神經母細胞瘤細胞中ZBTB-38基因對內質網應激和自噬過程的作用機制.pdf

1、CIBZ，即ZBTB-38蛋白，對caspase-3有抑制作用，caspase-3是細胞凋亡的標志基因之一，也就是說CIBZ應具有一定的抗凋亡作用。眾所周知，細胞凋亡的發(fā)生與內質網應激和自噬均有十分緊密的關系，對于細胞而言，適度內質網應激作用的發(fā)生，反而在一定程度上對自身起到了保護的效果，但是在長時間和高強度地發(fā)生內質網應激的情況下不僅不能夠產生保護作用反而可能會誘導細胞凋亡發(fā)生。自噬是囊泡包裹自身受損蛋白和老化細胞器，然后與溶酶體融合

2、形成自噬體，并降解其包裹內容物的過程，通過這種方式可以完成細胞生命過程中的新陳代謝以及某些受損或者老化細胞器的更新，這個過程是一種自我消化作用，而且在進化上是高度保守的。
　　本研究將ZBTB-38基因通過瞬時轉染進該細胞，同時在空白組中加入LipoHigh脂質體。轉染結束后分別提取實驗組和空白組的的總RNA和蛋白質樣品，同時將實驗結果通過半定量RT-PCR、實時熒光定量PCR、免疫熒光和蛋白質印跡等手段進行檢測分析。結果顯示，實

3、驗組中ZBTB-38基因表達出現顯著降低；與凋亡有關的caspase-3和p21基因的表達有所上升；與內質網應激有關的GRP78和ERdj4基因，PDI和p-eIF2α蛋白的表達有所上升；與自噬有關LC3B和p62蛋白的表達均有所下降。在細胞凋亡的過程中caspase家族成員有著重要的作用，尤其是線粒體通路中，存在一類通路是需要活化的caspase-3才能引起細胞凋亡。而本實驗中的CIBZ對caspase-3有抑制作用，通過實驗結果的分