因之一,,4心包摩擦音心包炎5心臟雜音雜音響度不超過三級，心肌炎好轉(zhuǎn)后即消失心尖區(qū)收縮期吹風樣雜音發(fā)熱、貧血、心腔擴大心尖區(qū)舒張期雜音左室擴大造成的相對性二尖瓣狹窄6心力衰竭體征重癥彌漫性心肌炎,,（二）心力衰竭（CARDIACFAILURE）慢性充血性心力衰竭部分慢性期患者，心臟進行性擴大，心功能減退急性左心衰竭急性肺水腫少數(shù)重癥患者在急性期，可突然出現(xiàn)，救治不及時可致死亡,,（三）心源性休克（CARDIOGENICSHOCK）心臟泵功能衰竭心源性休克重癥患者使心排血量急驟降低，而導致全身臟器組織血流灌注不足，周圍循環(huán)衰竭，救治不及時可迅速致死,輔助檢查,一、血液檢查1血沉增快急性期2血清轉(zhuǎn)氨酶、肌酸磷酸激酶增高心肌壞死3抗核抗體、抗心肌抗體陽性免疫功能異常4自然殺傷細胞的活力Α干擾素降低Γ干擾素升高免疫功能失控,,心電圖檢查心電圖改變敏感性高，特異性低1心律失常1早搏66室性早搏，房性、室性、房室交界性早搏2心臟傳導阻滯多數(shù)經(jīng)13周后消失，少數(shù)可長期存在一度AVB束支傳導阻滯表明病變廣泛2ST-–T改變30,,三、X線檢查1無異常變化局灶性心肌炎2心影擴大，心搏減弱彌漫性心肌炎合并心包炎3肺淤血或肺水腫征象左心功能不全的嚴重病例,,四、超聲心動圖檢查改變無特異性取決于病毒累及心室損傷的程度和范圍1左室收縮或舒張功能異常2節(jié)段性及區(qū)域性室壁運動異常3室壁厚度增加4心肌回聲反射增強和不均勻5右室擴張及運動異常6心臟擴大、心室壁運動減弱,,五、同位素心肌顯像鎵和111銦單克隆抗肌凝蛋白抗體顯像敏感性高100特異性低50,,七、心內(nèi)膜心肌活檢1確診金標準2癥狀發(fā)生的前幾周內(nèi)行心肌活檢陽性率較高3適應證ACC/AHA在心衰治療指南上把心內(nèi)膜活檢作為IIB類適應證1病人發(fā)生迅速的進行性心肌病2對常規(guī)的治療無效或不能解釋的伴有進行性地傳導系統(tǒng)病變3危及生命的室性心律失常的心肌病,診斷,參照1999年全國心肌炎心肌病專題座談會提出的成人急性病毒性心肌炎診斷參考標準（一）病史與體征在上呼吸道感染、腹瀉等病毒感染后3周內(nèi)出現(xiàn)心臟表現(xiàn)重度乏力、胸悶、頭昏心尖第一心音明顯減弱、舒張期奔馬律、心包摩擦音心臟擴大充血性心力衰竭或阿斯綜合征,,（二）感染后3周內(nèi)出現(xiàn)下列心律失?；蛐碾妶D改變1竇性心動過速、房室傳導阻滯、竇房阻滯、束支傳導阻滯2多源、成對室性早搏、自主性房性或交界性心動過速、陣發(fā)或非陣發(fā)性室性心動過速、心房或心室撲動或顫動32個以上導聯(lián)ST段呈水平或下斜型下移≥001MV，或ST段抬高或出現(xiàn)異常Q波,,（三）心肌損害的參考指標1血清心肌肌鈣蛋白I或T、CKMB明顯增高2超聲心動圖示心腔擴大或室壁活動異常3核素心功能檢查證實左室收縮或舒張功能減弱。,,（四）病原學依據(jù)1在急性期從心內(nèi)膜、心肌、心包或心包穿刺液檢測出病毒、病毒基因片段或病毒蛋白抗原,,2病毒抗體1（如柯薩奇B組病毒中和抗體或流行性感冒病毒血凝抑制抗體等）（2份血清應相隔2周以上）第2份血清中同型病毒抗體滴度較第1份血清升高4倍2一次抗體效價≥640者為陽性，320者為可疑陽性（如以1∶32為基礎(chǔ)者，則宜以≥256為陽性，128為可疑陽性）,,3病毒特異性IGM≥1∶320者為陽性如同時有血中腸道病毒核酸陽性者更支持有近期病毒感染,,鑒別診斷（一）鏈球菌感染后綜合征扁桃體心臟綜合征（POSTSTREPTOCOCCALINFECTIONSYNDROME）1相同青少年患者有慢性扁桃體炎或咽峽炎等鏈球菌反復感染鏈球菌毒素引起機體變態(tài)反應關(guān)節(jié)炎、心悸、氣短心電圖ST–T變化，Ⅰ度房室傳導阻滯2不同本病預后良好癥狀可時輕時重青霉素治療或摘除扁桃體后可治愈,,（二）風濕性心肌炎（RHEUMATICMYOCARDITIS）1相同抗溶血性鏈球菌溶血素“O”增高血沉增快心肌酶增高心電圖改變2不同大關(guān)節(jié)炎、皮下小結(jié)節(jié)、環(huán)形紅斑心臟雜音病毒學檢查陰性抗風濕治療有效,,（三）原發(fā)性心肌病起病慢無前驅(qū)感染史無病毒感染證據(jù)活檢以心肌肥大或心肌變性壞死為主超聲心動圖示心室腔明顯擴大等可資鑒別但與心肌炎晚期則鑒別較難,,（四）冠心病（CORONARYHEARTDISEASE）1相同心前區(qū)疼痛及ST–T改變2不同冠心病年齡多較大常伴有冠心病易患因素心前區(qū)悶痛持續(xù)時間短，硝酸甘油可緩解。短期內(nèi)出現(xiàn)心律失常且演變不迅速如Ⅰ度房室傳導阻滯很快演變成Ⅱ度、Ⅲ度房室傳導阻滯，則要多考慮心肌炎冠狀動脈造影可鑒別,,五Β受體亢進綜合征（HYPERΒRECEPTERSYNDROME）1相同年輕患者多見心電圖ST–T改變及竇性心動過速2不同常有一定的精神因素主訴多變普萘洛爾心得安試驗可在用藥后片刻內(nèi)使ST–T改變恢復正常,治療,目標1控制病毒感染2調(diào)節(jié)機體的免疫功能3消除心肌炎癥4防治心律失常5糾正心功能不全6減少心肌炎后遺癥7降低擴張性心肌病的發(fā)生率8提高生存質(zhì)量，減少病死率,,一、中醫(yī)治療中醫(yī)治療原則扶正祛邪六種基本證型進行辨證治療熱毒侵心、濕毒犯心、陰虛內(nèi)熱氣陰兩虛、陰陽兩虛、陽虛欲脫,,（一）辨證論治1熱毒侵心（ATTACKOFTHEHEARTBYNOXIOUSHEAT）證候惡寒發(fā)熱，頭痛身痛，心悸胸痛，氣短乏力，咽痛咳嗽，口干口苦，小便黃赤舌質(zhì)紅，舌苔黃，脈浮數(shù)或促結(jié)代治法清熱解毒，養(yǎng)心復脈方藥銀翹散合清營湯加減,,2濕毒犯心（AFFECTIONOFTHEHEARTBYNOXIOUSDAMPNESS）證候惡寒發(fā)熱，腹痛腹瀉，腹脹納呆惡心嘔吐，困倦乏力，心悸胸悶舌苔黃膩，脈濡滑數(shù)或促或結(jié)代治法清熱化濕，寧心復脈方藥香蓮丸（湯）合甘露消毒丹加減,,3陰虛內(nèi)熱（ENDOGENOUSHEATDUETODEFICIENCYOFYIN）證候心悸不寧，心煩不安，失眠多夢口干咽燥，手足心熱，潮熱盜汗或低熱不退，小便短少，大便秘結(jié)舌紅少津，脈細數(shù)或促、結(jié)代治法滋陰清熱，益心復脈方藥天王補心丹加減,,4氣陰兩虛（DEFICIENCYOFBOTHQIANDYIN）證候心悸怔忡，氣短乏力，自汗盜汗舌紅苔白，脈虛數(shù)或促、澀、結(jié)代治法補氣養(yǎng)陰，益心復脈方藥生脈散合五味子散加減,,5陰陽兩虛（DEFICIENCYOFBOTHYINANDYANG）證候心悸氣短，動則喘憋，甚或倚息不得臥胸悶痛，畏寒肢冷，乏力，自汗不止水腫，面色晦暗或發(fā)紺舌暗淡苔白，脈虛數(shù)或促、結(jié)代治法溫陽益氣，養(yǎng)陰通脈方藥炙甘草湯加減,,6陽虛欲脫（EXHAUSTIONOFYANG）證候起病急驟，心悸氣短，不能平臥煩躁不安，自汗不止，四肢厥冷舌淡苔白，脈微欲絕治法回陽固脫方藥參附龍牡湯加減,,二、西醫(yī)治療（一）一般療法1急性期患者應充分休息臥床休息602飲食以富有營養(yǎng)、容易消化為原則3居住環(huán)境的空氣應保持流通、新鮮4及時退熱、止痛、解除焦慮等對癥處理，以減輕心臟負荷5有嚴重心律失常者,應進行連續(xù)心電監(jiān)護，防止因嚴重心律失常而猝死6必要時吸氧,,（二）保護心肌療法心肌炎時，自由基產(chǎn)生增多，而超氧化物歧化酶活性下降，自由基加重心肌細胞損傷1臨床可使用大劑量的維生素C加入5葡萄糖注射液中靜脈滴注2輔酶A、肌苷肌內(nèi)注射或靜脈注射3三磷腺苷（ATP）或三磷酸胞苷（CTP）肌內(nèi)注射；4輔酶Q10口服，肌內(nèi)注射或靜脈注射,,（三）免疫抑制劑治療1感染早期最好不要用激素，以免抑制干擾素合成而加速病毒繁殖，加重心肌損害,,2在重癥心肌炎早期使用激素治療1強的松每日30～40MG地塞米松1日5～10MG，分3～4次口服2周后逐漸減量2先用醋酸地塞米松10～20MG或醋酸氫化可的松100～300MG/日分次靜脈滴注，連用3～7天，待病情穩(wěn)定后改口服，并迅速減量至停用3同時應注意停用激素后病情復發(fā)，后期應用硫唑嘌呤100MG/日，分次口服,3抗病毒治療1急性期有人主張應用抗病毒藥物常使用阻止病毒進入細胞內(nèi)的金剛烷胺，抑制病毒硫酸復制的阿糖胞苷、嗎啉呱、干擾素，抑制病毒蛋白合成的縮氨酸脲、異喹啉等其中干擾素還有明顯的調(diào)節(jié)細胞免疫的功能，許多研究均提示其作為免疫調(diào)節(jié)劑對病毒性心肌炎有防治作用,5、抗生素的應用病毒性心肌炎常合并鏈球菌感染此時可給以常規(guī)劑量的青霉素1周,6心力衰竭時可常規(guī)使用利尿劑及血管擴張劑，因心肌本身有壞死應慎用洋地黃類藥物7心律失常則用抗心律失常藥物或電除顫治療如系偶發(fā)早搏，可先觀察而不一定給予抗心律失常藥物如為完全房室傳導阻滯時，應使用臨時體外起搏器，因為本病發(fā)生完全房室傳導阻滯，可在短期內(nèi)恢復,預防與調(diào)護,一、預防平時注意加強體育鍛煉，提高抗病能力。積極預防感冒，注意飲食衛(wèi)生，遇有感冒及腹瀉要及早治療。患病期間避免劇烈運動及重體力勞動，急性期應充分休息，一般要完全恢復正常至少半年以上，有心力衰竭時則時間宜長。二、調(diào)理（－）生活調(diào)理（二）飲食調(diào)理（三）精神調(diào)理,思考題,1、簡述心肌疾病的分類2、簡述擴張型心肌病的臨床特點，如何與缺血性心肌病鑒別3、肥厚型心肌病的超聲心動圖有何特點4、擴張型心肌病和肥厚型心肌病的治療有何不同5、病毒性心肌炎的中西醫(yī)治療思路如何,,,謝謝,

簡介：,,什么是禽流感禽流感為何感染人何為H7N9H5N1H7N9為何致死率高,2013年3月安徽、上海等地出現(xiàn)人感染H7N9禽流感疫情。截至2013年4月22日20時全國已確診104人，21人死亡，13人痊愈,如何防治H7N9H7N9從哪里來H7N9會否人際傳播,,,需掌握的內(nèi)容,病毒與細菌的區(qū)別病毒的定義、分類病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的感染與復制病毒致病機制病毒的檢測病毒的預防與治療,病毒的概念,病毒是一類比細菌更低等，體積更小、結(jié)構(gòu)更簡單的，超級寄生的，具感染性的非細胞型微生物。它能侵犯植物、動物和細菌、真菌等微生物。,病毒與人類的關(guān)系,所致疾病占感染性疾病的75傳播力強病死率高與致畸、腫瘤和某些免疫性疾病有關(guān)其它（分子生物學、遺傳學意義，經(jīng)濟領(lǐng)域關(guān)系）,病毒的特點,體積小，能通過細菌濾器無細胞結(jié)構(gòu)，只含有一種核酸嚴格的細胞內(nèi)寄生，以復制方式繁殖有機體水平和細胞水平兩種致病方式耐冷不耐熱，對抗生素不敏感,病毒的形態(tài),球狀體（皰疹病毒、腺病毒）絲狀體（煙草花葉病毒、流感病毒）磚形體（天花病毒）彈狀體（水泡性口炎病毒、狂犬病毒）蝌蚪狀體（噬菌體）,球狀,腺病毒,SARSCOV,絲狀,新分離的流感病毒,煙草花葉病毒,磚形,痘病毒,子彈形,狂犬病毒,蝌蚪狀,噬菌體,病毒的大小,測量單位為NM（NANOMETER）,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌1000NM）,,,,,,,,,牛痘病毒300250NM,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450NM,,,衣原體390NM,A、大腸桿菌噬菌體6595NM,B、腺病毒70NM,C、脊髓灰質(zhì)炎病毒30NM,D、乙腦病毒40NM,E、蛋白分子10NM,F、流感病毒100NM,G、煙草花葉病毒200NM,病毒體的大小,病毒體,病毒體VIRION成熟的、具有感染性的病毒個體。,SARSCOV,病毒的結(jié)構(gòu)與功能,基本結(jié)構(gòu)基因組蛋白衣殼特殊結(jié)構(gòu)包膜觸須,,,,,,基因組GENOME,遺傳物質(zhì)，DNAORRNA病毒遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)，編碼蛋白，控制病毒性狀，決定病毒復制及增殖。,SARSCOV基因組（單股正鏈RNA）,圖片來源MARRA,MA,ETALTHEGENOMICSEQUENCEOFTHESARSASSOCIATEDCORONAVIRUSSCIENCE2003MAY3030013991404,HIV1基因組（單正鏈RNA）HBV基因組（不完全雙鏈環(huán)狀DNA）,,蛋白衣殼CAPSID,包裹或鑲嵌在病毒核酸外面，由病毒基因組編碼的蛋白質(zhì)。保護核酸免受外界環(huán)境因素影響，同時有其特定的病毒生物學特性。如細胞親嗜性，致病性，抗原性，毒性等。,病毒衣殼的對稱性,病毒衣殼的結(jié)構(gòu)特點，就是其排列的對稱性。立體對稱螺旋對稱復合對稱,立體對稱,二十面體,五鄰體,六鄰體,,,螺旋對稱,復合對稱,,包膜ENVELOP,包裹在病毒核殼外的膜狀結(jié)構(gòu)，由脂質(zhì)和糖蛋白組成。脂質(zhì)細胞親嗜性，決定病毒的特定侵害部位。糖蛋白吸附，結(jié)合細胞受體，介導細胞融合，特殊功能，如流感病毒的HA，NA。,有包膜病毒,CALIFORNIAENCEPHALITISVIRUSCORONAVIRUSCYTOMEGALOVIRUSCMVEASTERNEQUINEENCEPHALITISVIRUSEEEVEPSTEINBARRVIRUSEBVHANTAVIRUSHEPATITISBVIRUSHBVHEPATITISCVIRUSHCVHEPATITISDELTAVIRUSHDVHERPESSIMPLEXVIRUS1HHV1ROTAVIRUSRUBELLAVIRUSSAINTLOUISENCEPHALITISVIRUSSMALLPOXVIRUSVARIOLAVACCINIAVIRUS,HERPESSIMPLEXVIRUS2HHV2HUMANIMMUNODEFICIENCYVIRUSHIVHUMANTLYMPHOTROPHICVIRUSHTLVINFLUENZAVIRUSFLUVIRUSMOLLUSCUMCONTAGIOSUMPAPILLOMAVIRUSHPVPOLIOVIRUSRHINOVIRUSVARICELLAZOSTERVIRUSHHV3VENEZUELANEQUINEENCEPHALVIRVEEVWESTERNEQUINEENCEPHALITISVIRUSWEEVYELLOWFEVERVIRUS,無包膜病毒,ADENOASSOCIATEDVIRUSAAVADENOVIRUSPARVOVIRUSB19COXSACKIEVIRUS–ACOXSACKIEVIRUS–BECHOVIRUSHEPATITISAVIRUSHAVHEPATITISEVIRUSHEVNORWALKVIRUS,,觸須ANTENNA,,腺病毒的觸須可凝聚和毒害宿主細胞。,病毒的化學組成,核酸DNA或RNA，決定病毒的感染性，復制特性，遺傳性蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，保護病毒核酸，參與病毒感染過程，抗原性，構(gòu)成病毒的酶，毒素作用糖類，脂類包膜成分，抗原性，毒性，信號傳導,病毒的分類,核酸類型DNA病毒RNA病毒結(jié)構(gòu)特點雙鏈單鏈正鏈負鏈有包膜無包膜,病毒的分類,傳播方式和感染部位蟲媒病毒腸道病毒呼吸道病毒肝炎病毒性傳播病毒,亞病毒,亞病毒比病毒更小，更簡單的病毒治病因子。衛(wèi)星病毒單鏈RNA（擬病毒）亞病毒類病毒單鏈環(huán)狀RNA分子朊病毒蛋白質(zhì),,病毒與細菌的比較,課堂作業(yè)疾病與病原體,1關(guān)于熱原質(zhì)，錯誤的描述有A本質(zhì)是脂多糖B通過高壓蒸汽滅菌（121℃20MIN）可以破壞C主要由革蘭陰性菌產(chǎn)生D是細菌的合成代謝產(chǎn)物E采用高溫干烤可以破壞2細菌缺乏下列哪一種結(jié)構(gòu)仍可存活A細胞壁B細胞膜C細胞質(zhì)D核質(zhì)E以上均可3名詞解釋HOSPITALACQUIREDINFECTION4名詞解釋PHAGE5簡答正常菌群什么情況下會變成條件致病菌6問答細菌的毒力包括哪些,第二章,病毒的復制與變異病毒的培養(yǎng),病毒的復制,病毒借助宿主細胞提供原料和能量，完成自我復制，產(chǎn)生子代病毒。即病毒的增殖。病毒的復制步驟（復制周期）可大致分為吸附ADSORPTION穿入PENETRATION脫殼UNCOATING生物合成BIOSYNTHESIS裝配ASSEMBLY釋放RELEASE,1吸附病毒表面蛋白與宿主細胞表面受體特異性結(jié)合。,包膜糖蛋白或衣殼蛋白與細胞表面受體特異性結(jié)合，決定了病毒嗜組織特異性。,2穿入包膜融合，病毒胞飲,,3脫殼,宿主細胞溶酶體酶破壞病毒衣殼，釋放病毒核酸,4生物合成,復制病毒核酸，轉(zhuǎn)錄MRNA，翻譯病毒蛋白質(zhì)。此過程不存在病毒體，只有病毒元件，稱為隱蔽期。DNA病毒DNA復制，合成蛋白質(zhì)RNA病毒/鏈雙鏈復制中間體逆轉(zhuǎn)錄病毒逆轉(zhuǎn)錄為DNA，整合至宿主染色體,逆轉(zhuǎn)錄,逆轉(zhuǎn)錄REVERSETRANSCRIPTION以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導下的DNA合成。,HIV逆轉(zhuǎn)錄過程,HIV逆轉(zhuǎn)錄酶活性RNA依賴的DNA聚合酶活性RNASEH活性DNA依賴的DNA聚合酶活性但沒有3’?5’外切酶活性（無糾錯功能，突變率高）,病毒基因組整合至宿主細胞染色體,HIV整合酶活性DNA外切酶活性雙鏈內(nèi)切酶活性連接酶活性,,裝配病毒核殼蛋白與核酸包裹，形成病毒體釋放無包膜病毒裂解細胞，子代病毒釋放有包膜病毒通過出芽方式，釋放子代病毒。帶走細胞核膜或細胞質(zhì)膜，作為自身包膜成分。,病毒生長曲線,,,請觀看HIV1病毒復制周期FLASH，注意尋找病毒復制步驟。,,,病毒的異常增殖,頓挫感染ABORTIVEINFECTION缺損病毒DEFECTIVEVIRUS病毒干擾VIRALINTERFERENCE,病毒的變異,病毒變異類型突變基因重組表型重組,,,,,突變,突變的本質(zhì)突變類型條件致死性突變株（溫敏突變株）缺陷型干擾突變株宿主范圍突變株耐藥突變株突變株與變異株概念,,基因重組,兩個病毒基因組之間發(fā)生核酸水平上的互換和重新組合，形成兼有兩親代病毒特性的子代病毒。此過程為基因重組。重組時核酸分子斷裂，交叉連接，引起核酸分子內(nèi)部重新排列。分節(jié)段的RNA病毒基因組之間，兩個病毒株交換基因片段，稱為重配。,,表型重組,兩種病毒感染同一細胞時，各自產(chǎn)生不同的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，在子代病毒裝配時，出現(xiàn)互換衣殼和包膜蛋白時，表型會發(fā)生混合和交換。,,人工定向變異,改變宿主親嗜性冷適應株或溫度敏感株基因重組基因改造突變,病毒的抵抗力,物理因素化學因素,病毒的培養(yǎng),易感動物、雞胚或易感細胞,CPE（CYTOPATHICEFFECT）,D0,D15,D8,D5,D4,D3,D2,D1,D16,,,,,,,,,思考題,什么是病毒病毒有那些特點簡述病毒的基本結(jié)構(gòu)。以HBV病毒為例，試述病毒的復制周期。解釋病毒的干擾現(xiàn)象、缺陷病毒、頓挫感染、亞病毒、朊粒。,THEEND,

簡介：,第三章病毒和亞病毒,第三章病毒與亞病毒,第一節(jié)病毒第二節(jié)亞病毒第三節(jié)病毒與實踐,第一節(jié)病毒,概述病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)病毒的復制病毒的溶原性病毒對理化因素抵抗力,一、病毒的特點和定義,第一節(jié)概述,1、特點,1）不具有細胞結(jié)構(gòu)，具有一般化學大分子的特征。,2）一種病毒的毒粒內(nèi)只含有一種核酸，DNA或者RNA。,3）大部分病毒沒有酶或酶系極不完全，不含催化能量代謝的酶，不能進行獨立的代謝作用。,4）嚴格的活細胞內(nèi)寄生，沒有自身的核糖體，沒有個體生長，也不進行二均分裂，必須依賴宿主細胞進行自身的核酸復制，形成子代。,5）個體微小，在電子顯微鏡下才能看見。,6）對大多數(shù)抗生素不敏感，對干擾素敏感。,例如一些簡單的病毒僅由核酸和蛋白質(zhì)外殼（COAT）構(gòu)成，故可把它們視為核蛋白分子。,朊病毒甚至僅由蛋白質(zhì)構(gòu)成,病毒感染敏感宿主細胞后，病毒核酸進入細胞，通過其復制與表達產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（ASSEMBLY）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復制（REPLICATION）。,第一節(jié)概述,1、特點,一、病毒的特點和定義,病毒是一類既具有化學大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細胞外的感染性顆粒形式，又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨特生物類群。,,超顯微的、沒有細胞結(jié)構(gòu)的、專性活細胞內(nèi)寄生的實體,第一節(jié)概述,1、特點,一、病毒的特點和定義,單細胞微生物與病毒性質(zhì)的比較,ADNA病毒和RNA病毒中的一部分B利福平可抑制痘病毒復制,第一節(jié)概述,2、定義,一、病毒的特點和定義,迄今仍無一個科學而嚴謹?shù)亩x,病毒為具有獨立于其宿主的進化史的絕對細胞內(nèi)寄生物，它的DNA或RNA基因組被其所編碼的蛋白質(zhì)殼體化（ENCAPSIDATION）。（FIELDS等，1990年）,非細胞生物,,（真）病毒至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分,亞病毒SUBVIRUS,,類病毒（VIROID只含具侵染性的RNA組分擬病毒（VIRUSOID只含有不具侵染性的RNA組分朊病毒（PRION只含蛋白質(zhì),,二病毒的宿主范圍,第一節(jié)概述,病毒幾乎可以感染所有的細胞生物，并具有宿主特異性,,,噬菌體（PHAGE）、植物病毒（PLANTVIRUSES）動物病毒（ANIMALVIRUSES）,三、病毒的培養(yǎng)和純化,第一節(jié)概述,同微生物學其他學科分支一樣，病毒學的進步完全得益于研究方法和技術(shù)手段的發(fā)展。,通過病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學研究和實踐的基本技術(shù)。,1、病毒的培養(yǎng),病毒的培養(yǎng)二元培養(yǎng)物法,四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),噬菌體,,細菌培養(yǎng)物,,培養(yǎng)液,營養(yǎng)瓊脂平板,,細菌培養(yǎng)液變清亮,細菌平板成為殘跡平板,,若是噬菌體標本經(jīng)過適當稀釋再接種細菌平板，經(jīng)過一定時間培養(yǎng)，在細菌菌苔上可形成圓形局部透明區(qū)域，即噬斑（PLAGUE）。,MICROBIOLOGY,雙層平板法,優(yōu)點①彌補玻璃皿底面不平的缺陷②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上③形成的噬菌斑較大，更有利于計數(shù),MICROBIOLOGY,噬菌斑,四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),動物病毒,,,實驗動物,雞胚,多種細胞培養(yǎng),四、病毒的培養(yǎng)和純化,1、病毒的培養(yǎng),植物病毒,,敏感植物葉片,,產(chǎn)生壞死斑，或稱枯斑,蛋白質(zhì)提純方法（鹽析、等電點沉淀、有機溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等）,四、病毒的培養(yǎng)和純化,2、病毒純化,標準,,純化的病毒制備物應保持其感染性,病毒是有感染性的生物體,,病毒具有化學大分子的屬性,,純化的病毒制備物的理化性質(zhì)應具有均一性,方法,,主要化學組成為蛋白質(zhì),,具有一定的大小、形狀和密度,,,差速離心,梯度離心（超速離心）,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),病毒是一類既具有化學大分子屬性，又具有生物體基本特征；既具有細胞外的感染性顆粒形式，又具有細胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨特生物類群。,毒粒（病毒顆粒）病毒的細胞外顆粒形式，也是病毒的感染性形式。,一團能夠自主復制的遺傳物質(zhì),保護遺傳物質(zhì)免遭環(huán)境破壞，并作為將遺傳物質(zhì)從一個宿主細胞傳遞給另一個宿主細胞的載體。,蛋白質(zhì)外殼,包膜,,,,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),一、毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu),1、病毒的大小和形狀,個體小，必需在電鏡下觀察；,不同病毒的毒粒大小差別很大；,毒粒的形狀動物病毒有球狀、卵圓狀、磚形植物病毒有桿狀、絲狀、球狀噬菌體有蝌蚪狀和絲狀,,,,采用各種電鏡技術(shù)觀察毒粒的形態(tài)結(jié)構(gòu),ORFVIRUS口瘡病毒接觸性膿皰皮炎病毒（負染技術(shù)）,EBOLAVIRUS埃博拉病毒（正染技術(shù)）,VACCINIAVIRUS痘苗病毒（投影技術(shù)）,甲型H1N1型流感病毒,SARS病毒,第二節(jié)毒粒的性質(zhì),毒粒的化學組成,毒粒（化學組成）,,核酸；蛋白質(zhì)；脂類；碳水化合物；,,基本化學組成,,病毒顆粒在化學上表現(xiàn)為核蛋白,二、毒粒的化學組成,1、病毒的核酸,核酸是病毒的遺傳物質(zhì)；一種病毒的毒粒只含有一種核酸DNA或是RNA；,病毒核酸,,單鏈DNA（SSDNA，SINGLESTRANDEDDNA）；雙鏈DNA（DSDNA）；單鏈RNA（SSRNA）；雙鏈RNA（DSRNA）；,二、毒粒的化學組成,2、病毒的蛋白質(zhì),病毒蛋白質(zhì),,結(jié)構(gòu)蛋白,非結(jié)構(gòu)蛋白,病毒基因組編碼的，在病毒復制過程中產(chǎn)生并具有一定功能，但并不結(jié)合于毒粒中的蛋白質(zhì)。,構(gòu)成一個形態(tài)成熟的有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì),,,殼體蛋白；包膜蛋白；存在于毒粒中的酶；,二、毒粒的化學組成,2、病毒的蛋白質(zhì),病毒結(jié)構(gòu)蛋白的主要生理功能,1）構(gòu)成蛋白質(zhì)外殼，保護病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破壞；,2）決定病毒感染的特異性，與易感細胞表面存在的受體具特異性親和力，促使病毒粒子的吸附和入侵；,3）決定病毒的抗原性，能刺激機體產(chǎn)生相應的抗體；,4）構(gòu)成毒粒酶，或參與病毒對宿主細胞的入侵（如T4噬菌體的溶菌酶等），或參與病毒復制過程中所需要病毒大分子的合成（如逆轉(zhuǎn)錄酶等）；,一般來說，病毒是不具酶或酶系極不完全的，所以一旦離開宿主就不能獨立進行代謝和繁殖。,第二節(jié)病毒的性質(zhì),2、病毒的殼體結(jié)構(gòu),殼體或衣殼（CAPSID）,包圍著病毒核酸的蛋白質(zhì)外殼，由蛋白質(zhì)亞基按對稱的形式、有規(guī)律地排列而成，是病毒毒粒的基本結(jié)構(gòu)。,殼體結(jié)構(gòu)類型,,螺旋對稱殼體二十面體對稱殼體復合對稱結(jié)構(gòu),螺旋對稱殼體亞基有規(guī)律地沿著中心軸（核酸）呈螺旋排列，進而形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。,二十面體對稱殼體構(gòu)成對稱結(jié)構(gòu)殼體的第二種方式是蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列，進而形成一個封閉的蛋白質(zhì)的鞘。,具有復合對稱結(jié)構(gòu)的典型例子是有尾噬菌體（TAILEDPHAGE）,其殼體由頭部和尾部組成。包裝有病毒核酸的頭部通常呈二十面體對稱，尾部呈螺旋對稱。,一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu),3、病毒的包膜結(jié)構(gòu),病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似，是脂雙層膜。在包膜形成時，細胞膜蛋白被病毒的包糖蛋白取代。刺突（SPIKE）包膜或核衣殼上的突起。,第二節(jié)病毒的性質(zhì),一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu),3、病毒的包膜結(jié)構(gòu),病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸（核心）構(gòu)成的復合物，又稱核衣殼。,核殼（NUCLEOCAPSID）,僅由核衣殼構(gòu)成的病毒顆粒,裸露毒粒（NAKEDVIRION）,如煙草花葉病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒（POLIOVIRUS）等一些簡單的病毒的毒粒。,包膜（ENVELOPE）,有些病毒核衣殼包裹著的一層脂蛋白膜，它是病毒以出芽（BUDDING）方式成熟時，由細胞膜衍生而來的。有維系毒粒結(jié)構(gòu)，保護病毒核殼的作用。特別是病毒的包膜糖蛋白，具有多種生物學活性，是啟動病毒感染所必需的。,有包膜的病毒,,第二節(jié)病毒的性質(zhì),一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu),4、病毒的結(jié)構(gòu)類型,四種主要結(jié)構(gòu)類型,,裸露的二十面體；裸露的螺旋；有包膜的二十面體；有包膜的螺旋；,有些病毒，如有尾噬菌體、痘病毒等結(jié)構(gòu)更為復雜，不能包括在這些結(jié)構(gòu)類型之內(nèi)。,不同病毒的毒粒結(jié)構(gòu)復雜程度有很大的區(qū)別,3、三類典型形態(tài)的病毒及其代表,二十面體對稱的代表腺病毒,復合對稱的代表T偶數(shù)噬菌體,螺旋對稱的代表煙草花葉病毒TMV,（1）螺旋對稱的代表煙草花葉病毒TOBACOMOSAICVIRUS,TMV,,,有三種類型纖維狀、直桿狀和彎曲桿狀。衣殼形似一中空柱，內(nèi)包核酸，衣殼粒和核酸呈螺旋對稱形排列。由95％衣殼PR和5％SSRNA組成。蛋白質(zhì)衣殼由衣殼粒（2130個）一個緊挨一個地呈螺旋排列而成，SSRNA位于衣殼內(nèi)側(cè)螺旋狀溝中。,（2）二十面體對稱的代表－腺病毒ADENOVIRUS,具有20個面，30條邊和12個頂角。核衣殼由不同數(shù)量的衣殼粒按一定方式排列成對稱體。腺病毒粒子共由252個球形的衣殼粒排列成一個具有廿面的對稱體，線狀DSDNA。噬菌體X174只有12個衣殼粒，最大的廿面體是由1，472個衣殼粒組成的昆蟲病毒粒子。,絕大多數(shù)噬菌體為蝌蚪形，現(xiàn)以ECOLIT4為例，介紹蝌蚪形噬菌體的結(jié)構(gòu),大腸桿菌T4噬菌體構(gòu)造,（3）復合對稱的代表－T偶數(shù)噬菌體,,,95NM,95NM,,65NM,,24環(huán),頸環(huán),,3、病毒的群體形態(tài),包涵體INCLUSIONBODY,噬菌斑PLAQUE,空斑PLAQUE,枯斑LESION,,,病毒的群體形態(tài)有,（1）包涵體（INCLUSIONBODY）,概念感染病毒的宿主細胞內(nèi)，出現(xiàn)在光學顯微鏡下可見的大小、形態(tài)、數(shù)量不等的小體，稱為包涵體。在宿主細胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征，不同的病毒其形成的包涵體具有不同的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、和特性。,包涵體在細胞中的形成部位位于細胞核內(nèi)如包疹病毒位于細胞質(zhì)內(nèi)如狂犬病毒等胞核內(nèi)胞質(zhì)都有麻疹病毒,包涵體（INCLUSIONBODY）,是病毒的聚集體,是病毒的合成部位,是病毒蛋白和與病毒感染有關(guān)的蛋白質(zhì),非病毒性包涵體,由化學因子或細菌感染形成,包涵體的實踐意義病毒鑒定、臨床診斷依據(jù)。,2噬菌斑PLAQUE,,噬菌斑是指在宿主細菌的菌苔上，噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。,應用1、噬菌體定量計數(shù)2、噬菌體的鑒定,空斑和病斑,在動物細胞培養(yǎng)物上的與噬菌斑類似的空斑,稱為病斑因為受腫瘤病毒感染。空斑和病斑用于動物病毒粒子的計數(shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術(shù)。,枯斑植物病毒在植物葉片上形成的群體稱為枯斑。,第三節(jié)病毒的復制,病毒的特點,嚴格細胞內(nèi)寄生物，只能在活細胞內(nèi)繁殖。,毒粒,,宿主細胞,,有繁殖性的病毒基因組,,具有感染性的毒粒消失,病毒基因組復制、表達,,病毒核酸和蛋白質(zhì),裝配形成具有感染性的毒粒,,釋放至細胞外,,,,,原料；能量；生物合成場所；,,第三節(jié)病毒的復制,病毒的復制,病毒感染敏感宿主細胞后，病毒核酸進入細胞，通過其復制與表達產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的病毒組分裝配（ASSEMBLY）成子代毒粒，并以一定方式釋放到細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復制（REPLICATION）。,第三節(jié)病毒的復制,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,1939年，MAXDELBRUCKEMORYELLIS,ECOLI/BACTERIOPAGE,1、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細胞；2、數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清（中和未吸附的噬菌體）；3、將上述混合物大量稀釋，終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細胞；4、保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價（對噬菌體含量進行計數(shù)）；5、以感染時間為橫坐標，病毒的感染效價為縱坐標，繪制出病毒特征性的繁殖曲線；,該實驗標志著分子病毒學、分子生物學和分子遺傳學的建立MAXDELBRUCK因此榮獲1969年NOBELPRIZE,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,噬菌體復制（繁殖）的三個階段（吸附期）；游離的噬菌體吸附到宿主細胞1、潛伏期；從噬菌體吸附到細胞到釋放出新噬菌體的最短時期2、裂解期；隨著菌體不斷破裂，新噬菌體數(shù)目增加，直到最高值3、平穩(wěn)期；,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,,,取培養(yǎng)物直接測定病毒數(shù)量,將培養(yǎng)物過濾去細胞后測定病毒數(shù)量,將細胞裂解后測定病毒的數(shù)量。前期可將培養(yǎng)物先離心去上清以消除未吸附病毒的影響,,裂解量每個受染細胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。其值等于潛伏期受染細胞的數(shù)目除以穩(wěn)定期受染細胞所釋放的全部子代病毒數(shù)目，即等于穩(wěn)定期病毒效價與潛伏期病毒效價之比。,一、病毒的復制周期,2、隱蔽期（ECLIPSEPERIOD）,,在潛伏期的前一段，受染細胞內(nèi)檢測不到感染性病毒，后一階段，感染性病毒在受染細胞內(nèi)的數(shù)量急劇增加。自病毒在受染細胞內(nèi)消失到細胞內(nèi)出現(xiàn)新的感染性病毒的時間為為隱蔽期。,隱蔽期病毒在細胞內(nèi)存在的動力學曲線呈線性函數(shù)，而非指數(shù)關(guān)系，從而證明子代病毒顆粒是由新合成的病毒基因組與蛋白質(zhì)經(jīng)裝配成熟，而不是通過雙分裂方式產(chǎn)生的。,不同病毒的隱蔽期長短不同，例如，DNA動物病毒的隱蔽期為5～20小時，RNA動物病毒為2～10小時。,,一、病毒的復制周期,1、一步生長曲線（ONESTEPGROWTHCURVE）,一步生長曲線是研究病毒復制的一個經(jīng)典試驗，最初是為研究噬菌體的復制而建立，以后推廣到動物病毒和植物病毒的復制研究中。,以適量的病毒接種于標準培養(yǎng)的高濃度的敏感細胞，待病毒吸附后，離心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清處理病毒細胞培養(yǎng)物以建立同步感染，然后繼續(xù)培養(yǎng)并定時取樣測定培養(yǎng)物中的病毒效價，并以感染時間為橫坐標，病毒的感染效價為縱坐標，繪制出病毒特征性的繁殖曲線，即一步生長曲線。,不同病毒的潛伏期長短不同，噬菌體以分鐘計，動物病毒和植物病毒以小時或天計。,潛伏期,噬菌體的裂解量一般為幾十到上百個，植物病毒和動物病毒可達數(shù)百乃至上萬個。,裂解量,一、病毒的復制周期,3、病毒的復制周期,復制周期（REPLICATIVECIRCLE）或稱復制循環(huán),自病毒吸附于細胞開始，到子代病毒從感染細胞釋放到細胞外的病毒復制過程。,①吸附；②侵入；③增殖；（包括病毒基因組的表達與復制）④裝配（成熟）⑤釋放（裂解）；,第三節(jié)病毒的復制,二、病毒感染的起始,1、吸附,毒粒,敏感細胞,隨機碰撞而接觸（靜電引力或氫鍵）,可逆吸附，無特異性（非細胞顆粒也可吸附）,,,病毒表面蛋白與細胞受體的結(jié)合,特異性，不可逆吸附，啟動病毒感染的第一階段,二、病毒感染的起始,1、吸附,病毒吸附蛋白與細胞受體間的結(jié)合力來源于空間結(jié)構(gòu)的互補性，相互間的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范得華力。,不同種系的細胞具有不同病毒的細胞受體，病毒受體的細胞種系特異性決定了病毒的宿主范圍。,二、病毒感染的起始,2、侵入,侵入又稱病毒內(nèi)化，它是一個病毒吸附后幾乎立即發(fā)生，依賴于能量的感染步驟。不同的病毒宿主系統(tǒng)的病毒侵入機制不同,二、病毒感染的起始,2、侵入,有尾噬菌體,注射方式將噬菌體核酸注入細胞,通過尾部刺突固著于細胞；尾部的酶水解細胞壁的肽聚糖，是細胞壁產(chǎn)生小孔；尾鞘收縮，核酸通過中空的尾管壓入胞內(nèi)，蛋白質(zhì)外殼留在胞外；,吸附,尾釘固著,尾鞘收縮,尾管穿入,DNA注入,如果大量噬菌體在短時間內(nèi)吸附于同一細胞上，使細胞壁產(chǎn)生許多小孔，也可引起細胞立即裂解，但并未進行噬菌體的增殖，這種現(xiàn)象稱為自外裂解（LYSISFROMWITHOUT）。,二、病毒感染的起始,2、侵入,植物病毒,通過因人為地或自然的機械損傷所形成的微傷口進入細胞；或者靠攜帶有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆蟲取食將病毒帶入細胞。,植物病毒一旦進入細胞后，增殖產(chǎn)生的子代病毒或病毒核酸可通過病毒編碼的運動蛋白（MOVEMENTPROTEIN）與胞間連絲的相互作用從受染細胞進入鄰近細胞。,二、病毒感染的起始,脫殼,脫殼是病毒侵入后，病毒的包膜和/或殼體除去而釋放出病毒核酸的過程。脫殼是病毒基因組進行功能表達所必需的感染事件。,T偶數(shù)噬菌體脫殼與侵入是一起發(fā)生的,動物病毒存在不同的結(jié)構(gòu)類型和不同的侵入方式，其脫殼過程也較復雜。,第三節(jié)病毒的復制,三、增殖,病毒基因組進入胞內(nèi),,宿主細胞的代謝發(fā)生改變,,病毒利用宿主的生物合成機構(gòu)和場所，使病毒核酸表達和復制，產(chǎn)生大量的病毒蛋白質(zhì)和核酸。,④成熟（裝配）,已合成的各部件進行自行裝配成新的噬菌體的過程。,T偶數(shù)噬菌體裝配過程模式圖,被感染細胞裂解，成熟的子代噬菌體轉(zhuǎn)移到外界。開始新的生活史。,,,⑤裂解（釋放）,,裂解量平均每一宿主細胞裂解后所產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)。,,有囊膜病毒以“出芽”方式釋放,吸附,侵入,早期病毒特異性酶的合成,病毒核酸復制,病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)合成,裝配,釋放,,病毒大分子合成,2、噬菌體效價的測定,效價（噬菌斑形成單位數(shù)、感染中心數(shù)）每ML樣品中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)。,測定方法斑點試驗法、液體稀釋管法、單層平板法、雙層平板法、快速玻片法,,,,,,噬菌斑數(shù)試樣中噬菌體數(shù),雙層平板法,噬菌體與宿主關(guān)系,1、烈性噬菌體凡能引起宿主細胞迅速裂解的噬菌體。2、溫和性噬菌體噬菌體侵染宿主后，并不增殖，裂解，而與宿主DNA結(jié)合，隨宿主DNA復制而復制，此時細胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體，這種噬菌體稱為溫和性噬菌體。含有溫和性噬菌體的細菌稱為溶源性細菌LYSOGENICBACTERIA,第四節(jié)病毒的非增殖性感染,溫和噬菌體的溶源性反應,烈性噬菌體（VIRULENTPHAGE）,感染宿主細胞后能在細胞內(nèi)正常復制并最終殺死細胞，形成裂解循環(huán)（LYTICCYCLE）。,溫和噬菌體或稱溶源性噬菌體（LYSOGENICPHAGE）,感染宿主細胞后不能完成復制循環(huán)，噬菌體基因組長期存在于宿主細胞內(nèi)，沒有成熟噬菌體產(chǎn)生。,這一現(xiàn)象稱做溶源性（LYSOGENY）現(xiàn)象,在大多數(shù)情況下，溫和噬菌體的基因組都整合于宿主染色體中（如Λ噬菌體），亦有少數(shù)是以質(zhì)粒形成存在（如P1噬菌體）。,溫和性噬菌體存在狀態(tài),1）游離具感染性的VIRION；2）前噬菌體（PROPHAGE）附著或整合在宿主染色體上，一道復制；3）營養(yǎng)期噬菌體指導合成。,溫和噬菌體的溶源性反應,整合于細菌染色體或以質(zhì)粒形成存在的溫和噬菌體基因組稱做原噬菌體（PROPHAGE）,在原噬菌體階段，噬菌體的復制被抑制，宿主細胞正常地生長繁殖，而噬菌體基因組與宿主細菌染色體同步復制，并隨細胞分裂而傳遞給子代細胞。,細胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體基因組的細菌稱做溶源性細菌（LYSOGENICBACTERIA）,溶源性細菌經(jīng)自發(fā)裂解或誘發(fā)裂解，進入裂解循環(huán),噬菌體的應用,噬菌體會給人類造成損失，利用微生物進行發(fā)酵的工業(yè)常深受其害。但是，由于噬菌體的某些生物學特性，使其在人類的生產(chǎn)實踐和生物學基礎(chǔ)理論研究中都有一定價值?？筛爬橐韵聨追矫?。,1用于鑒定未知細菌在醫(yī)學上，有些難鑒別的病原菌，利用噬菌體對宿主細胞的高度?；缘拿舾行?，不僅可鑒定到菌種，而且可鑒定到菌型。2用于臨床治療某些傳染性疾病。如果將噬菌體制劑與抗生素或者磺胺藥物配合應用，則效果更好。3檢驗植物病原菌利用噬菌體可以檢驗由種子攜帶的植物病原菌。4測定輻射劑量某些噬菌體如T2對輻射劑量的反應敏感而精確。5噬菌體在分子生物學研究中的作用噬菌體現(xiàn)已成為進行分子生物學研究的較為理想的重要材料。,,,（二）植物病毒,,已知的植物病毒多達700種（1989年），多數(shù)是SSRNA病毒。形態(tài)桿、絲、球狀，一般無包膜。,1619年荷蘭畫師描畫的有病郁金香的畫像。,花葉、黃化或紅化等癥狀,植株發(fā)生矮化，叢枝或畸形等,形成枯斑或壞死等癥狀,植物感染病毒后的主要癥狀,植物黃萎病,,借昆蟲刺吸式口器進入、通過傷口或嫁接進入，再通過胞間連絲或輸導組織迅速向其它部位擴散引起普遍感染。,1、“侵入”方式,,3、核酸的復制和蛋白質(zhì)的合成,2、脫殼植物病毒侵入宿主細胞后才能發(fā)生脫殼。,,增殖過程,4、裝配（成熟）,（三）人類和脊椎動物病毒,在人類與脊椎動物中廣泛寄生著相應的病毒。人類傳染病80％由病毒引起（＞300種），脊椎動物病毒＞900種，許多病毒引起人畜共患病。另一些病毒感染動物后，并不致死宿主細胞，而是引起腫瘤。,種類,DSDNA、SSDNA、DSRNA、SSRNA。衣殼外有的有包膜，有的無包膜，有的包膜上有刺突。,增殖過程,與噬菌體的增殖大致相同，可分為五個連續(xù)步驟1）吸附具高度專一性地吸附于敏感細胞表面的受體。2）侵入以胞飲、包膜溶入細胞膜、特異受體轉(zhuǎn)移等方式侵入敏感細胞內(nèi)。3）脫殼脫去衣殼和包膜。4）生物合成核酸的復制和蛋白質(zhì)的合成。5）裝配和成熟分別合成的核酸和蛋白質(zhì)組合成完整的、新的病毒粒子。6）釋放大量有侵染性的子代病毒。,多角體多數(shù)昆蟲病毒可在宿主細胞內(nèi)形成光鏡下呈多角形的包涵體。直徑一般3ΜM（05～10ΜM），堿溶性蛋白，內(nèi)包裹數(shù)目不等的病毒粒，可在細胞核或細胞質(zhì)內(nèi)形成。功能保護病毒粒免受外界不良環(huán)境的破壞。,（四）昆蟲病毒（無脊椎動物病毒）,已知昆蟲病毒1671種（1990），其中80％以上鱗翅目昆蟲的病原體。,昆蟲病毒的種類,除非包涵體病毒病毒外，可分為,核型多角體病毒NUCLEARPOLYHEDROSISVIRUS,NPV,質(zhì)型多角體病毒CYTOPLASMICPOLYHEDROSISVIRUS,CPY,顆粒體病毒GRANULOSISVIRUS,GV,,昆蟲病毒做為生物農(nóng)藥優(yōu)點,專一性高,毒力大,后效長,使用方便,對人畜安全,無公害,缺點危害經(jīng)濟動物,,,,類病毒VIROID,擬病毒VIRUSOID,朊病毒PRION,第二節(jié)亞病毒,只含核酸或蛋白質(zhì)一種成分的分子病原體。,包括,一、類病毒,只含RNA一種成分，專性活細胞內(nèi)寄生的分子病原體。是寄生于高等生物細胞中一類最小的新的病原體。SSRNA，分子量約5104DA～12104DA，為已知最小病毒分子量的十分之一左右。到目前為止，類病毒只在植物中被發(fā)現(xiàn)。類病毒對各種化學和物理因子的作用都不敏感，對熱以及紫外光和離子輻射有高度抗性。,類病毒VIROID,馬鈴薯紡錘塊莖病的病原體,長50NM棒狀RNA分子,179核苷酸180核苷酸,RNA由,組成,兩半體間有70％堿基以氫鍵方式結(jié)合共形成122個堿基對，27個內(nèi)環(huán)。,VIROIDDISEASESOFPOTATO,二、擬病毒VIRUSOIDS，類類病毒,是包裹在動植物病毒粒子中的類病毒極其微小，僅由裸露的RNA（300～400個核苷酸）或DNA組成。,輔助病毒類病毒“寄生”的真病毒。擬病毒為輔助病毒的“衛(wèi)星”，其復制必須依賴輔助病毒的協(xié)助。擬病毒也可干擾輔助病毒的復制、減輕其對宿主的病害、用于生物防治中。,,,是一類不含核酸的侵染性蛋白質(zhì)分子。小型蛋白質(zhì)顆粒，分子量33104～35104DA,約由250個氨基酸組成。能引起宿主體內(nèi)現(xiàn)成的同類蛋白質(zhì)分子發(fā)生與其相似的構(gòu)象變化而使宿主致病。毒性很強，1G含朊病毒的鼠腦可感染1億只小鼠。,三、朊病毒,引起的疾病羊搔癢病、瘋牛病、瘋羊病、克雅氏病。,朊病毒侵入人體大腦的過程借食物進入消化道，再經(jīng)淋巴系統(tǒng)侵入大腦。,MICROBIOLOGY,朊病毒（PRION，VIRINO）,朊病毒有哪些特點首先，它沒有核酸，能使正常的蛋白質(zhì)由良性轉(zhuǎn)為惡性，由沒有感染性轉(zhuǎn)化為感染性；其次，它沒有病毒的形態(tài)，是纖維狀的東西；第三，它對所有殺滅病毒的物理化學因素均有抵抗力，現(xiàn)在的消毒方法都無用，只有在136℃高溫和兩個小時的高壓下才能滅活；第四，病毒潛伏期長，從感染到發(fā)病平均28年，一旦出現(xiàn)癥狀半年到一年100％死亡；第五，診斷困難，正常的人與動物細胞內(nèi)都有朊蛋白存在，不明原因作用下它的立體結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，變成有傳染性的蛋白，患者體內(nèi)不產(chǎn)生免疫反應和抗體，因此無法監(jiān)測。,與真病毒的主要區(qū)別,（1）在電鏡下，朊病毒呈淀粉樣顆粒狀，成叢排列，每叢大小和形狀不一；（2）無核酸成分；（3）無免疫原性；（4）由宿主細胞內(nèi)的基因編碼；（5）抗逆性強，能耐殺菌劑（甲醛）和高溫（120～130℃處理4H后仍具感染性）。,人的庫魯病KURU、克雅氏病CREUTZFELDTJAKOBDISEASE,CJD等,羊搔癢癥SCRAPIE,牛海綿狀腦病SPONGIFORMENCEPHALOPATHY,第三節(jié)病毒與實踐,病毒與實踐的關(guān)系極密切，由病毒引起

簡介：項目名稱細胞抗病毒先天免疫相關(guān)蛋白的生物學細胞抗病毒先天免疫相關(guān)蛋白的生物學研究研究首席科學家郭德銀郭德銀武漢大學武漢大學起止年限20102010年1月20142014年8月依托部門教育部教育部作啟動機體的抗病毒免疫，為病毒新型疫苗的合理設計提供理論基礎(chǔ)。具體研究內(nèi)容包括1）RLR信號通路分子及其相關(guān)蛋白的篩選、克隆和相互作用研究主要采用酵母雙雜交和蛋白芯片技術(shù)，篩選、克隆相關(guān)的新基因和蛋白。從信號通路及調(diào)節(jié)分子的相互作用及其機理著手，闡明RLR信號通路的傳遞以及調(diào)節(jié)的機制2）這些新發(fā)現(xiàn)蛋白分子在抗病毒細胞免疫調(diào)節(jié)中的作用研究著重闡明信號通路分子及調(diào)節(jié)分子在病毒感染和抗病毒先天免疫中的作用，以及如何通過信號通路的調(diào)節(jié)發(fā)揮作用。3）抗病毒信號通路的交叉和關(guān)聯(lián)研究主要研究RLR和TLR在病毒感染時信號通路交叉和影響，研究這種關(guān)聯(lián)在病毒感染和抗病毒先天免疫中的意義。4）抗病毒先天免疫相關(guān)分子調(diào)控樹突狀細胞病毒抗原遞呈的機制研究研究誘導樹突狀細胞成熟的MYD88依賴型信號通路和MYD88非依賴型TRIF依賴型信號通路調(diào)控病毒蛋白抗原遞呈的分子機制，胞內(nèi)的RLR信號通路對樹突狀細胞抗原遞呈途徑的影響，鑒定RLR信號通路參與調(diào)控樹突狀細胞病毒抗原遞呈相關(guān)囊泡轉(zhuǎn)運的相關(guān)分子，研究病毒編碼蛋白對抗原遞呈途徑的影響與其免疫逃逸的關(guān)系。5）抗病毒先天免疫相關(guān)分子調(diào)控病毒獲得性免疫應答機制研究采用單純皰疹病毒、鼠肝炎病毒等感染動物模型，通過產(chǎn)生樹突狀細胞特異性KNOCKINDOWN的轉(zhuǎn)基因小鼠，研究不同抗原遞呈途徑與病毒免疫應答的關(guān)系，揭示抗病毒先天免疫相關(guān)分子調(diào)控病毒獲得性免疫應答與病毒免疫逃逸的機制。2病毒感染導致的宿主細胞蛋白的翻譯后修飾與功能研究病毒感染導致的宿主細胞蛋白的翻譯后修飾與功能研究許多病毒感染依賴宿主脂筏，膽固醇代謝途徑中的蛋白組份也被病毒修飾利用。我們將采用蛋白組學方法，研究病毒對宿主脂筏以及膽固醇代謝途徑的影響，特別針對HCV病毒感染，篩選潛在的能夠被HCV絲氨酸蛋白酶NS34A切割的宿主蛋白并研究其在HCV感染過程中的作用。已有的研究表明，蛋白質(zhì)的磷酸化去磷酸化，泛素化去泛素化，SUMO化去SUMO化修飾在調(diào)節(jié)病毒感染和復制、細胞抗病毒先天免疫反應等過程中具有重要作用。我們將用蛋白質(zhì)組學方法系統(tǒng)的篩選調(diào)節(jié)病毒感染誘導I型干擾素表達的蛋白質(zhì)修飾酶和去修飾酶基因，比較病毒感染前后宿主細胞蛋白

簡介：疾病學基礎(chǔ)皰疹病毒,演講人組員周林燕賈旭艷王夢麗陸夢瑄,學習要點一、皰疹病毒簡介二、發(fā)現(xiàn)與描述三、基因與結(jié)構(gòu)四、病毒復制五、致病作用與臨床表現(xiàn),皰疹病毒簡介,與人類有關(guān)的皰疹病毒稱為人類皰疹病毒（HUMANHERPESVIRUS,HHV）,包括單純皰疹病毒I型、II型、水痘－帶狀皰疹病毒、巨細胞病毒、EB病毒、人類皰疹病毒6、7、8型等。皰疹病毒（HERPESVIRUSES）是一類中等大小、結(jié)構(gòu)相似、有包膜的雙鏈DNA病毒?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)近一百種，根據(jù)其理化性質(zhì)分為Α、Β、Γ三個亞科。,2024/3/27,發(fā)現(xiàn)與描述,“HERPES”一詞源于希臘語“HERPEIN”。1913年，德國眼科醫(yī)生WILHELMGRATER證實了皰疹具有傳染性。1925年，美國病毒學家ERNESTGOODPASTURE論證了皰疹病原體可經(jīng)神經(jīng)傳播。1939年澳大利亞病毒學家諾貝爾獎獲得者FRANKLACFARLANEBURNET提出皰疹病原體的潛伏感染學說。1954年另一諾貝爾獎獲得者THOMASWELLER成功分離了水痘帶狀皰疹病毒。1964年EPSTEIN及其同事成功分離了EB病毒。1968年，GERTRUDEHENLE和WERNERHELEN成功分離了單純皰疹病毒。,2024/3/27,基因與結(jié)構(gòu),皰疹病毒科成員的基因組均為線性雙鏈DNA，其大小在120230KB之間，含基因60120個。皰疹病毒科成員在形態(tài)上具有較高相似性電鏡下，皰疹病毒呈中等大小，有包膜的不規(guī)則球形，直徑120200NM。在結(jié)構(gòu)上由四部分組成，即核心，衣殼，皮層和包膜。,2024/3/27,皰疹病毒模式圖,2024/3/27,病毒復制,吸附↓穿入與脫殼↓生物合成↓裝配與成熟↓釋放,2024/3/27,致病作用與臨床表現(xiàn),水痘帶狀皰疹病毒致病,單純皰疹病毒致病,人巨細胞病毒致病,2024/3/27,單純皰疹病毒致病,人類單純皰疹病毒分為2個血清型HSV1HSV2,2024/3/27,HSV1原發(fā)感染多發(fā)生于6個月至2歲的嬰兒，多為隱性感染；顯性感染常表現(xiàn)為皰疹性齦口炎，皰疹性角膜炎等。主要潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)和頸上神經(jīng)節(jié)細胞內(nèi)。,HSV1,2024/3/27,HSV2原發(fā)感染多為生殖器皰疹，可經(jīng)性接觸傳播。主要潛伏于骶神經(jīng)節(jié)。HSV2可能引起宮頸癌,HSV2,HSV2,2024/3/27,原發(fā)感染多發(fā)生于39歲兒童，表現(xiàn)為水痘，再發(fā)感染多見于成人。原發(fā)感染后，病毒潛伏于脊髓后根神經(jīng)節(jié)或顱神經(jīng)的感覺神經(jīng)節(jié)。以后如機體免疫力下降，病毒被激活，病毒沿神經(jīng)軸突下行到所支配的皮膚細胞內(nèi)增殖，發(fā)生皰疹，排列呈帶狀，稱帶狀皰疹發(fā)生于身體的一側(cè)，以軀干中線為界，好發(fā)部位為胸、腹和面部,水痘帶狀皰疹病毒致病,2024/3/27,水痘,2024/3/27,帶狀皰疹,2024/3/27,人巨細胞病毒（HCMV）為最常見的人類伴隨病毒，原發(fā)感染在2歲左右，呈隱形感染。再發(fā)感染多見于免疫缺陷人群和大量病毒輸入人群，表現(xiàn)為單核細胞增多癥?？梢鹁藜毎《痉窝?，巨細胞病毒肝炎等。HCMV潛伏部位可能為唾液腺，乳腺，腎臟，外周血單核細胞和淋巴細胞。母親妊娠期出現(xiàn)原發(fā)或再發(fā)感染，可引起胎兒宮內(nèi)感染，胎兒表現(xiàn)為肝脾腫大、黃疸、血小板減少性紫癜、血溶性貧血；極少數(shù)呈先天性畸形；亦可引起流產(chǎn)，死胎。HCMV感染與冠狀動脈粥樣硬化、慢性疲勞綜合癥、復發(fā)性口腔潰瘍等多種疾病有一定關(guān)聯(lián)。,人巨細胞病毒致病,2024/3/27,檢測與防治,1皰疹病毒的微生物檢測皰疹病毒感染可造成感染細胞的明顯病變，故經(jīng)典的皰疹病毒檢測多采取感染部位的組織標本染色鏡檢。為配合圍產(chǎn)期醫(yī)學檢查，目前對潛伏感染者多采取血清學檢測，臨床上對單純皰疹病毒,人巨細胞病毒可采取病毒核酸檢測。2皰疹病毒的防治除水痘帶狀皰疹病毒減毒活疫苗已廣泛使用外，單純皰疹病毒，人巨細胞病毒疫苗尚在研制中。,,謝謝觀賞,2024/3/27,

簡介：中西醫(yī)結(jié)合肝病學,葉放YEFANG973163COMHTTP//YEFANG973BLOG163COM國醫(yī)大師“周仲瑛名醫(yī)工作室”國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)肝膽病重點學科,第二講病毒性肝炎（五種病毒性肝炎概況）,教學日歷,,,4,4,病毒性肝炎在我國危害極大其中，乙肝是危害全球健康的問題,有35億慢性攜帶者最高可達25的人將死于乙肝或其相關(guān)并發(fā)癥每年有100萬死于HBV感染,是全球范圍內(nèi)第9位死因,其它地區(qū),亞太地區(qū)75,至今為止仍然沒有任何一種藥物可以真正清除病毒或阻斷肝病進展；中醫(yī)藥在防治肝病過程中的各個環(huán)節(jié)都能發(fā)揮著一定的作用。,在各類傳染病中發(fā)病率最高；我國HBV感染者逾12億，10。乙型肝炎患者近3千萬每年近30萬人死于肝炎或肝癌,全世界,全中國,,,5,5,病毒性肝炎總論,轉(zhuǎn)氨酶升高患肝炎需要隔離,,,6,6,肝炎，是指一類由各種病因引起的肝臟炎癥病變。其病因復雜多樣,病毒性肝炎已知有五種酒精性肝病脂肪性肝?。慌R床十分常見藥物性肝炎抗癆或抗菌藥、免疫抑制劑、內(nèi)分泌治療藥物等其他病原體感染鉤端螺旋體病、肝結(jié)核等自身免疫性肝炎遺傳代謝性疾病工業(yè)化學物中毒四氯化碳、二甲苯、二惡英等其他肝臟缺血、膽道疾患、多臟衰等,7,7,病毒性肝炎VIRALHEPATITIS的分類,黃熱病毒（YFV）EB病毒（EBV）巨細胞病毒（CMV）單純皰疹病毒（HSV）風疹病毒RV,能引起肝功能損害的病毒有很多,它們均非嗜肝病毒,所致肝損害為繼發(fā)性；不是以肝臟損害為主,,病毒分型,正式命名的5種肝炎甲型肝炎病毒HEPATITISAVIRUSHAV甲型肝炎乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUSHBV乙型肝炎丙型肝炎病毒HEPATITISCVIRUSHCV丙型肝炎丁型肝炎病毒HEPATITISDVIRUSHDV丁型肝炎戊型肝炎病毒HEPATITISEVIRUSHEV戊型肝炎己肝病毒HFV現(xiàn)已被否定庚肝病毒HGV/GBVC、TT病毒和SEN病毒不屬于肝炎病毒,,,,,,根據(jù)傳播途徑的不同分類糞口途徑甲型和戊型肝炎季節(jié)性，可引起暴發(fā)或流行，無慢性肝炎腸道外傳播即輸血注射及母嬰傳播乙、丙和丁型肝炎，多為散發(fā)，無季節(jié)性，有慢性化傾向，部分病例可發(fā)展成肝硬化和肝細胞癌HCC,危害世界范圍流行，我國是高發(fā)區(qū)，尤其甲肝和乙肝,1992～1995年全國病毒性肝炎血清流行病學調(diào)查,,據(jù)衛(wèi)生部2003～2005年全國法定報告?zhèn)魅静∫咔楦窝卓偘l(fā)病率和死亡率有不同程度發(fā)病率仍位于法定報告?zhèn)魅静〉牡谝弧⒍?，死亡率位于第三位，其中甲肝發(fā)病率乙肝發(fā)病率丙肝發(fā)病率戊肝發(fā)病率呈波動狀態(tài)甲、乙肝疫苗接種面積防制力度,,,,,,,,,,,甲型肝炎病毒HAV以肝臟損害為主的急性腸道傳染病以糞口途徑傳播為主，可形成暴發(fā)或流行，主要感染對象為兒童及青少年,,第一節(jié)甲型肝炎,第一部分五種病毒性肝炎,13,13,一、甲型病毒性肝炎,甲肝,HAV為單股正鏈RNA病毒，歸類于小RNA病毒科肝炎病毒屬,●病毒形態(tài),1973年，F(xiàn)EINSTONE等采用免疫電鏡首次觀察到該病毒。,病毒直徑27NM，無囊膜，為正20面體球形顆粒,,（一）病原學,7,500個左右核苷酸,甲肝,HAV體外較一般腸道病毒抵抗力強，低溫下可長期存活。在淡水、海水、污水、泥沙毛蚶等水產(chǎn)品中；,HAV傳染性高于HEV，發(fā)病有家庭聚集現(xiàn)象,●抵抗力,化學消毒劑抵抗力強于腸道病毒屬病毒余氯10～15PPM30MIN3福爾馬林5MIN均可滅活70乙醇3MIN部分滅活不耐受冷凍干燥，對紫外線敏感,溫度60℃1H仍可存活10～12H部分滅活，100℃5MIN完全滅活；4℃其抗原性和組織培養(yǎng)活性可保持1年20℃可存活多年并保持傳染性,,15,15,●病毒分型和抗原抗體系統(tǒng),HAV只有有一個血清型HAV只有一個抗原抗體系統(tǒng)抗HAVIGM是診斷HAV急性感染的指標抗HAVIGG是保護性抗體，是產(chǎn)生免疫力的標志,動物模型黑猩猩、狨猴及獼猴等靈長類動物易感，且可傳代細胞培養(yǎng)HAV生長緩慢，接種后約需4周才可檢出抗原,16,16,甲肝,（二）流行病學,●傳染源主要為急性患者和亞臨床、隱性感染者,,靈長類動物黑猩猩、狨猴及獼猴等作為傳染源的意義不大,17,17,甲肝,●傳播途徑,糞口途徑糞便排出病毒，經(jīng)口腔攝入而感染,散發(fā)流行以日常生活接觸為主，臨床較多見,暴發(fā)流行水源或食物污染，尤其是生食毛蚶、蛤蠣、牡蠣等水產(chǎn)品最易引起。,,HAV易通過食物和水在人群中傳播,經(jīng)食物傳播經(jīng)食用受污染的貝殼類水產(chǎn)品、經(jīng)產(chǎn)、供、銷環(huán)節(jié)污染的食物經(jīng)水傳播衛(wèi)生條件差的國家和地區(qū)特點發(fā)病者多飲用同一水源，病例分布與供水范圍一致日常生活接觸傳播,我國甲肝高流行區(qū)呈北高南低、西高東低、農(nóng)村高城市低,18,18,●易感人群及免疫力,我國40歲以上成人90～98抗HAVIGG陽性,6個月以內(nèi)嬰兒,母親,抗體,,普遍易感，感染后可獲得持久的免疫力，再次感染極為罕見嬰幼、兒童時期甲肝的易感性最高人群易感性影響甲肝流行的關(guān)鍵因素接種甲肝疫苗降低人群易感性的重要措施,19,19,甲肝,（三）發(fā)病機理,以往認為HAV對肝細胞有直接殺傷作用。,目前觀點HAV導致肝細胞損傷的機理以宿主免疫反應為主,20,20,甲肝,（四）臨床特點,1潛伏期2～6周,,2流行季節(jié),●各型病毒性肝炎散發(fā)病例均無明顯季節(jié)性。,●甲肝、戊肝的暴發(fā)流行多見與秋冬季節(jié)或雨水多、洪水泛濫的季節(jié)。,3臨床特點,●HAV隱性感染多于顯性感染,●臨床病例無黃疸型多于黃疸型,,21,21,●甲肝預后良好,,甲肝,（五）預后,●無慢性化傾向,●無演化成肝癌的危險,●發(fā)生肝衰竭者罕見,預防策略與措施,管理傳染源早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早報告、早隔離、早治療切斷傳播途徑保護易感人群主動免疫甲肝減毒活疫苗被動免疫甲肝免疫球蛋白,第二節(jié)戊型肝炎,戊型肝炎病毒HEV糞口途徑傳播的以肝臟損害為主的急性傳染病,,24,24,戊肝,戊肝原稱為“腸道傳播的非甲非乙型病毒性肝炎”,●HEV為單股線狀正鏈RNA病毒，現(xiàn)暫歸類于嵌杯病毒科。,●流行病學特征、發(fā)病機理及臨床表現(xiàn)與甲肝類似，不轉(zhuǎn)為慢性,●抗HEV,,,抗HEVIGM是近期內(nèi)HEV感染的標志，有早期診斷價值,抗HEVIGGHEV感染后可長期存在，可用于流行病學調(diào)查,病原學,嵌杯樣病毒科結(jié)構(gòu)無包膜、直徑27～38NM、20面體表面有鋸齒狀刻缺和突起的圓球狀顆粒實心和空心兩種顆粒單股正鏈RNA7,200個核苷酸,3個開放讀碼框架抵抗力不穩(wěn)定，對高鹽、氯化銫和氯仿敏感反復凍融易降解4～8℃、3～5D病毒滴度長期保存液氮/85℃超低溫冰箱內(nèi),,,流行過程,傳染源潛伏末期和急性期病人臨床型、亞臨床型和隱性感染傳播途徑經(jīng)糞口途徑傳播人群易感性人對HEV普遍易感抗體抗HEV中和病毒,流行特征,地區(qū)分布世界性分布亞、非、中美洲的發(fā)展中國家我國北方南方、東部西部、農(nóng)村城市時間分布明顯的季節(jié)性，多見于雨季或洪水后人群分布多青壯年，高發(fā)年齡在15～35歲,一般男性患病女性孕產(chǎn)婦罹患率病死率,,,28,28,戊肝,臨床特點,①HEV體外抵抗力及傳染性較HAV低，發(fā)病無家庭集聚現(xiàn)象；暴發(fā)流行較多見,②急性黃疸型感染的發(fā)生率高，且黃疸較深；,③臨床癥狀及肝損害程度較重；,④老年人及孕婦感染后易發(fā)展為重型肝炎，病死率高,29,29,,與甲型肝炎比較1成人感染率比甲型肝炎高；兒童感染率比甲型肝炎低；2淤膽型肝炎更多見；3病情恢復比甲型肝炎慢；4孕婦患戊肝后易發(fā)生重型肝炎，病死率高；5患病后無終身免疫作用6尚無預防性疫苗可供使用,戊肝,30,30,二、乙型病毒性肝炎,乙肝,（一）病原學,HBV屬嗜肝DNA病毒,土撥鼠肝炎病毒（WHV）地松鼠肝炎病毒GSHV鴨乙型肝炎病毒（DHBV）蒼鷺乙型肝炎病毒（HHBV）,,,31,31,1HBV形態(tài)結(jié)構(gòu),大球形顆粒（DANE顆粒）,小球形顆粒,管形顆粒,,,,32,32,DANE顆粒（完整的病毒）形態(tài),HBSAG,HBCAG,HBVDNA,DNAP,,,,,,,,,（外膜蛋白）,（核衣殼蛋白）,33,33,●小球形顆粒直徑22NM數(shù)量最多●管形顆粒2240～400NM兩者均為過剩的病毒外殼，僅含HBSAG，無感染性。,“空心湯團”,,2HBV基因組結(jié)構(gòu),PRES1,PRES2,S,P,C,PREC,X,HBVDNA32KB,乙肝,PRES1PRES1蛋白PRES2PRES2蛋白SHBSAGPRECHBEAGCHBCAGPDNAPXHBXAG,,,,,,,,編碼,,,,,,,HBSAG,PRES2,PRES1,,35,35,乙肝,3HBV血清標志物及其臨床意義,（1）HBSAG,●出現(xiàn)時間HBV感染后2～6個月（潛伏期）,●持續(xù)時間,,,,曾用名HA、澳抗,急性自限性肝炎6個月內(nèi)可消失,慢性肝炎或慢性HBSAG攜帶者可持續(xù)陽性,現(xiàn)在認為HBSAG與CCCDNA滴度呈正相關(guān)，是判斷抗經(jīng)病毒HBVDNA轉(zhuǎn)陰后，肝炎是否復發(fā)的主要指標,36,36,●HBSAG有抗原性而無傳染性,,HBV,S基因,,整合,肝細胞DNA,,持續(xù)表達,“空心湯團”,HBSAG,乙肝,,●HBSAG的亞型,ADR,ADW,AYR,AYW,長江以北,長江以南,新疆、西藏、內(nèi)蒙等,,,,,,37,37,乙肝,（2）抗HBS,●出現(xiàn)時間急性感染后期或HBSAG消失后,（空白期或窗口期）,●抗HBS為保護性抗體（中和抗體）,其出現(xiàn)標志著HBV感染進入恢復期,●抗HBS對相同HBSAG亞型的HBV再感染有免疫力，但對不同亞型的HBV保護力不完全。,38,38,乙肝,（3）HBEAG,HBEAG是HBCAG的降解產(chǎn)物,,,HBVC基因,前C區(qū),C區(qū),,,前C/C蛋白,HBEAG,HBCAG,表達,,,切割、加工,,分泌到細胞外,,HBEAG只存在于血清中,●HBEAG是病毒復制和傳染性的標志,血清HBEAG陽性者中，HBVDNA陽性率為92左右,39,39,乙肝,（4）抗HBE,●出現(xiàn)時間隨著HBEAG的消失而出現(xiàn),●抗HBE的出現(xiàn)標志著病毒復制減少、傳染性降低,,,抗HBE陽性者中，163～30左右的患者HBVDNA仍陽性可能與前C基因變異有關(guān),,易加重病情、易演變?yōu)楦斡不?Α干擾素療效亦較差,,,,40,40,（5）HBCAG,乙肝,●HBCAG主要存在于HBV感染的肝細胞內(nèi)或DANE顆粒核心中，到血液中即被降解為HBEAG。,一般血清學方法檢測不到HBCAG，而只能檢測到抗HBC,,（6）抗HBC,1、抗HBCIGM是HBV近期感染或慢性感染者病毒活動標志,2、抗HBCIGG凡“有過”HBV感染者均可陽性,HBCAG的免疫原性最強,持續(xù)時間6～18個月,,可終身陽性,,41,41,（6）HBVDNA,是病毒復制和有傳染性最直接的證據(jù),檢測方法斑點雜交法、PCR法,（7）DNAP（DNA多聚酶）是逆轉(zhuǎn)錄酶也是直接反應病毒復制的指標之一,乙肝,（8）HBXAG也可作為病毒復制的標志,HBXAG具有反向激活作用，可調(diào)控病毒基因轉(zhuǎn)錄水平，并對宿主癌基因可能有激活作用。,42,42,乙肝,●三個概念,①“兩對半”,②血清抗原抗體轉(zhuǎn)換率HBEAG抗HBE,,③“轉(zhuǎn)陰”,常用指標血清HBEAG抗原抗體轉(zhuǎn)換率HBVDNA陰轉(zhuǎn)率,43,43,乙肝,（二）流行病學,1傳染源主要為急、慢性乙肝患者或病毒攜帶者,,2傳播途徑,水平傳播,最主要途徑是注射或粘膜接觸含HBV的血液及分泌物,性傳播不少見。,密切接觸有可能,飲食傳播可能性較小。,44,44,乙肝,垂直傳播,主要途徑圍產(chǎn)期（新生兒皮膚、粘膜有破損而接觸母血）和產(chǎn)后密切接觸,經(jīng)胎盤及生殖細胞傳播有可能,,醫(yī)源性傳播,輸血或注射器、血透機、內(nèi)窺鏡等消毒不嚴格,垂直傳播是我國HBV感染的主要模式,,45,45,乙肝,3易感人群,（1）感染者年齡高峰低發(fā)病區(qū)20～40歲,高發(fā)病區(qū)4～8歲,（2）男女感染率相近，但發(fā)病者男多于女,（3）感染時年齡越小，越易形成慢性肝炎、肝硬化或慢性HBV攜帶狀態(tài)（免疫耐受）。,（4）感染后對相同HBSAG亞型的HBV再感染有持久免疫力，但對不同亞型的保護力不完全。,46,46,乙肝,（三）發(fā)病機理,,47,47,乙肝,2HBV在體內(nèi)的復制過程是一個逆轉(zhuǎn)錄過程,HBVDNA,CCCDNA,前基因組RNA,,,3HBV損傷肝細胞的機理,以細胞免疫介導的肝損傷為主，HBV本身無細胞致病性,三類淋巴細胞參與,NK細胞不需致敏,CTLCD8主要靶抗原為肝細胞膜上HBCAG,抗體依賴性淋巴細胞（ADCC）,抗LSP,抗LMP,,,,自身免疫,48,48,乙肝,（四）臨床特點,1潛伏期2～6個月,急性感染,慢性乙型肝炎,肝硬化,2臨床類型,49,49,乙肝,●慢性HBSAG攜帶者無臨床癥狀，HBEAG亦可陽性。大部分肝組織有病理變化。,,,（五）預后,●嬰幼兒期感染近90轉(zhuǎn)為慢性,●成年人感染85以上可痊愈，10左右轉(zhuǎn)為慢性,慢性乙肝,肝硬化,肝癌,,,＞10,＞10,“三部曲”,,,,50,50,HBV感染的可能轉(zhuǎn)歸,急性乙肝感染,慢性HBV感染,510成年期感染,95圍產(chǎn)期/嬰幼兒期感染,肝硬化,失代償性肝硬化,肝細胞癌,,,慢性肝炎,,,5年內(nèi)1220,5年內(nèi)615,5年內(nèi)2023,,10％～30％,FATTOVICHGETALHEPATOLOGY1995LIAWYFETALLIVER1989IKEDAKETALJHEPATOL1998,51,51,三、丙型病毒性肝炎,丙肝,丙肝是經(jīng)濟發(fā)達國家病毒性肝炎的主要類型,（一）病原學,HCV是第一個利用分子生物學技術(shù)發(fā)現(xiàn)的病毒,原稱“腸道外傳播的非甲非乙型肝炎病毒”,1989年CHIRON公司利用逆轉(zhuǎn)錄酶隨機引物從受染的黑猩猩血清中成功克隆出與HCVRNA互補的CDNA。,HCV為單股正鏈RNA病毒，可能屬黃病毒屬,,,丙肝,1HCV形態(tài)特征,血清中病毒含量少，直到1991年阿部賢治才在免疫電鏡下觀察到HCV顆粒。病毒直徑36～62NM，球形，與黃病毒相似,2HCV基因組結(jié)構(gòu),HCVRNA全長約10KB,含三個編碼區(qū),C區(qū),M區(qū),E區(qū),核心蛋白“C”,基質(zhì)蛋白“M”,外膜蛋白“M”,,,,（高度保守）,（易變）,,●HCV基因型10個，我國主要為Ⅱ型,3抗HCV,目前尚無法檢測HCV的抗原成份。,抗HCV為非保護性抗體，陽性為病毒感染標志,53,53,（二）流行病學,丙肝,傳染源主要為急、慢性丙肝患者和慢性HCV攜帶者,2傳播途徑,主要通過血液/體液傳播輸血、血透、注射、針刺等；其他性傳播、垂直傳播,3易感人群,人群普遍易感。HCV感染的母親所生嬰兒感染率高健康人群07％～31％，某些地區(qū)獻血員甚至高達10％以上。,（三）發(fā)病機理,與乙肝類似，也以免疫介導的肝損傷為主,54,54,（四）臨床特點,潛伏期2～26周，平均8周,①隱性感染者及慢性無癥狀HCV攜帶者多見,②急性丙肝較少見,③慢性丙肝表現(xiàn)酷似慢性乙肝，但起病較隱匿，臨床癥狀及ALT升高水平較乙肝輕。,,（五）預后,HCV感染極易轉(zhuǎn)為慢性,,HCV感染慢性化率為40～50，有報道高達875,30～50的慢性HCV感染者發(fā)展為肝硬化,HCV感染者肝癌發(fā)生率也明顯高于乙肝,四、丁型病毒性肝炎,丁肝,（一）病原學,HDV，又稱Δ因子。為單股負鏈RNA病毒。,,,HDV為缺陷病毒，必須依賴嗜肝DNA病毒才能復制。,,1HDV形態(tài),直徑35～37NM,核心為HDVRNA和HDAG,表面包裹HBSAG,2HDAG和抗HDV,HDAG是HDV感染的直接標志,抗HDVIGM是HDV早期感染標志,慢性HDV感染時，兩種抗體可長期共存,抗HDVIGG是HDV既往感染的標志,56,丁肝,（二）流行病學,1傳染源急、慢性丁肝病人及慢性HBV/HDV攜帶者。,2傳播途徑同HBV我國似以密切接觸傳播為主。,3易感人群,COINFCTION未受HBV感染的人群,SUPERINFECTION已受HBV感染的人群,,,（三）發(fā)病機理,可能既有病毒的直接作用，也有宿主免疫反應介導,57,丁肝,（四）臨床表現(xiàn)及預后,HBV感染者混合或重疊感染HDV后,易加重病情,易慢性化,易演變?yōu)楦斡不?易發(fā)展為肝癌,58,58,五型肝炎病毒簡要對照,,HAVHBVHCVHDVHEV基因組RNADNARNARNARNA傳播途徑消化道血液/體液血液/體液血液/體液消化道慢性化否否是是是否血清學抗HAVIGMHBVM抗HCVHDAG抗HEVIGM檢測抗HAVIGG抗HDVIGM抗HDVIGG,,,,第二部分病毒性肝炎的臨床類型及診斷,急性肝炎,急性無黃疸型、急性黃疸型,慢性肝炎,輕度、中度、重度,重型肝炎,急性重型肝炎亞急性重型肝炎慢性重型肝炎,分早、中、晚期,淤膽型肝炎,肝炎肝硬化活動性，非活動性；代償期，失代償期,,,,,,,60,60,病毒性肝炎臨床診斷格式舉例,病毒性肝炎，甲型（或甲型和乙型同時感染），急性無黃疸型（或急性黃疸型）病毒性肝炎，乙型（或乙型和丁型重疊感染），慢性（中度），G2S3病毒性肝炎，丙型，慢性重型，腹水型，中期急性肝炎（或慢性肝炎），病原未定,61,61,一、急性病毒性肝炎,（一）急性病毒性肝炎的病理特點,急性黃疸型與急性無黃疸型肝炎病理表現(xiàn)基本相同，但后者相對較輕。,病理特點肝細胞壞死不嚴重，以肝細胞水腫、氣球樣變和嗜酸性變性為特點，可有點狀壞死和灶性壞死。,黃疸型者可有毛細膽管擴張或含膽栓。,第三部分病毒性肝炎的病理特點及臨床表現(xiàn),62,62,（二）急性病毒性肝炎的臨床表現(xiàn),HAV和HEV多見（發(fā)熱、黃疸亦多見），HBV、HCV和HDV較少見,急性病毒性肝炎多為自限性，自然病程2～3個月,,急性肝炎,1急性黃疸型肝炎（ACUTEICTERICHEPATITIS）,特征發(fā)熱、乏力、納差、厭油、黃疸及肝功異常,,臨床分三期黃疸前期、黃疸期、恢復期,,63,63,各期主要表現(xiàn),1黃疸前期,發(fā)熱及上感樣癥狀熱程多腎心肌肉●血清ALT升高程度與肝損傷程度不平行●意義對判定急、慢性肝炎有一定幫助,二、肝功能檢查,85,85,（2）門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST/GOT）,●AST明顯升高者提示肝細胞損傷較嚴重,,ALT胞漿內(nèi)；AST線粒體內(nèi),,,（3）ΓGT和ALPAKP,兩者均是反應膽汁淤積的指標,慢性肝炎、肝硬化輕中度升高；原發(fā)性膽汁性肝硬化、肝癌、膽管癌等明顯升高，,ΓGT肝細胞膜結(jié)合ALP肝細胞胞漿和肝內(nèi)膽管上皮中,,,二、肝功能檢查,,86,86,2膽紅素測定,（1）血清膽紅素,●血清總膽紅素升高水平可反應肝細胞損傷程度●直接膽紅素占總膽紅素的比例對判斷黃疸性質(zhì)有一定幫助,,（2）尿二膽,●尿膽紅素均為結(jié)合膽紅素●尿膽素元急黃肝高峰期或淤膽性肝炎及膽道梗阻時，尿膽元可陰性,二、肝功能檢查,87,87,3甲胎蛋白（AFP）,●急性肝炎一般不升高●慢性肝炎及肝硬化可升高，但病情好轉(zhuǎn)后降低●重型肝炎可升高，預后較好●診斷PHC500NG/ML，4周以上200～500NG/ML，8周以上,4白蛋白、球蛋白,●白蛋白水平有助于判斷肝臟儲備功能●球蛋白水平對判定是否為慢性肝炎病毒感染有幫助●白/球比例不宜作為判斷肝纖維化及療效的指標,,二、肝功能檢查,88,88,5凝血酶原時間（PT）和凝血酶原活動度（PTA）,★PT和PTA可以敏感地反應肝臟損害的嚴重程度,VITK依賴性凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ主要由肝臟合成的凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、ⅩⅦ因子半衰期最短PT主要檢測外源性凝血系統(tǒng)中Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ等活性,,●正常值PT12～16秒,PTA＝,,303,PT87,100（80～100）,PTA20時可自發(fā)性出血，10時預后惡劣,淤膽,,維生素K糾正試驗,三、病毒感染血清標志物的臨床檢測及意義,（一）甲肝,病毒培養(yǎng)及電鏡檢測目前在臨床上均不能常規(guī)開展,抗HAVIGM（ELISA法）是目前診斷急性甲肝最可靠、最敏感、應用最廣的方法?？笻AVIGG主要用于人群感染率的調(diào)查,（五）戊肝,抗HEVIGM可用于急性戊肝的早期診斷?？笻EVIGG可用作回顧性診斷及流行病學調(diào)查。,90,90,⑴HBSAG與抗HBSHBSAG陽性表明是HBV的現(xiàn)癥感染，但陽性并不能肯定有傳染性。HBSAG持續(xù)時間急性自限性感染1～6周慢性患者或無癥狀攜帶者HBSAG存在的部位血液、各種體液和分泌物如精液、唾液、尿液等?？笻BS是一種保護性抗體，接種乙肝疫苗可產(chǎn)生抗HBS,（二）乙肝,●1“兩對半”的意義判定有無傳染性,,,91,91,,（2）HBEAGE抗原①是HBV活動性復制和有傳染性的重要指標。前C區(qū)基因發(fā)生突變時，HBEAG可為陰性而HBV仍在復制。②抗HBE在自限性肝炎時，在HBEAG轉(zhuǎn)陰后，抗HBE出現(xiàn)，表示HBV復制減少,92,92,,3核心抗原（HBCAG）與核心抗體（抗HBC）HBCAG的意義HBCAG為HBV復制的標記。IGM抗HBC與IGG抗HBCIGM抗HBC只存在于急性和慢性肝炎急性發(fā)作期。IGG抗HBC低滴度為過去感染的標志高滴度提示活動性復制。窗口期當HBSAG已消失而抗HBS未出現(xiàn)，只檢測到抗HBC時，稱窗口期。,兩對半知識要點總結(jié)抗HBS是保護性抗體，出現(xiàn)后提示病毒已清除，病情恢復。HBEAG是病毒復制指標，陽性者肯定有傳染性，但陰性者不能否定有病毒復制。抗HBE單看其陽性與否意義不大，應結(jié)合HBVDAN檢測。抗HBCIGM（＋）提示近期有急性HBV感染或慢性感染者病毒復制活躍。抗HBCIGG（＋）凡有過HBV感染者均可陽性，單憑此不能判斷目前HBV的感染狀態(tài)。,2HBVDNA,（＋）是病毒感染的直接證據(jù),,（）提示病毒復制水平低或已清除,94,,95,,（三）丙肝,抗HCV不是保護性抗體，陽性者有傳染性抗HCVIGM無早期診斷價值，持續(xù)陽性預示慢性化或重癥化HCVRNA是HCV感染和有傳染性的直接證據(jù)，治愈后消失,（四）丁肝,病毒性質(zhì)缺陷病毒，在血液中由HBSAG包被，內(nèi)含單股環(huán)狀閉合RNA組成。只有一個抗原抗體系統(tǒng)。HDAG和HDVRNA均是HDV感染的直接證據(jù)抗HDVIGM用于早期診斷，也是診斷慢性HDV感染的敏感指標。,97,97,四、病理學檢查,常用方法肝穿刺活檢術(shù)普通HE染色、免疫組化染色,五、其他檢查B超、CT、MRI等,98,明確回答是不是是什么流行病學資料臨床診斷病原學診斷注意無癥狀HBV攜帶者，準確推斷肝炎的病程對選擇制定治療方案和判斷預后都非常重要。,在急性或慢性肝炎的基礎(chǔ)上，如出現(xiàn)①黃疸進行快速升高數(shù)天內(nèi)達171?MOL/L以上；②乏力及消化道癥狀進行性加重；③酶膽分離；④PT進行性延長，PTA降低。,其中，重肝的早期診斷依據(jù),第五部分病毒性肝炎的診斷與鑒別診斷,99,【鑒別診斷】,㈠其他原因引起的黃疸⒈溶血性黃疸G6PD缺乏癥葡萄糖6磷酸脫氫酶缺陷⒉肝外梗阻性黃疸例如，膽結(jié)石。㈡其他原因引起的肝炎⒈其他病毒引起肝炎EBV和CMV⒉感染中毒性肝炎敗血癥、恙蟲病和鉤端螺旋體?、乘幬镆鸶螕p害異煙肼、利福平⒋酒精性肝炎長期酗酒5肝豆狀核變性6自身免疫性肝炎7寄生蟲,100,問題,診斷HAV急性感染的指標是什么HBV損傷肝細胞的機理乙肝“兩對半”的概念及意義什么是病毒復制和有傳染性最直接的證據(jù)什么叫“轉(zhuǎn)陰”,100,甲肝、戊肝只有急性肝炎乙肝、丙肝既有急性，也有慢性，但以慢性為多；,中醫(yī)治療急性肝炎的思路與方法,