mba論文內(nèi)蒙土壤蟲(chóng)生真菌的分離鑒定及rnai工程菌株構(gòu)建pdf

1、分類號(hào)：S482.39 密級(jí)：無(wú) 碩士學(xué)位論文 碩士學(xué)位論文 內(nèi)蒙土壤蟲(chóng)生真菌的分離鑒定 及 RNAi 工程菌株構(gòu)建 吳 偉 第 一 指 導(dǎo) 教 師 ： 第 一 指 導(dǎo) 教 師 ： 胡瓊波 副教授 第 二 指 導(dǎo) 教 師 ： 第 二 指 導(dǎo) 教 師 ： 秦長(zhǎng)生 研究員 學(xué) 院 名 學(xué) 院 名 稱: 農(nóng)學(xué)院 專 業(yè) 學(xué) 位 類 別 ： 專 業(yè) 學(xué) 位 類 別 ： 農(nóng)業(yè)推廣碩士 領(lǐng) 域 ： 域 ： 植物保護(hù) 答辯委員會(huì)主席：

2、答辯委員會(huì)主席： 邱寶利 教授 中國(guó)· 廣州 2016 年 6 月 摘 要 蟲(chóng)生真菌廣泛用于害蟲(chóng)生物防治，具有安全，無(wú)污染，不易形成抗性等優(yōu)點(diǎn)，是發(fā)展害蟲(chóng)綠色防控技術(shù)的一種重要選擇。土壤是一個(gè)巨大的蟲(chóng)生真菌菌種庫(kù)，從土壤中分離、鑒定和篩選昆蟲(chóng)病原真菌是真菌殺蟲(chóng)劑研發(fā)的重要措施。基因改良能有效提高蟲(chóng)生真菌的殺蟲(chóng)效果，針對(duì)目標(biāo)害蟲(chóng)的 RNAi 敏感基因，在蟲(chóng)生真菌中表達(dá)該基因的 dsRNA 片斷，是一種新的蟲(chóng)生真菌基因改良途

3、徑。 本文從內(nèi)蒙古自治區(qū)不同地區(qū)采集了 26 個(gè)土壤樣品，從中分離了 26 個(gè)菌株，并對(duì)其進(jìn)行了鑒定，測(cè)定了其中五個(gè)菌株對(duì)煙粉虱的生物活性。并且，以斜紋夜蛾SlDorsal 基因?yàn)榘谢?，?gòu)建了沉默載體，并轉(zhuǎn)化球孢白僵菌 Beuaveria bassiana，獲得了一株對(duì)斜紋夜蛾具有較強(qiáng)生物活性的工程菌株。具體研究結(jié)果如下： 主要依據(jù)菌落、分生孢子與產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)性狀，以及分子生物學(xué)方法比對(duì)分析 ITS1-5.8S-ITS4 rDNA

4、 基因和 β-微管蛋白基因的同源性，對(duì)所分離的菌株進(jìn)行了鑒定，其中，MS-10、MS-12、MS-15 為淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus；MS-25 菌株確定為球孢白僵菌 B. bassiana；MS-01、MS-06、MS-19 為蠟蚧菌 Lecanicillium attenuatum； MS-02、 MS-03、 MS-05、 MS-08、 MS-13、 MS-16、 MS-18、 MS-22、 MS-2

5、3、MS-24 為蠟蚧菌 Lecanicillium muscarium；MS-14 為肉色筍殼菌 Peniophora incarnata；MS-20 為頂孢霉 Schizophyllum commune；MS-04、MS-07、MS-21 屬于枝孢菌屬Cladosporium，MS-26 屬于裂褶菌霉屬 Acremonium，尚無(wú)法鑒定到種；而 MS-09 和MS-17 菌株形態(tài)上疑似擬青霉屬 Paecilomyces，但未擴(kuò)增到相

6、應(yīng)的基因序列，尚無(wú)法鑒定。 測(cè)定了其中五個(gè)菌株 MS-25、MS-12、MS-15、MS-18、MS-10 對(duì)二齡煙粉虱的致病力， 在孢子懸浮液濃度為 108 spores/mL， 處理后第 10 天 MS-12、 MS-15、 MS-18、MS-25、 MS-10 菌株對(duì)煙粉虱的校正死亡率分別達(dá)到了 92.4%、 91.6%、 89.9%、 88.1%、86.7%，MS-18 和 MS-15 致死中時(shí)間 LT50 為 4.5 d，MS