納米金復(fù)合體系熒光探針的設(shè)計(jì)、研制及應(yīng)用.pdf

1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文納米金復(fù)合體系熒光探針的設(shè)計(jì)、研制及應(yīng)用姓名：張寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：唐波20070520由客幫范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)侔為重要的光物理技術(shù)毆廣泛應(yīng)用于嫩物大分子之間躐離的定性、定量檢鋇4，在鬣自質(zhì)、核酸、細(xì)胞器結(jié)構(gòu)功能研究，免疫分析，高努予幫麓分子辯學(xué)，鴦?dòng)苫?、金耩離子及藉炎測(cè)定等鏢域舔騫巧妙瑟有效夔應(yīng)矮。FRET也稱為非輻射能量轉(zhuǎn)移，即處于激發(fā)態(tài)的物種以偶極偶極

2、相互作用形式將激發(fā)能轉(zhuǎn)移給處于熬態(tài)的物種，傳遞距離在2080A之閾。其中，能量給予者為供俸(donor)能量接受者為受體(acceptor)，受髂胃發(fā)射垂己豹特征熒光(熒先增強(qiáng))，也可不發(fā)熒光(熒光猝滅)。熒光綮量子產(chǎn)率粥，是最常用的供體分子。鑭系元素銪作為熒光標(biāo)記的能爨供體，量子產(chǎn)率高、熒光港命長(zhǎng)、發(fā)射峰窄，其準(zhǔn)確性和信噪魄大大提高。不產(chǎn)黧熒光靜受體麓優(yōu)勢(shì)在于髓夠減少霹麓幽受體本雋壹接產(chǎn)生靜熒光背景的干擾。納米金良好的穩(wěn)定性、小尺寸效

3、應(yīng)、表麗效應(yīng)、光學(xué)效威、特殊的生物采幫效應(yīng)，以及對(duì)熒光試剩精的猝滅效率，提高了FRET過(guò)程的靈敏發(fā)和特異往，傻箕成失一個(gè)研究和應(yīng)用的熱點(diǎn)。本論文基于FRET原理，設(shè)計(jì)、研制納米盒復(fù)合體系的熒光探針應(yīng)用于生物活牲物矮靛檢測(cè)，囂鼴了三方蔥豹纂毋究：(一)基于FRET原理，建纛納米2金DNA熒光素復(fù)合體系專一性識(shí)剮活細(xì)胞內(nèi)羥自由基的新方法。納米金具有離消光系數(shù)，在納米金熒光素組成的FRET供受薅對(duì)巾發(fā)揮突出的熒光狻滅捧髑。羥叁巒綦警莛DNA鏈

4、羧裂導(dǎo)致FRET現(xiàn)象消失，縭米金猝滅熒光素的熒光隨之得到恢復(fù)，據(jù)此實(shí)現(xiàn)羥爨由基的測(cè)定。方法的線性范圍為80nM—10“M，檢測(cè)限為24nM。小鼠腹腔巨噬細(xì)胞及HepG2人肝癌纓瑰巍羥鑫巒基豹熒光殘?jiān)?shí)驗(yàn)襲鞠：搽贊其蠢膜穿透性，勞選擇經(jīng)撼獲纓戇蠹豹羥自由基，對(duì)細(xì)胞內(nèi)微摩爾級(jí)焱自由基含量的變化產(chǎn)生響成，表現(xiàn)了良好的生物適用性。(：)基予FRET霖理，施建熒麥純學(xué)傳戇器綾寒金一一強(qiáng)顴精(CDs)一熒光素超分子主體化合物識(shí)別客體分予膽固醇。納米