龍眼參多糖對氟中毒大鼠肝腎損傷的保護作用.pdf

1、目的：建立大鼠氟中毒模型；研究龍眼參多糖(LYSP)對氟中毒大鼠肝、腎損傷的保護作用并探討其機制。
　　 方法：Wistar大鼠60只隨機分成5組：正常對照組(NC組)、模型對照組(NaF組)、龍眼參多糖低劑量組(LYSPL組)、龍眼參多糖中劑量組(LYSPM組)和龍眼參多糖高劑量組(LYSPH組)。除正常對照組外，其余4組大鼠給予飲用高氟水([F-]150mg·L-1)12周復(fù)制慢性氟中毒模型。自給予高氟水后的第8周各組開始灌

2、胃給藥，正常對照組、模型對照組給予蒸餾水，龍眼參多糖低、中、高劑量組分別給予龍眼參多糖(LYSP)0.15g·kg-1(相當(dāng)于生藥13.24g·kg-1)、0.30g·kg-1(相當(dāng)于生藥26.48g·kg-1)、0.60g·kg-1(相當(dāng)于生藥52.96g·kg-1)，給藥體積均為10mL·kg-1體重，每天1次，給藥時間共4周。給藥4周后處死大鼠，采集標(biāo)本進行如下處理：
　　 1.測定各組大鼠血清中氟離子濃度及血清生化指標(biāo)；

3、測定各組大鼠血清中的Ca2+濃度及肝腎組織中的Ca2+濃度。
　　 2.測定各組大鼠肝臟丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量，檢測各組大鼠肝臟總抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-Px)以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。
　　 3.測定各組大鼠腎臟丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量，檢測各組大鼠腎組織中一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽-過氧

4、化物酶(GSH-Px)活性。
　　 4.在光鏡下觀察各組大鼠肝、腎組織傷程度。采用免疫組化方法觀察肝、腎組織的Bcl-2、Bax蛋白表達水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.血清生化指標(biāo)檢測結(jié)果顯示，造模第12周后：與正常對照組比較，模型組血清中氟離子濃度([F-])顯著升高(P＜＜0.0)，與模型組比較，龍眼參多糖給藥組血清[F-]無差異(P＞0.05)。各組大鼠血清CO2-CP無差異(P＞0.05)。與正常對照組比

5、較，模型組血清總蛋白下降，球蛋白升高，A/G下降(P＜0.01)；血清ALT，AST，膽紅素以及γ-GT升高(P＜0.01)；血清BUN，CR升高(P＜0.01)，UA下降(P＜0.01)；血清ALP，LDH升高(P＜0.01)。與模型組比較，龍眼參多糖給藥組血清總蛋白升高，其中LYSPM組和LYSPH組(P＜0.01)，球蛋白下降，A/G升高(P＜0.01)；血清ALT，AST，膽紅素以及γ-GT下(P＜0.01)；血清BUN，CR下

6、降(P＜0.01)及UA在正常范圍內(nèi)升高(P＜0.01)；血清ALP，LDH下降(P＜0.01)。
　　 2.實驗結(jié)果顯示，與正常對照組比較，氟中毒模型組大鼠血清Ca2+濃度明顯降低(P＜0.01)，肝、腎組織中Ca2+含量升高(P＜0.01)。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，龍眼參多糖給藥組與模型組無差異(P＞0.05)，未能改善氟中毒模型大鼠血清中缺鈣的現(xiàn)象，且肝、腎組織中Ca2+含量升高。
　　 3.肝臟氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果顯示

7、，造模第12周后：與正常對照組比較，模型組肝臟MDA，NO升高(均P＜0.01)；肝臟T-AOC下降，GSH-Px及SOD活性下降，tNOS及iNOS活性升高(均P＜0.01)。與模型組比較，龍眼參多糖給藥組肝臟MDA，NO下降；肝臟T-AOC，GSH-Px及SOD活性升高，tNOS，iNOS活性降低。
　　 4.腎臟氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果顯示，造模第12周后：與正常對照組比較，模型組腎臟MDA升高，NO升高(均P＜0.01)

8、；腎臟SOD，GSH-Px活性下降，tNOS，iNOS，cNOS活性升高(均P＜0.01)。與模型組比較，龍眼參多糖給藥組腎臟MDA，NO下降；腎臟SOD，GSH-Px活性升高，腎臟tNOS，iNOS活性降低。
　　 5.肝組織、腎組織病理學(xué)觀察，結(jié)果顯示龍眼參多糖(LYSP)各組都能在一定程度上減輕肝組織、腎組織的損傷。
　　 與正常對照組比較，各組肝組織Bcl-2、Bax蛋白表達不明顯。
　　 與正常對照組比

9、較，模型組Bcl-2、Bax蛋白表達均明顯升高(P＜0.01)；與模型組比較LYSPM組和LYSPH組腎組織Bcl-2蛋白表達明顯增高(P＜0.01或P＜0.05)，而Bax蛋白表達及Bax/Bc-2的比值明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)。提示龍眼參多糖對氟中毒大鼠腎損傷的保護作用可能與其影響腎組織Bcl-2、Bax蛋白表達有關(guān)。
　　 結(jié)論：龍眼參多糖(LYSP)能減輕氟中毒大鼠肝腎損傷，對氟中毒大鼠肝腎損傷具有保護作用