常規(guī)及微型化毛細管電泳-電化學檢測聯(lián)用技術及其應用研究.pdf

1、本文分為七章： 第一章緒論 毛細管電泳具有分離效率高，快速和所需樣品量少等特點。應用范圍包括無機離子的分析，有機小分子分析，環(huán)境分析，食品分析，生物分析，藥物分析等。在分析化學、生物化學、分子生物學、藥物化學、食品化學、環(huán)境化學和醫(yī)學等許多領域，有著廣闊的應用前景。在緒論中回顧了毛細管電泳的歷史，現(xiàn)狀，發(fā)展趨勢，主要特點和研究進展，重點對毛細管電泳．電化學檢測(CE-ED)進行了較為全面的綜述。根據本論文的研究內容，重點

2、綜述了常規(guī)及微型化毛細管電泳在中藥，食品成分分析和臨床疾病診斷中的應用研究。本論文采用CE-ED技術，測定了幾種中藥、食品中的活性成分，同時也將微型化毛細管電泳應用范圍延伸到臨床疾病的診斷上，大大拓展了CE-ED的應用范圍，探討了毛細管電泳．電化學檢測聯(lián)用技術在藥物分析、生化分析中的一些應用。 第二章 杜仲及其保健品中生物活性成分的毛細管電泳 電化學檢測本實驗采用毛細管電泳．電化學檢測法(CE-ED)同時分離測定了杜仲葉

3、、杜仲皮及市售杜仲保健品中蘆丁、抗壞血酸、金絲桃甙、綠原酸、槲皮素等多種生物活性成分的含量，考察了運行緩沖液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進樣時間等實驗參數(shù)對分離、檢測的影響。在最優(yōu)化條件下，以300μm碳圓盤電極為檢測電極，檢測電位為+0.95 V(vs．SCE)，50 mmol/L硼砂的運行緩沖液(pH 9.0)中，上述各組分在20 min內可實現(xiàn)基線分離。各組分濃度與峰電流在三個數(shù)量級范圍內呈良好線性，檢測下限(S/N=3)分別

4、為3.27×10<'-8>g/mL、8.10×10<'-8>g/mL、4.50×10<'-8>g/mL、9.57×10<'-8>g/mL和4.03×10<'-8>g/mL。該方法已成功地應用于杜仲及其保健品中生物活性成分的測定，結果令人滿意。 第三章地骨皮中生物活性成分的毛細管區(qū)帶電泳 安培檢測方法研究采用毛細管區(qū)帶電泳．安培檢測法同時分離測定了中藥地骨皮中刺槐素、莨菪亭、山奈酚、對香豆酸、香草酸、木犀草素和槲皮素等多種

5、生物活性成分，考察了運行液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進樣時間等實驗參數(shù)對分離、檢測體系的影響。在最佳實驗條件下，以直徑300 μm的碳圓盤電極為工作電極，檢測電位為+0.95V(Vs.SCE)，在80 mmol/L的硼砂緩沖溶液(pH 9.0)中，七組分在24 min可實現(xiàn)基線分離。七組分峰電流與其濃度在1.0×10<'-3>～1.0×10<'-1>g/L范圍內呈良好線性，檢出限(S/N=3)達3.5×10<'5>～6.0×10<

6、'-5>g/L。該方法成功地應用于中藥地骨皮中生物活性成分的含量檢測。 第四章 毛細管區(qū)帶電泳-安培檢測蒲公英中的多酚 采用毛細管電泳-安培檢測法(CE-AD)同時測定了蒲公英中的香葉木素、阿魏酸、綠原酸、木犀草素和咖啡酸五種主要生物活性成分的含量。本實驗采用柱端射壁式檢測法，以直徑300 μm的碳圓盤電極為工作電極，檢測電位為+0.85 V(Vs.SCE)。在優(yōu)化的測定條件下，上述五種組分在50mmol/L，pH 8.

7、0的硼砂緩沖溶液中17 min內達到基線分離。五種組分在兩個數(shù)量級的范圍內呈良好線性關系，檢測下限(S/N=3)達1.7×10<'-7>-7.0×10<'-7>g/mL。該法已成功的應用于蒲公英中的多酚的分離檢測；結果令人滿意。 第五章毛細管電泳-電化學方法檢測玉米須、玉米葉及玉米粒中生物活性成分 玉米含有豐富的黃酮類和酚酸類成分。然而，除玉米粒外，玉米的其他部位沒有受到重視。本實驗采用毛細管電泳．電化學方法分離檢測玉米

8、須、玉米葉及玉米粒中的表兒茶酸、蘆丁、維生素C(Vc)、山萘酚、綠原酸和槲皮素，并分析比較了玉米須、玉米葉及玉米粒中主要活性成分含量。為了獲得最優(yōu)化的分析條件，研究了緩沖液的濃度、酸性；分離電壓；工作電極電位等實驗條件。在最優(yōu)化條件下，上述六種被分析物能夠在40mmol/L(pH 9.2)硼砂硼酸體系中，在19 min內實現(xiàn)較好分離。檢測下限在4.97×10<'-8>到9.75×10<'-8>g/mL之間．該方法已經成功地用于玉米須、玉

9、米葉及玉米粒中生物活性成分檢測，實驗結果令人滿意。 第六章毛細管電泳-安培檢測法在咖啡天然抗氧化成分極性溶劑提取效率中的研究 本實驗首次采用毛細管電泳．安培檢測法(CE-AD)同時分離測定了咖啡中兒茶素、蘆丁、阿魏酸、鄰苯二酚、綠原酸、咖啡酸、沒食子酸和原兒茶酸等八種抗氧化活性成分，考察了運行液酸度和濃度、分離電壓、氧化電位和進樣時間等實驗參數(shù)對分離、檢測體系的影響。在優(yōu)化實驗條件下，以直徑300μm碳圓盤電極作為工作電

10、極，檢測電位為+950 mV(vs.SCE)，在80 mmol/L的硼砂緩沖溶液(pH 8.4)中，八組分在26 min可實現(xiàn)基線分離。八組分濃度與峰電流在三個數(shù)量級范圍內呈良好線性，檢出限(S/N=3)達6.0x10<'-8>-3.6×10<'-7>g/mL。該方法已成功地應用于不同極性溶劑對咖啡中抗氧化成分提取效率的研究，結果令人滿意。 第七章微型化毛細管電泳-安培檢測法測定人體唾液和尿液中的尿酸成分 本實驗采用改良