thp1細(xì)胞內(nèi)pparα基因沉默對c.pn誘導(dǎo)thp1源性泡沫細(xì)胞形成的影響

1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文Thp-1細(xì)胞內(nèi)PPARα基因沉默對C.pn誘導(dǎo)Thp-1源性泡沫細(xì)胞形成的影響姓名：文雯申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：老年醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：成蓓2011-05華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 3第二部分 Thp-1 細(xì)胞內(nèi) PPARα基因沉默對 C.pn 誘導(dǎo) thp-1 源性泡沫細(xì)胞形成的影響 背景： 背景：過氧化物酶體增殖物活化受體 （PPARs）在調(diào)控巨噬細(xì)胞膽固醇代謝中起著關(guān)鍵作用。 膽固醇代謝穩(wěn)態(tài)

2、的失衡貫穿于泡沫細(xì)胞形成的整個過程。 巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯堆積導(dǎo)致泡沫細(xì)胞形成是動脈粥樣硬化的病理特征。 目前研究結(jié)果顯示肺炎衣原體 C.pn 能破壞巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇代謝穩(wěn)態(tài)而誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞的形成。提示 PPARα 可能在 C.pn 誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞形成中起重要作用。 目的： 目的：本研究意在研究C.pn誘導(dǎo)形成泡沫細(xì)胞過程中PPARα所發(fā)揮的作用。 方法：方法：THP-1 細(xì)胞加160 nmol /L PMA孵育48 h，誘導(dǎo)其分化為巨噬細(xì)

3、胞后，隨機(jī)化分為五組：① 陰性對照組：給予50 µg / ml 低密度脂蛋白（LDL）的培養(yǎng)基培養(yǎng)48 h；②陽性對照組：給予50 µg / ml 氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的培養(yǎng)基孵育48 h；③C.pn感染組：在負(fù)荷LDL（50 µg / ml）的條件下，分別給予1×106 IFU C.pn感染48 h；④ 干擾對照組：PPARα干擾后給予含50 µg/ml LDL 和10﹪F

4、BS 的RPMI1640 培養(yǎng)基孵育48 h；⑤ 干擾感染組：PPARα干擾后，在負(fù)荷50 µg/ml LDL和10﹪FBS的RPMI1640 培養(yǎng)基的條件下，給予C.pn感染48 h；酶比色法分別檢測各組細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯（CE）含量和總膽固醇（TC）的變化；Real time-PCR和Western-blot檢測各組SR-A1、CD36、ACAT1、ABCA1、ABCG1 mRNA和蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 結(jié)果：與陰性對照組相比較

5、，陽性對照組，干擾組、感染組和干擾感染組在處理48小時后，CE/TC 明顯上調(diào)，SR-A1、ACAT1 mRNA和蛋白表達(dá)逐漸上調(diào)，而且CD36和ABCA1、ABCG1 mRNA和蛋白表達(dá)逐漸下降（p 0.05）。 結(jié)論：PPARα基因沉默導(dǎo)致C.pn誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞形成加劇，說明PPARα在C.pn誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞過程中起到拮抗作用， 為臨床治療動脈粥樣硬化提供了治療的靶點。 關(guān)鍵詞：肺炎衣原體；清道夫受體A1；ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1；