家兔胰島細胞體外培養(yǎng)以及黑木耳多糖對其活性的影響.pdf

1、胰島細胞的體外培養(yǎng)，目前較成熟的培養(yǎng)體系是SD大鼠胰島細胞的分離、純化及體外培養(yǎng)。家兔與人類某些基因的序列同源性較高，因此，建立家兔胰島細胞的體外培養(yǎng)體系具有重要科學意義。本項研究用膠原酶消化胰腺組織，用差速貼壁法，即利用胰島細胞與成纖維細胞貼壁速率的差異，分離、純化胰島細胞。用胰島細胞特異性染色——DTZ染色法對所得的胰島細胞進行了鑒定。得到胰島細胞之后，用四種培養(yǎng)基，即RPMI-1640培養(yǎng)基、M199培養(yǎng)基、DMEM低糖培養(yǎng)基、D

2、MEM高糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，培養(yǎng)五天后，用MTT法分別測定四種培養(yǎng)基培養(yǎng)后的胰島細胞的細胞活性，實驗數(shù)據(jù)表明，利用RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)的胰島細胞細胞活性更高，因此說明RPMI-1640培養(yǎng)基更適合家兔胰島細胞的培養(yǎng)。在選擇出最適培養(yǎng)基后，調整血清濃度分別為20％、15％、10％以及5％，同樣，培養(yǎng)五天之后，MTT法測定胰島細胞的細胞活性，實驗數(shù)據(jù)證明RPMI-1640培養(yǎng)基在血清濃度為20％時候胰島細胞活性更高，更適合胰島細胞的培