毛細(xì)管電泳-紫外聯(lián)合電導(dǎo)檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定連翹中活性成分的研究.pdf

1、連翹（Forsythiae Fructus），是木犀科（Oleaceae）連翹屬（Forsythia）植物的果實(shí)，是一種傳統(tǒng)的中草藥。根據(jù)采摘季節(jié)的不同，連翹又可以被分為青翹和老翹，二者都具有清熱解毒，抗菌消炎的功效。在以往的研究中，人們更多的是通過(guò)連翹的主成分來(lái)研究其藥理藥效作用，然而，藥理學(xué)表明，連翹中所含有的三種重要的微量成分——三萜酸（齊墩果酸、熊果酸和白樺脂酸）與連翹的抗菌消炎的作用有著直接的關(guān)系。并且，三萜酸也具有其各自獨(dú)特

2、的藥理藥效作用。因此，為了更加全面的評(píng)價(jià)以及有效的利用野生青翹和老翹資源，本課題重點(diǎn)討論和研究了三萜酸在連翹中含量以及含量與連翹產(chǎn)地和采摘季節(jié)的關(guān)系。鑒于這三種三萜酸互為同分異構(gòu)體，在眾多的分離方法中，毛細(xì)管電泳技術(shù)因其高效快速，分離能力強(qiáng)，對(duì)實(shí)際樣品檢測(cè)時(shí)，樣品前處理簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)，被廣泛的應(yīng)用于各類物質(zhì)的分離。同時(shí)，連翹中所含有的金屬元素對(duì)連翹的藥理藥效作用也起到了不可忽視的作用。本課題旨在開(kāi)發(fā)快速、簡(jiǎn)單的三萜酸的毛細(xì)管電泳-紫外檢測(cè)方

3、法，以連翹中三萜酸的含量為指標(biāo)，采用化學(xué)計(jì)量學(xué)的方法對(duì)不同地域和采收季節(jié)的連翹進(jìn)行評(píng)價(jià)；同時(shí)采用毛細(xì)管電泳-非接觸電導(dǎo)檢測(cè)器開(kāi)發(fā)了三種微量元素的分析方法，并重點(diǎn)討論了電導(dǎo)檢測(cè)器在金屬離子檢測(cè)中出現(xiàn)正負(fù)峰的原因。
　　第一章介紹的毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和基本原理、連翹的研究進(jìn)展、β-環(huán)糊精在異構(gòu)體拆分過(guò)程中的基本理論以及化學(xué)計(jì)量學(xué)的基礎(chǔ)知識(shí)。其中，重點(diǎn)對(duì)三萜酸分離的不同色譜方法進(jìn)行綜述，在對(duì)比中突出了毛細(xì)管電泳對(duì)三萜酸拆分的優(yōu)勢(shì)。提出

4、了毛細(xì)管電泳應(yīng)用于三萜酸的分離與定量對(duì)連翹質(zhì)量評(píng)價(jià)的良好應(yīng)用前景。
　　第二章對(duì)三種三萜酸的毛細(xì)管電泳-紫外檢測(cè)的方法進(jìn)行開(kāi)發(fā)，通過(guò)對(duì)背景電解質(zhì)和拆分劑的種類、濃度進(jìn)行考察，重點(diǎn)討論了β-環(huán)糊精在三種三萜酸分離過(guò)程中的拆分機(jī)理，成功計(jì)算得到了三種三萜酸與β-環(huán)糊精的結(jié)合常數(shù)，進(jìn)一步指導(dǎo)了三萜酸的拆分。最終確立了最佳的電泳分離條件為50 mmol/L的硼砂，0.5 mmol/L的β-環(huán)糊精，在pH值為9.5的條件下，齊墩果酸、熊果酸

5、和白樺脂酸實(shí)現(xiàn)了基線分離。方法的精密度良好（遷移時(shí)間和峰面積的RSD均小于5.0％），在5μg/mL至80μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢出限達(dá)到1.28-1.76μg/mL。本章中三萜酸的分離無(wú)需任何衍生手段，具有很強(qiáng)的通用性。
　　第三章基于最佳的三萜酸的分離條件，對(duì)來(lái)自全國(guó)12個(gè)產(chǎn)地的19種連翹樣品中的三萜酸進(jìn)行檢測(cè)和定量。再以三種三萜酸的含量為指標(biāo)，采用層序聚類分析和主成分分析的方法對(duì)連翹樣品的地域以及采收時(shí)間進(jìn)

6、行了科學(xué)的評(píng)價(jià)，研究得到的一些結(jié)論表明，青翹中三萜酸的含量較老翹中的含量普遍較高，且熊果酸是三種三萜酸中含量最高的成分，白樺脂酸在所有老翹中均得到了檢出。本方法對(duì)連翹的質(zhì)量監(jiān)控提供了新的思路和方法。
　　第四章建立了毛細(xì)管電泳-非接觸電導(dǎo)檢測(cè)法對(duì)連翹中三種金屬元素（Mg2+、Zn2+、Cu2+）的檢測(cè)方法。本方法分析速度快、成本低廉，較傳統(tǒng)的原子吸收法具有極強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。同時(shí)，通過(guò)研究背景電解質(zhì)的組成變化、pH改變等因素，結(jié)合理論知識(shí)