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1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文1.低濃度MNNG激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及其對EGFR通路的影響;2.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與低濃度DNA加成性損傷劑誘發(fā)的細胞應(yīng)答反應(yīng)姓名:劉更申請學(xué)位級別:博士專業(yè):生理學(xué)(病理生理學(xué))指導(dǎo)教師:余應(yīng)年20051201浙江大學(xué)博士學(xué)位論文 劉更低濃度M N N G 激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及其對表皮生長因子受體通路的影響浙江大學(xué)導(dǎo)師:博士研究生:病理生理學(xué)余應(yīng)年劉更摘 要單功能烷化劑N 一甲基- N - 硝基一N .亞硝基胍( M N N
2、G ) 是一種在實驗室中普遍使用的~種模式化學(xué)誘變劑和致癌劑,用于研究環(huán)境中廣泛存在的N 一亞硝氨類誘變劑和致癌劑的致癌機制,它能和D N A 及蛋白質(zhì)等生物大分子形成加合物( a d d u c t ) ,其引起的與突變有關(guān)的主要D N A 損傷是0 6 - 甲基鳥嘌嶺,這種損傷與許多腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。但是D N A 損傷并不是引起突變的必要條件,環(huán)境誘變劑引起的突變也可發(fā)生在非D N A 損傷部位,即非定標(biāo)性突變( n o n t
3、a r 囂t e dm u t a g e n e s i s ) 。我們實驗室曾用一特殊的突變檢測系統(tǒng),直接證明D N A 損傷劑可在哺乳動物細胞誘發(fā)非定標(biāo)性突變:首先用低濃度( O .2 H M ) 的短壽烷化劑^ 帥I G ( 半壽期為1 ,1 1 1 r ) 處理細胞2 .5 h 后,繼續(xù)培養(yǎng)2 4 h ,將重組有用作突變檢測的靶基因s 印凡R N A 基因的穿梭質(zhì)粒p z l 8 9 轉(zhuǎn)入細胞復(fù)制,發(fā)現(xiàn)在未受致癌物直接攻擊的穿
4、梭質(zhì)粒中有較自發(fā)突變率高5 倍以上的靶基因突變。這種突變并非在接受M :N N G 攻擊以后立刻出現(xiàn),而是具有時相依存性,在致癌物攻擊后其發(fā)生率逐漸升高,在1 2 h 達最高峰,以后逐漸下降。且突變譜明顯不同于由M N N G 直接攻擊引起的定標(biāo)性突變,有其突變好發(fā)部位的序列特異性。本實驗室還證明在低濃度M N N G 誘發(fā)的細胞非定標(biāo)性突變依賴于基因表達改變,并證明在M N N G 處理細胞中有廣泛的基因表達改變,伴有D N A 復(fù)制
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