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1、1.革蘭氏染色的機(jī)理和步驟機(jī)理機(jī)理:G、G主要由其CW化學(xué)成分的差異而引起對(duì)乙醇的通透性,抗脫色能力的差異。主要有肽聚糖的厚度和結(jié)構(gòu)所決定。G的CW:肽聚糖層厚,脂質(zhì)含量低。乙醇脫色時(shí)CW脫水,孔徑減少,透性降低,不易脫色,呈初染得藍(lán)紫色。G的CW:肽聚糖層薄,脂質(zhì)含量高。乙醇脫色時(shí),類脂被乙醇溶解,透性升高,細(xì)胞被復(fù)染顯紅色。步驟:步驟:①涂片:在干凈的載玻片上滴一滴水,用接種環(huán)挑取菌體均勻涂布于水中。②固定:將玻片靠近酒精燈火焰,蒸
2、干水分,但不要烤焦。③初染:用堿性顏料結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染。④媒染:以碘液媒染1min,水洗,吸干水分。(細(xì)胞內(nèi)形成結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,增強(qiáng)相互作用)⑤脫色(關(guān)鍵步驟):以95%的乙醇脫色30s,應(yīng)適當(dāng)振蕩均勻,是乙醇脫色完全。⑥水洗,吸干。⑦復(fù)染:(第2張)復(fù)染30s,水洗吸干。⑧干燥鏡檢。2、用滲透皮層膨脹學(xué)說(shuō)解說(shuō)芽孢耐熱機(jī)制。芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽(yáng)離子和水分的透性很差,以及皮層的離子強(qiáng)度很高,這就使皮層產(chǎn)生了極高的滲透
3、壓去奪取芽孢核心中水分,其結(jié)果造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水,正是狀態(tài)存活下來(lái),從而達(dá)到濃縮營(yíng)缺型目的。制霉菌素法適用于真菌,其可與cm上?(第1張)醇作用,引起cm損傷,因?yàn)樗荒軞⑺郎L(zhǎng)繁殖著的真菌,所以......菌絲過(guò)濾法:基本培上,野生型霉菌,?菌的孢子能萌發(fā)并長(zhǎng)成菌絲,而缺型孢子一般不萌發(fā),或不能長(zhǎng)成菌絲,因此培養(yǎng)一段時(shí)間后,用滅菌脫脂棉或?yàn)V紙濾去菌絲,收集濾液,重復(fù)數(shù)遍后可除去大部分野生型,從而……4、生產(chǎn)蛋白酶的枯草
4、芽孢桿菌發(fā)生遺傳變異,使得產(chǎn)量性狀下降,你如何解決?寫出具體實(shí)驗(yàn)方案。答:將一定量的枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液,做一定濃度的稀釋,涂布在含有酪素蛋白質(zhì)的基本培養(yǎng)基上,37C培養(yǎng)一段時(shí)間后,取出培養(yǎng)基,觀察單菌落形成的透明圈大小,取透明圈直徑與菌落直徑之比較大的菌落,挑取培養(yǎng)做進(jìn)一步的鑒定,即可得到高產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿菌。5、以磺胺為例,說(shuō)明化學(xué)治療機(jī)的作用機(jī)制。答:機(jī)理:磺胺是葉酸組成部分對(duì)氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu)類似物,(磺胺類藥物取代對(duì)氨基苯甲酸
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