納豆激酶的酶學特性及其微膠囊的制備研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、納豆激酶是由枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶,它主要的功能是溶解血栓,也作為新一代的溶栓藥物得到相應的發(fā)展與研究。本文主要對納豆激酶的酶學特性以及海藻酸鈉對其包埋制備微膠囊的工藝優(yōu)化以及微膠囊穩(wěn)定性的研究。
  采用SDS-PAGE法以及Zeta電位法分別測得納豆激酶的分子量為28 kDa以及等電點為8.58。采用纖維蛋白-瓊脂糖平板法測定納豆激酶的酶活,得到納豆激酶的酶活為62520 U/g。納豆激酶在不同的加熱溫度時,溫度越

2、高,其酶活越低。在pH6.5的緩沖溶液中,納豆激酶的相對酶活為最高。在40℃的水浴中,保溫不同的時間,納豆激酶在保溫60 min時,達到最高的酶活。NaCl在濃度低于1.35 mol/L時,對納豆激酶的酶活起到促進作用,但是高于此濃度時,納豆激酶的酶活明顯的受到了抑制;Mg2+、Ca2+對納豆激酶有促進作用;Cu2+、Zn2+對納豆激酶的活性有抑制作用;Fe2+對納豆激酶的抑制作用,即使在較低的濃度時對納豆激酶的酶活穩(wěn)定性的抑制作用也十

3、分的明顯。
  使用海藻酸鈉包埋納豆激酶制備微膠囊的單因素最佳工藝條件是:海藻酸鈉的濃度為1.60%,羧甲基纖維素鈉的濃度為0.50%,CaCl2濃度為0.30%。正交實驗所得的最佳工藝條件是:海藻酸鈉的濃度為1.80%,羧甲基纖維素鈉的濃度為0.50%,CaCl2濃度為0.30%。
  對包埋的納豆激酶與游離狀態(tài)下的納豆激酶酶學性質(zhì)的比較,在不同的溫度以及不同的pH下,包埋的納豆激酶比游離的納豆激酶的相對酶活要高。并且在酶

4、活溫度為50℃時,游離的納豆激酶的相對酶活是51.69%,包埋的納豆激酶的相對酶活為71.67%;在pH8.5的條件下,游離的納豆激酶的相對酶活是38.09%,包埋納豆激酶的相對酶活是55.99%。經(jīng)過包埋的納豆激酶,其酶活受到了一定程度的保護。因此,經(jīng)過海藻酸鈉包埋的納豆激酶可以較好的保護酶的活性,免受外界環(huán)境的影響。同樣,關于混合多糖的研究發(fā)現(xiàn),海藻酸鈉/CMC包埋的納豆激酶,有以下優(yōu)點:粒徑小、外觀規(guī)則并且酶活的回收率高、硬度強。

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