蠶豆根尖細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)

1、蠶豆根尖細(xì)胞微核技術(shù)檢測(cè)洗衣粉的毒性蠶豆根尖細(xì)胞微核技術(shù)檢測(cè)洗衣粉的毒性姓名：馬麗同組者：李哲指導(dǎo)教師：郝雪峰（太原師范學(xué)院生物系112班）摘要微核（micronucleusMCN）是真核生物細(xì)胞經(jīng)各種理化因子作用后引起染色體畸變，在間期細(xì)胞中的一種表現(xiàn)形式。在細(xì)胞間期，微核呈圓形或橢圓形，游離于主核之外，大小應(yīng)在主核13～120，染色與主核一樣或稍淺。一般認(rèn)為微核是由無(wú)著絲粒的染色體斷片或落后染色體，在分裂末期不能進(jìn)入主核，便形成了主

2、核之外的核塊。當(dāng)子細(xì)胞進(jìn)入下一次分裂間期時(shí)，它們便濃縮成主核之外的小核，即微核。[1]AbstractMicronucleus(MCNmicronucleus)iseukaryoticcellsbyvariousphysicalchemicalfactscausedbychromosomeaberrationinafmofinterphasecells.Ininterphasecellsmicronucleusassumesthecir

3、cularellipticfreefromthemainnuclearnuclear13~120sizeshouldbeinthemaindyeingthemainnuclearasslightlyshallow.Generallyconsideredmicrokernelbyacentricchromosomefragmentlaggingchromosomesinthelatedivisioncouldnotenterthenucl

4、eusfmedthemainnuclearnuclearblock.Whenthecellsintothenextphasesplitbetweentheycondenseintomainsmallnuclearnuclearnamelythemicrokernel.[1]關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞蠶豆根尖微核洗衣粉染色體畸變千分率KeywdBroadbeanroottipMicronucleusWashingpowderChromosomalabe

5、rrationPermillage引言掌握蠶豆根尖細(xì)胞微核檢測(cè)技術(shù)的一般方法。并利用蠶豆根尖細(xì)胞微核檢測(cè)技術(shù)對(duì)洗衣粉的毒性狀況給出客觀的評(píng)價(jià)，同時(shí)表明蠶豆根尖細(xì)胞MCN對(duì)脅迫很敏感，蠶豆根尖微核技術(shù)可用于洗漱用品的安全監(jiān)測(cè)。蠶豆是一種很好的細(xì)胞遺傳學(xué)研究材料。它的染色體為六對(duì)相當(dāng)大的染色體，而且根尖含有較多的分裂相細(xì)胞，非常適合顯微觀察。目前，蠶豆根尖微核技術(shù)在環(huán)境致突變性檢測(cè)監(jiān)測(cè)方面已經(jīng)形成了一套完整的體系。它的可靠性和靈敏性較高，且

6、本底較低，這對(duì)于一種致突變性檢測(cè)方法是十分重要的。此外，它的檢測(cè)物譜較廣。目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，在鏡檢細(xì)胞微核時(shí)，應(yīng)按下列標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)微核：（1）凡主核大小13以下，與主核分離的小核；1.3.3被檢測(cè)液處理根尖各取10粒，分別用蒸餾水（自來(lái)水）和毒液培養(yǎng)種子1.5天。1.3.4根尖細(xì)胞恢復(fù)培養(yǎng)處理后的種子用蒸餾水（自來(lái)水）浸洗3次，每次2～3min；將處理液洗凈后，置于干凈培養(yǎng)皿恢復(fù)22～24h；同時(shí)均設(shè)蒸餾水處理為空白對(duì)照組。以上各步操作溫度

7、均在常溫下進(jìn)行。1.3.5根尖細(xì)胞固定將恢復(fù)后的種子，從根尖頂端切下1cm左右長(zhǎng)的幼根，用卡諾氏液固定10～12h。1.3.6酸解用蒸餾水浸洗固定好的幼根3次，每次5min，吸凈蒸餾水，加入鹽酸酒精解離液60℃下酸解6～8min，幼根軟化即可。1.3.7染色吸去鹽酸，用蒸餾水浸沒(méi)幼根3次，每次1～2分鐘。最后浸于水中。制片前取出置載玻片上，截下1～2mm左右長(zhǎng)的根尖，滴12滴改良苯酚品紅染液染色20min，之后方可壓片觀察。1.3.8壓

8、片觀察對(duì)各種不同處理的根尖分生組織進(jìn)行常規(guī)壓片，每個(gè)處理各取3個(gè)根尖壓片。在高倍鏡下觀察壓片根尖分生區(qū)細(xì)胞分散良好的區(qū)域，并統(tǒng)計(jì)不少于1000個(gè)細(xì)胞中的微核數(shù)，然后再統(tǒng)計(jì)算出每個(gè)根尖的MCN‰。[3]2.2.結(jié)果結(jié)果2.1標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定[4]對(duì)于蠶豆微核實(shí)驗(yàn)中微核千分率的計(jì)算可采用以下公式：MCN‰=某測(cè)試樣點(diǎn)（或?qū)φ战M）觀察到的MCN數(shù)／某測(cè)試樣點(diǎn)（或?qū)φ战M）觀察到的細(xì)胞數(shù)1000‰對(duì)于污染指數(shù)（PI）的計(jì)算可采用以下公式：PI=實(shí)驗(yàn)組MS