實驗一小鼠實驗技術

1、實驗一 小鼠基本實驗技術和各種檢驗標本的采集,首都醫(yī)科大學實驗動物部首都醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院實驗動物學系,孫 泉,四次實驗課安排,小鼠的基本實驗技術和各種檢驗標本的采集技術（第3周，3月19日）大鼠的基本實驗技術和各種檢驗標本的采集技術（第4周，3月26日）大鼠阻塞性黃疸及急性胰腺炎模型的制作（第5周，4月2日）兔的基本實驗技術和靜脈插管技術（第6周，4月9日）,考核方式,出勤；20%實驗操作情況；30%實驗報告：實驗目的；實

2、驗器材；實驗內容；總結；50%,注意事項,注意安全：抓取；注射器等。上課紀律：按時上課，穿實驗服，保持安靜。保持衛(wèi)生：每次課安排4個同學打掃衛(wèi)生，動物尸體放入尸體房。分組情況：1305教室:18人；1306教室:18人,一.實驗目的,掌握小鼠的抓取和固定 掌握小鼠的編號與標記方法 掌握小鼠的常用給藥方法 掌握小鼠的常用麻醉方法 掌握小鼠的安死術 掌握小鼠的采血方法 了解小鼠的采尿、糞的方法 了解小鼠各種

3、臟器標本的采集方法,二.操作內容,分組：兩人一組，每組小鼠2只，♀♂各1只。品系：ICR,1.小鼠的抓取和固定,單手固定：肌肉、腹腔、灌胃,,雙手固定：肥胖或妊娠小鼠；雙人配合固定器：尾靜脈注射與采血；固定板：外科手術或解剖；,2.小鼠的性別鑒定及稱重,將小鼠抓取后，放在燒杯中，稱量體重，記錄體重。辨別雌雄根據(jù)排泄孔和生殖孔的距離辨別。 距離近的為雌性 距離遠的為雄性,3.小鼠的編號與標記方法,染色法：①一般用于短期

4、實驗；②常用的染液有3%-5%的苦味酸溶液（黃色）、0.5%的中性品紅溶液（紅色）；③逆毛流方向涂上有色斑點；④編號的原則是“從上到下，從左到右”,一種顏色代表十位，另一種顏色代表個位，這樣可標記到99號,,穿耳孔法：用動物專用耳孔器在動物耳朵的不同部位打一小孔或打成缺口來表示一定號碼的方法。左耳代表十位，右耳代表個位。這種方法可標記100只左右的動物。,4.小鼠的常用給藥方法,尾靜脈注射 小鼠：0.05ml/10g體

5、重～0.1ml/10g體重①放入固定器，露出尾部， 準備好注射液；②酒精擦拭尾部；③左手食指托住尾部下方，拇指配合，右手持注射器④針尖輕輕抬起與血管平行刺入，輕推藥液⑤血管由紅變白；用干棉球按住注射點，將針頭撥出，用力按壓止血。,,,皮下注射：①俯臥固定；頸背部皮膚；左手拇指和食指捏住皮膚提起，右手持針沿縱軸方向刺入皮下；②進針時感覺有阻力，繼續(xù)刺入，突然阻力消失，活動針頭皮內注射：①與皮膚平行刺入捏住的皮膚；②注

6、射時感覺阻力很大，并且手指有膨脹，注射部位局部形成皮丘，注射畢，為避免藥液流出，停留片刻，再將針頭撥出,,腹腔注射：①仰面保定；②腹正中線左右兩側，與腹股溝平行的部位，用酒精棉球消毒③右手持針，30-45°角刺入不要太深，把針尖向上挑起皮膚和肌肉，證明未刺入內臟，回抽無血，即可注入藥液。,,灌胃法：①先將動物保定，身體成一條直線；②灌胃針頭的前端放進動物口腔，順著上腭插入咽部③先少量注入藥液，如果小鼠無強烈掙扎，證

7、明未插入氣管肌肉注射：注射針穿過皮膚至肌肉，回抽無血，即可注射藥液,5.小鼠的常用麻醉方法,抓取、稱重將小鼠抓取后，放在燒杯中，稱量體重，記錄體重。計算麻醉藥用量記錄給藥、進入興奮期、麻醉期的時間。呼吸麻醉 （了解）,小鼠常用麻醉藥的劑量及注射途徑,單位：mg/kg i.v－靜脈注射；i.p－腹腔注射；i.m－肌肉注射,觀察麻醉期,①全身麻醉的第一期（隨意興奮期）：出現(xiàn)運動和運動失調；②全身麻醉的第二期（不隨意興奮期）：

8、是由意識完全喪失至深而規(guī)則的自動呼吸開始時止。③全身麻醉的第三期（外科麻醉期）：角膜反射由遲鈍漸趨消失，翻正反射消失，疼痛反射消失，④全身麻醉的第四期 （延髓麻痹期）：進入此期，麻醉已嚴重過量，故臨床上嚴禁出現(xiàn)此期。,尾尖采血法；眼眶靜脈叢采血法；心臟采血法；,6.小鼠的常用的采血方法,7. 小鼠的采尿、糞的方法,代謝籠,少量采集：在抓取固定時受到刺激排出少量尿液和糞便長期大量采集：使用代謝籠,8.安死術,1.頸椎脫臼

9、法用左手按住動物的頭部于實驗臺上，右手抓住尾根部，快速、不間斷地向后、略向上使勁拉，以致脊椎脫臼，脊髓與腦干斷離而死亡。2.過量麻醉法 給動物注射正常麻醉3～4倍的藥量。3.空氣栓塞法 向動物的靜脈注射2～3mL左右的空氣。,9. 小鼠各種臟器標本的采集方法,腹腔臟器1：肝，胃，十二指腸，空腸，回腸，結腸,小鼠各種臟器標本的采集方法,腹腔臟器2：胰臟，脾臟，腎臟，腎上腺,胸腔器官,小鼠各種臟器標本的采集方法,♀