實驗六 馬鈴薯多酚氧化酶制備和化學性質

1、實驗六實驗六馬鈴薯多酚氧化酶制備和化學性質馬鈴薯多酚氧化酶制備和化學性質一、實驗目的一、實驗目的1、學習從組織細胞中制備酶的方法。2、掌握多酚氧化酶的作用和化學性質。二、實驗原理二、實驗原理多酚氧化酶是一種含銅的酶，其最適pH值為67。由多酚氧化酶催化的反應，如以鄰苯二酚為底物，可以被氧化形成鄰苯二醌。由多酚氧化酶催化的氧化還原反應可通過溶液的顏色的變化鑒定，這個反應在自然界中是常見的，如去皮的馬鈴薯和水果變成褐色就是由于該酶作用的結果

2、。多酚氧化酶的最適底物是鄰苯二酚（兒茶酚）。間苯二酚和對苯二酚與鄰苯二酚的結構相似，它們也可以被氧化為各種有色物質。三、實驗器材三、實驗器材1、實驗儀器勻漿機，離心機，冰箱，恒溫水浴，燒杯，三角瓶，漏斗，小刀，紗布，2、材料與試劑1）馬鈴薯2）0.1molL的NaF溶液：將4.2g氟化鈉溶于1000mL水中。3）0.01molL的鄰苯二酚溶液：將1.1g鄰苯二酚溶解于1000mL水中，用稀NaOH調節(jié)溶液的pH值為6.0，防止其自身的氧

3、化作用。當溶液變成褐色時，應重新配制。新配制的溶液應貯存于棕色瓶中。4）pH6.8的磷酸鹽緩沖液5）5%三氯乙酸溶液6）0.01molL的間苯二酚溶液：將0.11g間苯二酚溶解于100mL水中。7）0.01molL的對苯二酚溶液：將0.11g對苯二酚溶解于100mL水中。8）硫酸銨晶體四、實驗步驟四、實驗步驟1、多酚氧化酶的制備每三個小組一起，稱取150g馬鈴薯（新馬鈴薯可以不去皮），切塊后放入勻漿機，加入150mLNaF溶液，勻漿后用