小鼠 缺氧實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(2016)

1、1實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)性缺氧實(shí)驗(yàn)性缺氧【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.掌握各型（低張性和血液性）缺氧動(dòng)物模型復(fù)制的方法，了解缺氧的分類(lèi)。2.觀察不同類(lèi)型缺氧時(shí)機(jī)體的變化（活動(dòng)狀況、呼吸、粘膜及肝臟的顏色）及存活時(shí)間；3.觀察不同年齡和中樞興奮狀態(tài)對(duì)機(jī)體缺氧耐受性的影響，理解條件因素在缺氧發(fā)病中的重要性。4.掌握各型缺氧的發(fā)生機(jī)制及特點(diǎn)。5.了解常見(jiàn)血液性缺氧的解救措施?！緦?shí)驗(yàn)原理】導(dǎo)致低張性缺氧最常見(jiàn)的原因包括吸入氣氧分壓過(guò)低和外呼吸功能障礙。本實(shí)驗(yàn)將小鼠

2、放置于加入鈉石灰的密閉廣口瓶?jī)?nèi)，隨著小鼠的呼吸消耗，廣口瓶中氧氣含量逐漸降低，模擬外環(huán)境氧分壓過(guò)低引起的低張性缺氧。觀察低張性缺氧時(shí)機(jī)體的變化（活動(dòng)狀況、呼吸、粘膜及肝臟的顏色）及存活時(shí)間。影響機(jī)體對(duì)缺氧耐受性的因素很多，除缺氧時(shí)間、速度、類(lèi)型和程度外，還與缺氧時(shí)中樞功能狀態(tài)和年齡等因素有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)應(yīng)用藥物改變小鼠的中樞興奮狀態(tài)及選擇不同年齡的小鼠，觀察不同條件下低張性缺氧小鼠的活動(dòng)狀況和存活時(shí)間。血液性缺氧是由于血紅蛋白的數(shù)量減少

3、或性質(zhì)改變從而降低血液攜氧能力或血紅蛋白結(jié)合的氧不易釋出所引起的缺氧。本實(shí)驗(yàn)將復(fù)制兩種常見(jiàn)血液性缺氧模型：一氧化碳中毒和亞硝酸鹽中毒引起的血液性缺氧。一氧化碳可與血紅蛋白結(jié)合，形成碳氧血紅蛋白而失去結(jié)合氧的能力，從而導(dǎo)致血液攜氧能力降低而引起機(jī)體缺氧。亞硝酸鈉是強(qiáng)氧化劑，可使血紅蛋白分子內(nèi)二價(jià)Fe2氧化成為三價(jià)Fe3而形成高鐵血紅蛋白，高鐵血紅蛋白同樣失去攜氧能力而引起血液性缺氧?！緦?shí)驗(yàn)對(duì)象】成年小鼠（性別、年齡、體重近似、雌雄不拘）、

4、新生小鼠【實(shí)驗(yàn)藥品和器材】3.75%尼可剎米、0.25%氯丙嗪、生理鹽水、鈉石灰、5%亞硝酸鈉、1%亞甲蘭、濃硫酸、草酸。缺氧瓶帶氣壓平衡裝置、耗氧量測(cè)定裝置（圖1）、1ml注射器、5ml注射器、電子天平、紗布、濾紙、眼科剪、眼科鑷、小燒杯、酒精燈、火柴、CO發(fā)生裝置（圖2）、氣囊袋。3分組分組活動(dòng)狀況活動(dòng)狀況黏膜顏色黏膜顏色呼吸呼吸耗氧率耗氧率抽搐出現(xiàn)時(shí)間抽搐出現(xiàn)時(shí)間（s）存活時(shí)間存活時(shí)間（s）肝臟顏色肝臟顏色正常對(duì)照（A組）低張性缺

5、氧（B組）新生幼鼠組3.不同中樞狀態(tài)對(duì)缺氧耐受性的影響不同中樞狀態(tài)對(duì)缺氧耐受性的影響(1)取成年小鼠3只（A、B、C組），稱(chēng)重并標(biāo)記編號(hào)后分別作如下處理：A組小鼠腹腔注射3.75%尼可剎米溶液0.08ml10g；B組小鼠腹腔注射0.25%氯丙嗪溶液0.1ml10g；C組小鼠腹腔注射生理鹽水0.1ml10g。(2)腹腔注射結(jié)束后迅速將3只小鼠放入缺氧瓶中（每瓶均放置紗布包裹的鈉石灰5g），蓋上膠塞；(3)比較觀察3只小鼠的活動(dòng)狀況、皮膚（

6、口唇）黏膜和呼吸頻率（次數(shù)10s）和深度，記錄小鼠出現(xiàn)抽搐的時(shí)間及存活時(shí)間。表二、不同中樞狀態(tài)對(duì)低張性缺氧耐受性的影響表二、不同中樞狀態(tài)對(duì)低張性缺氧耐受性的影響分組分組缺氧前活動(dòng)狀況、缺氧前活動(dòng)狀況、呼吸、唇色呼吸、唇色缺氧時(shí)活動(dòng)狀況、缺氧時(shí)活動(dòng)狀況、呼吸、唇色呼吸、唇色出現(xiàn)抽搐的時(shí)間出現(xiàn)抽搐的時(shí)間（s）存活時(shí)間存活時(shí)間（s）尼可剎米組氯丙嗪組生理鹽水組4.CO中毒性缺氧中毒性缺氧（1）取草酸3ml加入CO發(fā)生裝置試管內(nèi)，再加入濃硫酸2