凝膠層析法的基本原理

1、1.凝膠層析法的基本原理？凝膠層析法的基本原理？答：層析須在兩相系統(tǒng)間進(jìn)行。一相是固定相，需支持物，是固體或液體。另一相為流動相，是液體或氣體。當(dāng)流動相流經(jīng)固定相時，被分離物質(zhì)在兩相間的分配，由平衡狀態(tài)到失去平衡到又恢復(fù)平衡，即不斷經(jīng)歷吸附和解吸的過程。2.凝膠層析法常用凝膠的種類和特點？聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成凝膠，是以丙烯酰胺為單位，由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的，凝膠色譜法經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號

2、的凝膠。交聯(lián)劑越多，孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠－P（BioGelP），由日本tosoh的TSKGEL的pw系列，適合蛋白和多糖的純化。交聯(lián)葡聚糖凝膠⑴SephadexG交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephadex，不同規(guī)格型號的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。例如，G25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克，同樣G200克每克干膠吸水20克。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G10，G15，G25，G50，G75，G100

3、，G150，和G200。因此，“G”反映，凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分部范圍。⑵SephadexLH20，是─SephadexG25的羧丙基衍生物，能溶于水及親脂溶劑，用于分離不溶于水的物質(zhì)。瓊脂糖凝膠商品名很多，常見的有，Sepharose（瑞典，pharmacia），管束中溶液的相對汽化率就大于中央循環(huán)管的汽化率，所以管束中的氣液混合物的密度遠(yuǎn)小于中央循環(huán)管內(nèi)氣液混合物的密度。這樣造成了混合液在管束中向上，在中央循環(huán)管向下的自然循環(huán)

4、流動?；旌弦旱难h(huán)速度與密度差和管長有關(guān)。密度差越大，加熱管越長，循環(huán)速度越大。但這類蒸發(fā)器受總高限制，通常加熱管為1～2m，直徑為25～75mm，長徑比為20～40。優(yōu)點：溶液循環(huán)好；傳熱效率高；結(jié)構(gòu)緊湊、制造方便、操作可靠。缺點：循環(huán)速度低；溶液粘度大、沸點高；不易清洗。適于處理結(jié)垢不嚴(yán)重、腐蝕性小的溶液。2.懸筐式蒸發(fā)器懸筐式蒸發(fā)器是中央循環(huán)管蒸發(fā)器的改進(jìn)。其加熱室像個懸筐，懸掛在蒸發(fā)器殼體的下部，可由頂部取出，便于清洗與更換。加

5、熱介質(zhì)由中央蒸汽管進(jìn)入加熱室，而在加熱室外壁與蒸發(fā)器殼體的內(nèi)壁之間有環(huán)隙通道，其作用類似于中央循環(huán)管。操作時，溶液沿環(huán)隙下降而沿加熱管上升，形成自然循環(huán)。一般環(huán)隙截面積約為加熱管總面積的100～150%，因而溶液循環(huán)速度較高(約為1～1.5ms)。由于與蒸發(fā)器外殼接觸的是溫度較低的沸騰液體，故其熱損失較小。3.外熱式蒸發(fā)器如圖54為常用的外熱式蒸發(fā)器，其主要特點是采用了長加熱管（管長與直徑之比），且液體下降管（又稱循環(huán)管），不100~5

6、0?Dl再受熱。這樣有利于液體在器內(nèi)的循環(huán)，循環(huán)速度可達(dá)1.5ms。優(yōu)點：降低了整個蒸發(fā)器的高度，便于清洗和更換；循環(huán)速度較高，使得對流傳熱系數(shù)提高；結(jié)垢程度小。適于處理易結(jié)垢、有晶體析出、處理量大的溶液。4.列文蒸發(fā)器結(jié)構(gòu)特點：在特點是在加熱室上部設(shè)置沸騰室，加熱室中的溶液因受到附加液柱的作用，必須上升到沸騰室才開始沸騰，這樣避免了溶液在加熱管中結(jié)垢或析出晶體。優(yōu)點：流動阻力??；循環(huán)速度高；傳熱效果好；加熱管內(nèi)不易堵塞。53懸筐式蒸發(fā)