垃圾和滲濾液中微生物群落分子生態(tài)學(xué)初步研究.pdf

1、微生物群落在生活垃圾降解過程中起著重要作用，生活垃圾中微生物群落變化的研究一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn)。隨著分子生態(tài)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，揭示生活垃圾中微生物群落構(gòu)成成為可能。
　　 目的：建立固體垃圾及其滲濾液中微生物總DNA的提取方法，采用基于rDNA 同源性分析的分子生態(tài)學(xué)方法研究垃圾填埋過程中微生物群落在不同時(shí)空及環(huán)境條件下的演替過程。
　　內(nèi)容及方法：(1)通過核酸總量、純度、片段分布情況、PCR擴(kuò)增指標(biāo)來評(píng)價(jià)不同的提取方法對(duì)

2、從垃圾和滲濾液樣品中提取總DNA的效果，得到較適合垃圾和滲濾液總DNA的提取方法。(2)采用傳統(tǒng)微生物學(xué)方法、核糖體DNA限制性酶切分析(amplified ribosomal DNA restriction analysis，ARDRA)和核糖體基因間區(qū)序列分析(ribosomal intergenic spacer analysis，RISA)分析評(píng)價(jià)固體垃圾及其滲濾液的微生物多樣性。(3)采用RISA分析方法研究厭氧－好氧生物反應(yīng)

3、器填埋場(chǎng)微生物生態(tài)。
　　 結(jié)果：(1)從垃圾和滲濾液中均提取得到高質(zhì)量的總DNA，DNA分子片段在23kb左右，A260/A280大于1.9，A260/A230大于2.0，不需經(jīng)過純化直接用于PCR擴(kuò)增；(2)傳統(tǒng)微生物方法、ARDRA和RISA分析均顯示出固體垃圾比滲濾液具有更為豐富的微生物多樣性，也顯示了傳統(tǒng)方法的局限性；(3)厭氧－好氧反應(yīng)過程經(jīng)PCR擴(kuò)增ITS片段得到RISA圖譜，厭氧階段有4個(gè)優(yōu)勢(shì)類群，一些兼性菌類群