雙根清腦顆粒對(duì)血管性癡呆模型大鼠行為學(xué)及血清

1、1.基金項(xiàng)目：江蘇省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(BK2007243)2.李輝(1981)男，碩士研究生，中醫(yī)師，方向：中醫(yī)治則治法研究，主要從事中醫(yī)藥對(duì)腦血管疾病的研究。地址：南京中醫(yī)藥大學(xué)仙林校區(qū)123#信箱郵編：210046Email：lihuaqing2007@.Tel：02558115753.通訊作者：吳顥昕(1965－)男，副教授，博士，研究方向:中醫(yī)腦病的治則與治法研究Tel：0255811575Email：wuhaoxin@雙根

2、清腦顆粒雙根清腦顆粒對(duì)血管性癡呆模型大鼠行為學(xué)及對(duì)血管性癡呆模型大鼠行為學(xué)及血清血清超氧化物岐化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的影響超氧化物岐化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的影響1李輝，吳顥昕，岳曉杰，鄭鴻燕（南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院腦病研究所，南京210046）[摘要摘要]目的目的：觀察雙根清腦顆粒對(duì)血管性癡呆(VD)模型大鼠行為學(xué)及血清中超氧化物岐化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的影響，探討其干預(yù)VD的機(jī)理。方法方法：

3、采用栓子注入法制成VD大鼠模型，ig給予雙根清腦顆粒及腦復(fù)康15天，Mris水迷宮測(cè)定大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及血清中的SOD、NOS活性及MDA、NO的含量。結(jié)果結(jié)果：雙根清腦顆粒組大鼠逃避潛伏期和首次穿越平臺(tái)的時(shí)間明顯縮短(P0.05、P0.01)，中、小劑量組及腦復(fù)康組SOD活性升高，MDA含量降低(P0.05)，各用藥組SODMDA的比值均升高(P0.01)。各用藥組血清NO含量降低(P0.05、P0.01)，中、小劑量顯著降低NOS活

4、性(P0.01)。結(jié)論結(jié)論：雙根清腦顆?？娠@著改善VD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，提高血清SOD活力、降低血清MDA、NO的含量及NOS活性。摘要中的英文縮略語(yǔ)首次應(yīng)標(biāo)出中文意義。[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]雙根清腦顆粒；VD模型；超氧化物岐化酶；丙二醛；一氧化氮；一氧化氮合酶EffectsofShuanggenQinnaoGranulesonAnimalbehavisuperoxidedismutasemalondialdehydenitricoxi

5、deNitricoxidesynthaseinserumofvulardementiaratmodelsLIHuiWUHaoxinYUEXiaojieZHENGHongyan（NanjingUniversityofChineseMedicine，Nanjing210046，China）Abstract:Objective:ThepurposeofthisresearchistoexpletheeffectsthatShuanggenQi

6、ngnaoGranulestowardsvulardementia(VD)byobservinganimalbehavisuperoxidedismutasemalondialdehydenitricoxideNitricoxidesynthaselevelsinserumofVDratmodels.Methods:Vulardementia(VD)ratmodelscanbemadebyinjectingthesamekindsoft

7、hromboticembolitothecatheteroftheexternalcarotidartery.Mriswatermazetasktestisusedfmeasuringthelearningmemyability.ItcanalsomeasurethephotochemicalreactionfcontentsofSODinserumMDAaswellasNOSactivitynitratasemeathodfNOlev

8、els.Results:ThetimefShuanggenQingnaogranulestoescapethelatentperiodtocrosstheplatfmfthefirsttimewassignificantlyshtened(P0.05P0.01).SODactivityincreasedinMediumlowdoseRehabilitationgroups.theMDAcontentdecreased.Theratioo

9、fSODMDA(SODMDA)inthetreatedgroupshasallrisen（P＜0.01）BesidestheNOcontentsinthetreatedgroupsdecreased(P0.05P0.01).theNOSactivityinthemediumlowdosegroupsrose（P＜0.01）。Conclusion:ShuanggenQingnaoGranulescansignificantlyimprov

10、ethelearningmemyabilityoftheratswithVD.ItcanalsoincreaseSODactivity.MeanwhileitdecreasesMDANOcontentsaswellasNOSactivity.［收稿日期］20100128高度)：1230cm，水池高度:60cm，分四個(gè)不同項(xiàng)限且有導(dǎo)航標(biāo)，配備定時(shí)錄制視頻，平臺(tái)及池底均為黑色。房間四周有隔音、隔光窗簾。測(cè)試時(shí)，將平臺(tái)放于第3象限正中距池壁2

11、0cm處，加水至平臺(tái)高度后加入高于平臺(tái)1cm的牛奶液，溫度（240.5）℃，實(shí)驗(yàn)室溫度保持25℃。訓(xùn)練期間環(huán)境安靜，迷宮外參照物保持不變。2.4.1定位航行試驗(yàn)：測(cè)量大鼠對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶的獲取能力。實(shí)驗(yàn)歷時(shí)4d，受試動(dòng)物每日分別分別從1、2兩個(gè)象限入水點(diǎn)將大鼠頭向池壁放入水中，依次進(jìn)行訓(xùn)練，記錄其逃避潛伏期（從入水到找到安全平臺(tái)后停留5s為止的時(shí)間）。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)研究雄性大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力相對(duì)穩(wěn)定[4]，在經(jīng)過(guò)訓(xùn)練后如果60s內(nèi)找不到平

12、臺(tái)則在其后的時(shí)間找到平臺(tái)的機(jī)率將低于90%，因此我們采用了張愛林氏[5]的檢測(cè)方法，即測(cè)試最初2天為保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皆有可能找到平臺(tái)，將逃避潛伏期最長(zhǎng)設(shè)為90s，超過(guò)90s者以90s計(jì)。后2天的測(cè)試中將逃避潛伏期最長(zhǎng)設(shè)為60s，超過(guò)60s者以60s計(jì)。利用上海移數(shù)信息科技有限公司的動(dòng)物行為分析系統(tǒng)和Mris水迷宮視頻分析系統(tǒng)進(jìn)行圖象和數(shù)據(jù)分析。2.4.2空間搜索試驗(yàn)測(cè)量大鼠對(duì)平臺(tái)空間位置記憶的保持能力。在實(shí)驗(yàn)第5日撤去平臺(tái)，由第1象限入水點(diǎn)

13、將大鼠面向池壁放入水中，記錄其首次穿越平臺(tái)時(shí)間，超過(guò)60s以60s計(jì)。2.5大鼠血清SOD、MDA、NOS、NO的測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組大鼠于術(shù)后第15天治療結(jié)束后以0.8%的戊巴比妥鈉，按40mgKg腹腔注射麻醉，左心室內(nèi)取血5mL，置于肝素處理過(guò)的試管中，4℃2500rmin離心20min，取上清液待測(cè)。檢測(cè)步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書操作。2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：所有計(jì)量資料均用s表示，P0.05為差異有顯著性，行為學(xué)數(shù)據(jù)采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的X方差分析；

14、生化指標(biāo)采用單因素方差分析后進(jìn)行多組間兩兩比較，由spss16.0軟件完成。3結(jié)果結(jié)果3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量分析參加實(shí)驗(yàn)大鼠70只，67只進(jìn)入統(tǒng)計(jì)。雙根清腦顆粒組大劑量組有1只Mris水迷宮行為學(xué)測(cè)試時(shí)死亡，腦復(fù)康組有兩只ig灌胃時(shí)死亡。3.2雙根清腦顆粒對(duì)VD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響精煉3.2～3.4與表中內(nèi)容重復(fù)的文字描述重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析結(jié)果表明，各組間具有顯著性差異（F=1.452，P0.01）。定位航行試驗(yàn)中，模型組逃避潛伏期在

15、第2、3、4日明顯延長(zhǎng)(P0.05)，雙根清腦顆粒各組逃避潛伏期明顯減少(P0.05)?？臻g搜索試驗(yàn)中，模型組首次穿越平臺(tái)的時(shí)間明顯增加(P0.01)；各用藥組首次穿越平臺(tái)的時(shí)間皆減少(P0.05)，其中以小劑量組用時(shí)最少(P0.01)。見表1。表1的表頭應(yīng)標(biāo)出定位航行時(shí)間及單位標(biāo)示和首次穿越時(shí)間的單位標(biāo)示。表1雙根清腦顆粒對(duì)VD模型大鼠定位航行和空間搜索實(shí)驗(yàn)的影響(s)X組別n劑量∕gkg第一天第二天第三天第四天首次穿越時(shí)間正常105

16、7.226.148.129.842.431.127.416.110.85.7假手術(shù)1058.327.850.720.943.52028.515.37.33.8模型1075.131.7863.424.73）54.226.13）47.2183）26.516.73）SG（大）93671.630.160.532.743.930.21）25.714.61）12.86.71）SG（中）101257.534.452.927.61）42.728.31）