細(xì)菌的純種分離_第1頁(yè)
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1、細(xì)菌的純種分離、培養(yǎng)和接種技術(shù)及菌落形態(tài)的觀察細(xì)菌的純種分離、培養(yǎng)和接種技術(shù)及菌落形態(tài)的觀察班級(jí):09環(huán)科二班姓名:李建文學(xué)號(hào):200930260213一、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模海?)熟悉玻璃器皿的洗滌和滅菌前的準(zhǔn)備工作。(2)了解配制微生物培養(yǎng)基的基本原理,掌握常規(guī)的配制、分裝培養(yǎng)基的方法。(3)學(xué)會(huì)各類(lèi)物品的包裝、配制(稀釋水等)和滅菌技術(shù)。(4)從湖水中分離、培養(yǎng)微生物,掌握常用的分離微生物的方法。(5)學(xué)會(huì)接種技術(shù)。(6)觀察

2、分離出來(lái)的幾種細(xì)菌的個(gè)體形態(tài)及與其相應(yīng)的菌落形態(tài)特征。(7)通過(guò)觀察和比較細(xì)菌、放線菌、酵母菌及霉菌四大類(lèi)微生物的菌落特征,達(dá)到初步鑒別上述微生物的能力二、二、實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:1、培養(yǎng)基原理、培養(yǎng)基原理:培養(yǎng)基是微生物生長(zhǎng)的基質(zhì),是按照微生物營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)繁殖的需要,由碳、氫、氧、氮、磷、硫、鉀、鈉、鈣、鎂、鐵及微量元素和水,按一定的體積分?jǐn)?shù)配制而成。調(diào)整合適的pH,經(jīng)高溫滅菌后以備培養(yǎng)微生物之用。本實(shí)驗(yàn)配制固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的成分

3、與液體相同,僅在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑使呈固態(tài)。通常加入質(zhì)量濃度1520g∕L的瓊脂為固體培養(yǎng)基。2、滅菌原理、滅菌原理:本次實(shí)驗(yàn)采取加壓蒸汽滅菌法。加壓蒸汽滅菌器是能耐一定壓力的密閉金屬鍋,加壓滅菌的原理在于提高滅菌器內(nèi)的蒸汽溫度來(lái)達(dá)到滅菌的目的。玻璃器皿自然晾干或放入干燥箱中烘干、備用。2、包裝、包裝(1)移液槍和槍頭的包裝:移液管的吸端用細(xì)鐵絲(或牙簽)將少許棉花塞入構(gòu)成11.5cm長(zhǎng)的棉塞,起過(guò)濾作用(以防細(xì)菌吸入口中,并避免將

4、口中細(xì)菌吹入管內(nèi))。棉塞要塞的松緊適宜,吸時(shí)既能通氣,又不致使棉花滑入管內(nèi)。然后將塞好棉花的移液管的尖端,放在45cm寬的長(zhǎng)紙條的一端,移液管與紙條約成30度夾角,折疊包裝紙包住移液管的尖端,用左手將移液管壓緊,在桌面上向前搓轉(zhuǎn),紙條螺旋式地包在移液管外面,余下的紙折疊打結(jié),待滅菌。(2)培養(yǎng)皿的包裝:培養(yǎng)皿由一底一蓋組成一套,用牛皮紙或報(bào)紙將10套培養(yǎng)皿(皿底朝里,皿蓋朝外,5套、5套相對(duì)而放)包好。(3)硅膠塞:。硅膠塞四周應(yīng)緊貼管

5、壁和瓶壁,不能有折皺,以防空氣微生物沿硅膠塞折侵入。硅膠塞的直徑和長(zhǎng)度視試管和錐形瓶的大小而定,一般約3∕5塞入管內(nèi)。試管、錐形瓶塞好硅膠塞后,用牛皮紙包裹并用細(xì)繩或橡皮筋捆扎好,放在銅絲簍內(nèi)待滅菌。(二)培養(yǎng)基的配制(二)培養(yǎng)基的配制1.1.配制溶液配制溶液取一定容量的燒杯盛入100mL蒸餾水(有時(shí)也可用自來(lái)水),按培養(yǎng)基配方(0.5g牛肉膏、1g蛋白胨、0.5gNaCl、2.0g瓊脂)逐一稱(chēng)取各種成分,依次加入水中溶解。蛋白胨、肉膏

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