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1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文鈣調(diào)蛋白對豚鼠心室肌細(xì)胞Cav1.2鈣通道的劑量依賴性和鈣依賴性作用姓名:韓冬云申請學(xué)位級別:博士專業(yè):藥理學(xué)指導(dǎo)教師:李金鳴20070401·中文論著摘要·鈣調(diào)蛋白對豚鼠心室肌細(xì)胞C a v l .2 鈣通道的劑量依賴性和鈣依賴性作用刖 吾電壓門控型L 型鈣通道是介導(dǎo)鈣離子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的重要途徑,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)多種鈣依賴性調(diào)控過程的發(fā)生,如興奮產(chǎn)生、肌肉收縮、激素和神經(jīng)遞質(zhì)的分泌及基因表達(dá)等。
2、L 型鈣通道的一個重要特征是n m d o v m ,主要表現(xiàn)為細(xì)胞膜被破壞后通道活性的喪失,在i n s i d e .o u t 的膜片中比較容易觀察到r u n d o w n 。本課題組近期實驗表明鈣調(diào)蛋白( C a l m o d u l i n , C a M ) 和三磷酸腺苷( A T P ) 是能夠逆轉(zhuǎn)鈣通道r u n d o w n 的重要活性因子。C a M 是廣泛存在于細(xì)胞內(nèi)的一種重要的鈣結(jié)合蛋白,在心肌細(xì)胞,它可
3、以直接或間接調(diào)節(jié)心肌興奮收縮偶聯(lián)以及其它重要的生理過程。心臟L 型鈣通道( C a v l .2 ) 是C a M 作用的重要靶點,通過與鈣通道a I 亞單位的C 末端結(jié)合來介導(dǎo)鈣依賴性失活( C a 2 * _ d e p e n d e n t I n a c t i v a t i o n , C D I ) 和鈣依賴性激活( C a 2 + - d e p e n d e n t F a c i l i t a t i o n
4、, C D F ) 兩個不同的過程。近年的研究提示C a M 與L 型鈣通道的直接結(jié)合是介導(dǎo)C D I 和C D F 的首要步驟。C a M 在細(xì)胞內(nèi)以兩種形式存在,即無鈣C a M ( a p o C a M ) 和鈣結(jié)合型C a M( C a 2 + /C a l V [ ,包括c a 2 + 飽和型和非飽和型C a M ) 。據(jù)報道,a p o C a M 結(jié)合于L 型鈣通道并對通道的C D I 和C D F 起到c a 2 +
5、感受器的作用。C a M 對C D I 和C D F 的雙向調(diào)節(jié)作用提示在L 型鈣通道C 末端可能存在C a M 的多個結(jié)合位點。目前在提出的數(shù)個C a M 結(jié)合序列中,I Q 基序被證實為C D I 和C D F 所必需的序列。此外,其它序列如A 基序、C 基序、E F h a n d 和N 末端等均可與C a M 結(jié)合,由此可見,C a M 介導(dǎo)的對鈣通道調(diào)控的分子機(jī)制是非常復(fù)雜的。本實驗利用膜片鉗內(nèi)面向外模式觀測了C a M 對L
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