穿膜肽修飾的PLGA載藥納米顆粒對AD轉(zhuǎn)基因鼠記憶改善的研究.pdf

1、阿爾茨海默癥（Alzheimer's disease，AD）作為一種目前致死率極高的疾病已經(jīng)嚴(yán)重威脅到了人們的公共健康問題，受到越來越多的關(guān)注。其常見的病理特征包括老年斑、神經(jīng)元纖維異常纏結(jié)和神經(jīng)元胞外高密度β淀粉樣蛋白(amyloidβ，Aβ)的沉積。雖然目前已有多種治療藥物上市，但由于存在藥物可溶性差，生物可溶性低，難以穿越血腦屏障(blood-brain barrier，BBB)等問題，致使AD的治療現(xiàn)狀仍不容樂觀。納米顆粒載體因

2、其在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中均易被檢測到因此用于AD的診斷治療日益受到重視。因此，我們希望設(shè)計出一種可以穿越BBB靶向腦部并積極發(fā)揮攜帶藥物功能的新型納米藥物載體。
　　聚乳酸羥基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA)是一種生物可降解的高分子微球，具有良好的生物相容性，應(yīng)用前景廣闊，因此我們選擇PLGA為基礎(chǔ)納米顆粒藥物載體，并將姜黃素與環(huán)肽S1包裹進(jìn)納米顆粒內(nèi)腔，將制得的納米顆粒命名為NP-S1

3、+Cur。姜黃素是一種可以抑制Aβ毒性的天然化合物，而S1可以通過影響APP的剪切過程有效降低Aβ生成，二者對AD的致病機(jī)制均有一定的積極影響。隨后我們選擇用穿膜肽CRT修飾在PLGA納米顆粒表面(CRT-NP-S1+Cur)，因?yàn)镃RT是一種與鐵生物性能相似的多肽，可以靶向性結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體復(fù)合物，增強(qiáng)納米顆粒穿越BBB的能力。
　　通過透射電鏡(Transmission electron microscope，TEM

4、)觀察納米顆粒形態(tài)，動態(tài)光散射法(Dynamic light scattering，DLS)確定耦連CRT前后納米顆粒的大小分別為128.6 nm and139.8nm，包封率分別為23.2±5.3％ and21.4±6.9％，載藥量分別為0.54±0.04％ and0.42±0.06％;利用MTT毒性實(shí)驗(yàn)分析納米顆粒的生物毒性;同時，體外模擬血腦屏障實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)活體成像實(shí)驗(yàn)表明，CRT-NP-S1+Cur具有更強(qiáng)的穿越BBB的能力。動物

5、行為學(xué)和病理學(xué)研究表明，經(jīng)過對AD轉(zhuǎn)基因小鼠21天腹腔注射PLGA納米顆粒后，能夠改善AD鼠的空間記憶能力，小鼠腦內(nèi)老年斑數(shù)量有所減少，小膠質(zhì)細(xì)胞和星型膠質(zhì)細(xì)胞活化水平、突觸素水平均有改善。用試劑盒對實(shí)驗(yàn)小鼠腦部進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，PLGA納米顆粒可以增強(qiáng)腦內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)的活性，降低Aβ和活性氧(ROS)水平，促炎性細(xì)胞因子（TNF-α和IL-6）的表達(dá)，與NP-S1+Cur相比，CRT-NP-S1+Cur的作用效果更顯著。