植物組織培養(yǎng) 重點(diǎn)粗略整理

1、題型：填空15分選擇20分判斷10分名詞解釋20分簡答35分附加題未知一般培養(yǎng)基不含哪種維生素：培養(yǎng)基中的維生素屬于B族維生素，其中效果最佳的有維生素B1、維生素B6、生物素、泛酸鈣和肌醇等。培養(yǎng)基部分名稱解釋：微室懸滴培養(yǎng)：微室懸滴培養(yǎng)：利用表面張力將細(xì)胞培養(yǎng)液置于一張蓋玻片表面制成懸滴，將組織或器官外植塊接種培養(yǎng)液中，然后翻轉(zhuǎn)蓋玻片使外植塊及培養(yǎng)液懸掛在蓋玻片下，再置放于一凹形載片之上，最后用熔蠟密封蓋玻片四周后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的技

2、術(shù)。外植體外植體由活植物體上切取下來的可以用于組織培養(yǎng)的組織或器官。外植體是指植物離體培養(yǎng)中的各種接種材料。包括植物體的各個(gè)器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。愈傷組織愈傷組織在人工培養(yǎng)基上由外植體長出來的一團(tuán)無序生長的薄壁細(xì)胞（細(xì)胞排列疏松、無規(guī)則）。體細(xì)胞胚（體胚）體細(xì)胞胚（體胚）體胚離體培養(yǎng)下沒有經(jīng)過受精過程，但經(jīng)歷了胚胎發(fā)育過程所形成的胚的類似物，統(tǒng)稱為體細(xì)胞胚或胚狀體。體胚還可以從花藥或花粉培養(yǎng)、離體器官培養(yǎng)、單細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中產(chǎn)生。

3、體胚來源于根、莖、葉和它們的組織和細(xì)胞，經(jīng)離體培養(yǎng)而發(fā)生的類胚結(jié)構(gòu)，染色體組為兩套，可發(fā)育成為正常植物體。胚性感受態(tài)胚性感受態(tài)植物組織或器官對外界環(huán)境條件所存在的特殊反應(yīng)狀態(tài)。脫分化再分化脫分化再分化脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，又稱去分化。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化根或芽等器官的過程。指示植物指示植物對病毒反映敏感，癥狀特征顯著的植物指示植物法指示植物法將一些對病毒反映敏感，癥狀特征

4、顯著的植物作為指示植物，用以檢驗(yàn)待測植物體內(nèi)特定病毒的存在。即指示植物法。特點(diǎn)：條件簡單，操作方便，經(jīng)濟(jì)而有效，只能測出病毒的相對感染力。試管內(nèi)生根試管內(nèi)生根試管(瓶)內(nèi)誘導(dǎo)莖芽生根形成小苗時(shí)期試管外生根試管外生根瓶外生根技術(shù)把生根誘導(dǎo)與馴化培養(yǎng)有機(jī)地結(jié)合起來，有效縮短育苗周期，節(jié)約生產(chǎn)成本，提高了移栽成活率，是一項(xiàng)值得應(yīng)用與推廣的技術(shù)。植物離體保存植物離體保存將離體培養(yǎng)的植物細(xì)胞、組織、器官或試管苗，保存于人工環(huán)境下，一般需要在低溫或

5、超低溫條件下進(jìn)行，以抑制其生長，達(dá)到長期保存的目的。植物植物&種質(zhì)保存種質(zhì)保存種質(zhì)保存:在適宜的環(huán)境條件下，貯存植物種質(zhì)，使其保持生命力與遺傳性的技術(shù)。一般有兩種方式，即就地保存與遷地保存。植物種質(zhì)資源低溫保存意義意義:防止資源滅絕、節(jié)約人力物力、便于交流作人員未遵守操作規(guī)程3）預(yù)防措施：防止材料帶菌；防止用具帶菌；操作室要處于無菌狀態(tài)；操作人員要按照操作程序進(jìn)行（2）外植體的褐變及其防止措施）外植體的褐變及其防止措施1）褐變是指外植體

6、在培養(yǎng)過程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激后活，使細(xì)胞內(nèi)的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色醌類物質(zhì)，這種致死性的褐化物不但向外擴(kuò)散致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，而且還會抑制其他酶的活性，嚴(yán)重影響外植體的脫分化和器官分化，最后變褐而死亡的現(xiàn)象。2）影響褐變的因素：A.植物種類：一般木本植物，單寧、色素含量高的植物易發(fā)生褐變。B.基因型C.外植體的生理狀態(tài)：一般幼齡材料，幼嫩器官和組織，春季取外植體，褐變發(fā)生較輕。D.培養(yǎng)基的成分：培養(yǎng)基中6－BA或KT能促進(jìn)褐變發(fā)生

7、，而生長素類如IAA可減輕褐變發(fā)生。E.材料轉(zhuǎn)移時(shí)間3）預(yù)防措施：a、選擇適宜的外植體及最佳培養(yǎng)基：適當(dāng)降低培養(yǎng)基無機(jī)鹽濃度，降低PH值，降低細(xì)胞分裂素水平等，可顯著減輕培養(yǎng)物褐變；b、連續(xù)轉(zhuǎn)移c、加抗氧化劑:如硫代硫酸鈉、抗壞血酸d、加活性碳e、加多胺類物質(zhì)，如精胺、亞精胺（3）試管苗的玻璃化）試管苗的玻璃化1）植物組培玻璃化苗的葉和嫩梢呈水晶透明或半透明水漬狀；整株矮化腫脹、失綠；葉片皺縮成縱向卷曲，脆弱易碎；葉表缺少角質(zhì)層蠟質(zhì)，沒

8、有功能性氣孔，不具柵欄組織，僅有海綿組織。玻璃化苗中因其體內(nèi)含水量高，干物質(zhì)、葉綠素、蛋白質(zhì)、纖維素和酶活性降低，組織畸形，器官功能不全，分化能力降低，所以很難成活，嚴(yán)重影響組培苗繁殖率的提高。2）預(yù)防措施1、適當(dāng)控制培養(yǎng)基中無機(jī)鹽濃度2、適當(dāng)控制培養(yǎng)基中蔗糖和瓊脂濃度3、適當(dāng)降低細(xì)胞分裂素和赤霉素濃度4、增加自然光照，控制光照時(shí)間5、控制好溫度6、改善培養(yǎng)皿的氣體交換狀況7、在培養(yǎng)基中添加其他物質(zhì)3.影響體細(xì)胞胚胎的因子影響體細(xì)胞胚胎

9、的因子一、外植體一、外植體：產(chǎn)生部位，生理狀態(tài)，基因型胚性感受態(tài)（embryogeniccompetence):體胚發(fā)生的相對容易程度幼胚、成熟胚、幼苗和成花結(jié)構(gòu)中的非分生組織細(xì)胞的胚性感受態(tài)通常較高從營養(yǎng)器官誘導(dǎo)出體胚的木本植物以胚或幼苗作為外植體的居多不同品系的植物在體細(xì)胞胚培養(yǎng)中激素的選擇與搭配以及濃度的選擇，培養(yǎng)條件等部分具有很大差異，這與不同植物千差萬別的基因型有關(guān)。二、植物生理狀態(tài)二、植物生理狀態(tài)的影響：植物的每個(gè)細(xì)胞均有成