模擬微重力影響cd3439;細(xì)胞分化及其調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究

1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文模擬微重力影響CD34細(xì)胞分化及其調(diào)控機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名：劉競爭申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：王前20080312中文摘要B F U ．E 和C F U ．E ，再進(jìn)一步分化為形態(tài)可識(shí)別的原紅細(xì)胞和下一級(jí)幼稚紅細(xì)胞，然后經(jīng)過網(wǎng)織紅細(xì)胞階段變?yōu)槌墒旒t細(xì)胞。在人類，上述過程需要1 周。在此過程中涉及多種基因尤其是紅系造血生長因子及轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控，其中轉(zhuǎn)錄因子G A T A ．1 為紅系造血的關(guān)鍵因子

2、。G A T A ．1 是具有鋅指結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子，在紅系基因的表達(dá)起著中心調(diào)節(jié)作用，在幾乎所有紅系特異性基因的啟動(dòng)子或增殖子序列中均能找到G A T A ．1 識(shí)別和結(jié)合的基序。以往關(guān)于微重力對造血系統(tǒng)的影響的研究主要集中對航天員血液指標(biāo)和造血調(diào)節(jié)系統(tǒng)的檢測，及對微重力和模擬微重力環(huán)境下的造血細(xì)胞生物學(xué)特性及細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變的考察，而其影響造血細(xì)胞改變的機(jī)制尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)以觀察模擬微重力影響C D 3 4 + 細(xì)胞分化改變的規(guī)律及探討其

3、影響分化改變的機(jī)制為主要目的，具體為：( 1 ) 廣泛復(fù)習(xí)國內(nèi)外相關(guān)研究文獻(xiàn)，利用模擬微重力裝置( R C C S ) 建立模擬微重力培養(yǎng)C D 3 4 + 細(xì)胞地面模型，通過流式細(xì)胞儀檢測分析，觀察模擬微重力影響C D 3 4 + 細(xì)胞分化的規(guī)律。( 2 ) 在建立模擬微重力培養(yǎng)C D 3 4 + 細(xì)胞的地面模型基礎(chǔ)之上，檢測紅系細(xì)胞分化中重要轉(zhuǎn)錄因子G A T A ．1 基因表達(dá)量，以期尋找模擬微重力影響造血細(xì)胞分化改變的機(jī)制。方法

4、( 1 ) C D 3 4 + 細(xì)胞的獲得及培養(yǎng)：采用F i c o l l 分離液和免疫磁珠分離純化臍血中C D 3 4 + 細(xì)胞。C D 3 4 + 細(xì)胞的培養(yǎng)有：第一類培養(yǎng)，C D 3 4 + 細(xì)胞分為模擬微重力( R C C S ) 組、1 ．g 液態(tài)對照組及1 一g 半固體對照組三組進(jìn)行完全分化培養(yǎng)；第二類培養(yǎng)，C D 3 4 + 細(xì)胞分為微重力( R C C S ) 組和1 ．g 液態(tài)培養(yǎng)組，經(jīng)過短期培養(yǎng)后，流式細(xì)胞儀分選出