蘋(píng)果組織的培養(yǎng)與快繁

1、蘋(píng)果組織的培養(yǎng)與快繁摘要；摘要；蘋(píng)果的組織培養(yǎng)是采用無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)將來(lái)自?xún)?yōu)良植物的莖尖、腋芽、葉片、等器官以及他們的組織切片進(jìn)行離體培養(yǎng)使之在短期內(nèi)獲得大量遺傳性一致的個(gè)體的方法。1蘋(píng)果矮化砧蘋(píng)果矮化砧組織組織培養(yǎng)培養(yǎng)（1）材料方法：蘋(píng)果矮化砧GM256，春季芽萌動(dòng)后取田間的枝條將萌發(fā)的新芽用自來(lái)水沖洗后75%酒精0.5～1min0.1%升汞5min然后剝?nèi)?.5mm左右長(zhǎng)的莖尖接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。以MS為基本培養(yǎng)基pH值為5.8培養(yǎng)室溫

2、度24℃濕度60%左右。將初代培養(yǎng)出的芽接種到增殖培養(yǎng)基上連續(xù)繼代(每次25～30d)2次。將長(zhǎng)至2cm左右的試管苗接入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根。（2）結(jié)果：①外植體誘導(dǎo)。外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中在正常的光照培養(yǎng)條件下均不能誘導(dǎo)出芽暗培養(yǎng)20d和30d的黃化苗經(jīng)光照后很快變綠正常生長(zhǎng)。而暗培養(yǎng)40d的黃化苗玻璃化嚴(yán)重經(jīng)光照后也很難正常生長(zhǎng)。誘導(dǎo)培養(yǎng)基中60d后，當(dāng)BA濃度低于2mgLNAA濃度高于1mgL時(shí)不利于矮化砧芽的誘導(dǎo)。IBA也不適

3、宜矮化砧芽的誘導(dǎo)。適宜的濃度和種類(lèi)是:MSBA2mgLNAA0.1mgL。②增殖。誘導(dǎo)培養(yǎng)出的芽接種到增殖培養(yǎng)基上連續(xù)繼代(每次25～30d)2次在MSBA2.0mgLNAA0.05mgL和MSBA3.0mgLNAA0.10mgL上苗生長(zhǎng)健壯增殖快可增殖5～6倍。BA濃度為1.0和1.5NAA濃度為0.1mgL時(shí)試管苗增殖少只增殖1～2倍有葉片黃化玻5560%。3蘋(píng)果脫毒蘋(píng)果脫毒組培（1）材料方法：①材料：早春，將上年芽接或切接的盆栽長(zhǎng)

4、富2號(hào)蘋(píng)果苗移人溫室，待新梢長(zhǎng)出3～5片新葉時(shí)，放人熱處理箱中，37℃恒溫?zé)崽幚?0d或32℃與37℃每8h變換一次，變溫?zé)崽幚?0d。脫毒率可達(dá)80％以上。熱處理結(jié)束后，從盆栽苗嫩梢上采集生長(zhǎng)旺盛、長(zhǎng)約2～3cm頂梢，流水沖洗5～10min，去掉小葉。70％乙醇浸泡30S，蒸餾水沖洗后放人01％HgCl2中消毒10min，無(wú)菌水沖洗3～5次，解剝鏡下迅速剝?nèi)?0mm的莖尖進(jìn)行分離培養(yǎng)，接種于起始培養(yǎng)基上。②培養(yǎng)基：起始培養(yǎng)基以Ms為基

5、本的培養(yǎng)基，附加6一BA和NAA，白糖3％，瓊脂036％，pH58。培養(yǎng)條件溫度26～30℃，光照強(qiáng)度15002000Lx，，10h／d。（2）結(jié)果：①芽誘導(dǎo)。適宜蘋(píng)果芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS6BAl0mg／LNAA01mg／L。誘導(dǎo)的芽生長(zhǎng)正?？煽òl(fā)育成新梢。②繼代培養(yǎng)。選擇誘導(dǎo)的芽叢切割成單芽莖段，轉(zhuǎn)接于設(shè)計(jì)的繼代培養(yǎng)基上，適宜的蘋(píng)果繼代培養(yǎng)基為：MS6一BAl0mg／LNAA005mg／L。自糖4％，瓊脂036mg／I。。培養(yǎng)條件為光