狗肝菜多糖對(duì)肝損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、肝損傷是各型肝病共同的病理基礎(chǔ),其長期存在往往是導(dǎo)致肝纖維化,甚至肝硬化、肝癌發(fā)生的重要始動(dòng)因素。因此防治肝損傷是臨床肝病治療的主要環(huán)節(jié)之一。肝損傷機(jī)制復(fù)雜,目前公認(rèn)與脂質(zhì)過氧化、免疫功能紊亂、肝細(xì)胞異常凋亡有關(guān)。
　　狗肝菜[Diclipterachinensis(L.) Nees.]為民間藥食兩用的中草藥,主要含有多糖、有機(jī)酸、氨基酸等物質(zhì),民間常用于治療肝臟疾病。有報(bào)道其有效成分多糖對(duì)動(dòng)物模型中 CCL4導(dǎo)致化學(xué)性肝損傷和卡

2、介苗(BCG)+脂多糖(LPS)所致的免疫性肝損傷具有降低相關(guān)血清酶的作用,但未對(duì)其保肝作用進(jìn)行全面評(píng)價(jià)及作用機(jī)制探討。本研究旨在通過急性重癥肝炎模型、免疫肝損傷模型和免疫抑制模型全面系統(tǒng)的評(píng)價(jià)狗肝菜多糖保肝作用及其免疫調(diào)節(jié)作用,進(jìn)一步闡明狗肝菜多糖抗肝損傷的作用機(jī)制,為狗肝菜多糖在保肝治療方面的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的: 1.研究狗肝菜多糖對(duì)D-氨基半乳糖(D-GalN)及脂多糖(LPS)所致大鼠急性重癥肝炎的影響及其機(jī)制。

3、
　　2.研究狗肝菜多糖對(duì)小鼠免疫性肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　3.研究狗肝菜多糖對(duì)環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的免疫功能低下小鼠的免疫功能的影響。
　　方法: 1.采用D-GalN+LPS造模,將wistar大鼠隨機(jī)分成模型、狗肝菜多糖高、低劑量和正常對(duì)照4個(gè)組;于6h、12h分別觀察并計(jì)算各組動(dòng)物死亡率;存活動(dòng)物于6h采血檢測ALT、AST、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β);12h采血檢測血清ALT、AS

4、T、TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO);12h后全部處死存活動(dòng)物,HE染色觀察肝臟病理形態(tài)學(xué)變化,免疫組化檢測肝組織中凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax的表達(dá)。
　　2.采用BCG+LPS造模,將昆明種小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照、模型組,狗肝菜多糖高、中、低劑量處理組,聯(lián)苯雙酯處理陽性對(duì)照組。觀察狗肝菜多糖對(duì)小鼠血清ALT, AST活性,肝組織SOD和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性和MDA含量;HE染色觀察肝組織病理學(xué)改變。<

5、br>　　3. sc環(huán)磷酰胺導(dǎo)致免疫低下小鼠模型,將昆明種小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照、模型組,狗肝菜多糖高、中、低劑量處理組,左旋咪唑處理陽性對(duì)照組。測定小鼠胸腺、脾臟重量并計(jì)算臟器系數(shù),碳粒廓清法測定單核巨噬細(xì)胞吞噬功能,比色法測定血清溶血素含量。MTT法測定正常小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖情況。
　　結(jié)果: 1.6h各組動(dòng)物均存活;與模型組相比,狗肝菜多糖處理組12h死亡率明顯低于模型組。模型組血清ALT、AST活力和TNF-α、IL-1β

6、、NO水平均升高,狗肝菜多糖高、低劑量組血清指標(biāo)均明顯低于模型組。模型肝組織大片壞死、淤血,狗肝菜多糖高、低劑量組組織損傷程度明顯降低,以高劑量組效果最佳。狗肝菜多糖高、低劑量組與模型組比較,Bax在肝組織中的表達(dá)明顯降低,Bcl-2的表達(dá)改變不明顯。
　　2.與模型組比較,狗肝菜多糖能降低血清AST, ALT活性,降低肝組織MDA含量,增加肝組織SOD, GSH-PX活性,能夠減輕肝細(xì)胞損傷程度。
　　3.狗肝菜多糖能對(duì)抗

7、環(huán)磷酰胺引起的小鼠脾萎縮和胸腺萎縮,提高免疫抑制小鼠對(duì)碳粒的吞噬作用,而對(duì)小鼠血清溶血素的生成有較強(qiáng)的促進(jìn)作用,能促進(jìn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的增殖。
　　結(jié)論: 1.狗肝菜多糖能減輕D-GalN/ LPS誘導(dǎo)的肝損傷,可能通過降低炎性介質(zhì)TNF-α、IL-1β和NO的水平發(fā)揮作用,同時(shí)抑制肝損傷時(shí)的異常凋亡。
　　2.狗肝菜多糖對(duì)小鼠免疫性肝損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與其抗氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化作用有關(guān)。
　　3.狗肝菜