褪黑素對(duì)AD轉(zhuǎn)基因小鼠病理學(xué)及行為學(xué)的改善作用.pdf

1、阿爾茨海默?。ˋlzheimer's Disease，AD）是最常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病，其臨床特征主要表現(xiàn)為進(jìn)行性的記憶、認(rèn)知，情感障礙及人格改變。典型病理特征包括神經(jīng)元內(nèi)的神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles，NFTs），細(xì)胞外的老年斑（senile plaques，SPs），營(yíng)養(yǎng)不良性神經(jīng)炎和突觸的丟失。目前尚無(wú)有效治療或逆轉(zhuǎn)疾病進(jìn)展的治療藥物。轉(zhuǎn)人類APP695基因小鼠即Tg2576小鼠，是一種較好的AD模

2、型，越來(lái)越多地被人們用來(lái)研究AD。褪黑素對(duì)AD的治療作用的研究一直是一個(gè)熱點(diǎn)問(wèn)題，盡管我們和他人以前的研究發(fā)現(xiàn)褪黑素可以減輕AD樣病變，降低Ab水平，tau蛋白過(guò)度磷酸化及改善行為學(xué)障礙等，但也有研究發(fā)現(xiàn)14月齡的Tg2576小鼠給予褪黑素治療，不能降低Ab負(fù)荷。因此，褪黑素防治AD的最佳方案仍有待闡明。
　　 目的：探討Tg2576小鼠發(fā)病的幾個(gè)關(guān)鍵月齡；明確褪黑素治療AD樣病變的合適時(shí)機(jī)；闡明褪黑素治療的全面及長(zhǎng)期效果；初步

3、闡明其機(jī)制。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)分為二組：第一組,4、8、12、18和21月齡的Tg2576小鼠及對(duì)照小鼠各3只，用免疫印疫檢測(cè)以上月齡中tau蛋白磷酸化，GSK-3b和PP2A的變化情況。第二組,4月齡和8月齡的Tg2576小鼠32和20只隨機(jī)分為兩組：褪黑素和溶劑對(duì)照，分別給予褪黑素和溶劑對(duì)照DMSO腹腔注射,4月齡鼠分別在8月齡（n=4）和12月齡(n=12),8月齡鼠在12月齡（n=10）結(jié)束用藥，12月齡結(jié)束用藥的小鼠

4、每小組留5只不作任何處理到21月齡，其它動(dòng)物于12月齡取材。用免疫印跡，免疫組化，銀染，ELISA，水迷宮及電跳臺(tái)測(cè)試檢測(cè)12月齡的Ab含量，tau蛋白磷酸化，行為學(xué)改變，及突觸病變GSK-3b變化情況；檢測(cè)21月齡的老年斑，tau蛋白磷酸化及GSK-3b變化情況。
　　 結(jié)果：（1）Tg2576小鼠tau蛋白部份位點(diǎn)的在12，18,21月齡均發(fā)生過(guò)度磷酸化，GSK-3b的活性在12，18,21月齡均升高；PP2A的活性在12月

5、齡下降。（2）4-12月齡給予褪黑素，12月齡檢測(cè)Ab生成，tau蛋白磷酸化及行為學(xué)障礙均有減輕,21月齡的老年斑及tau蛋白磷酸化仍有減少；8-12月齡的治療效果與4-12月齡效果一樣。（3）4-12月齡及8-12月齡給予褪黑素，12和21月齡的GSK-3b活性均下降；8-12月齡給藥中，12月齡的PP2A活性無(wú)改變，突觸蛋白和部份即早基因表達(dá)增加。（4）4-8月齡給予褪黑素，12月齡檢測(cè)Ab的生成，tau蛋白磷酸化和GSK-3b活性