細胞工程(宿州學院的,為師弟師妹們解決一下憂慮)

1、名詞解釋名詞解釋1細胞工程細胞工程：利用細胞生物學和分子生物學方法以生物細胞或組織為研究對象，按照人們的意愿進行工程學操作，從而改變生物性狀，或產生新物種貨品系。2植物細胞全能性植物細胞全能性：每個植物細胞都具有該物種的全部遺傳信息，在適宜條件下具有發(fā)育成完整植株的能力。3外植體外植體：把由活植物體上切取下來的進行培養(yǎng)的那部分組織或器官叫外植體4愈傷組織：愈傷組織：通常指植物受到機械、動物或微生物等傷害后，創(chuàng)傷部位的細胞脫分化而不斷增殖

2、形成松散排列、無特定結構和功能的非器官化組織。5脫分化：脫分化：離體條件下，細胞脫離原狀態(tài)而回復到分生狀態(tài)，這一會變過程稱脫分化或去分化。6再分化再分化：脫分化的細胞在特定條件誘導下，再次開始新的分化發(fā)育過程，最終形成各種組織、器官或胚狀體等，稱再分化。7胚狀體胚狀體：離體培養(yǎng)下沒有經過受精過程，但經過了胚胎發(fā)育過程所形成的胚的類似物，（不管培養(yǎng)的細胞是體細胞還是生殖細胞），統(tǒng)稱為體細胞或胚狀體。8人工種子人工種子：通過植物組織培養(yǎng)中所

3、產生的體細胞胚或珠芽等包埋在“人工胚乳”和“人工種皮”里，制成的具有播種功能、類似天然種子的顆粒。9胚胎培養(yǎng)胚胎培養(yǎng)：是植物組織培養(yǎng)的一個主要領域。植物胚胎培養(yǎng)是指對植物的胚（種胚）及胚器官（如子房、胚珠）進行人工離體無菌培養(yǎng)，使其發(fā)育成幼苗的技術。10原生質體培養(yǎng)原生質體培養(yǎng)：將植物細胞游離成原生質體，在適宜培養(yǎng)條件下，使其再生細胞壁，進而分裂形成愈傷組織或胚狀體，最后發(fā)育形成完整植株。11體細胞雜交體細胞雜交：原生質體融合也叫做體細

4、胞雜交，使分離出來的不同親本的原生質體，在人工控制條件下，相互融合成一體，形成雜種細胞，并進一步發(fā)育成雜種植株的技術。12單細胞培養(yǎng)單細胞培養(yǎng)：指從外植體、愈傷組織、群體細胞或者細胞團中分離得到單細胞，然后在一定條件下對其進行培養(yǎng)的過程。13平板培養(yǎng)法平板培養(yǎng)法：將單個細胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合后平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的培養(yǎng)法。14看護培養(yǎng)看護培養(yǎng)：指用一塊活躍生長的愈傷組織來看護單個細胞，并使其生長和增殖的方法。15動物細胞與組織

5、培養(yǎng)：是從動物體內取出細胞或者組織，模擬體內的生理環(huán)境，在無菌、適溫和豐富的營養(yǎng)條件下，使離體細胞或者組織生存、生長并維持結構和功能的一門技術。是動物細胞工程的基礎。16接觸性抑制接觸性抑制：由細胞接觸而抑制細胞運動的現象稱為接觸抑制.接觸抑制是體外培養(yǎng)中某些貼附型細胞生長特性之一.由于細胞之間有接觸抑制特性一般的正常細胞并不互相重疊于其上而生長而是呈單層細胞生長.但腫瘤細胞由于無接觸抑制而能夠繼續(xù)移動和增殖導致細胞向三維空間擴展使細胞

6、堆積.因此接觸抑制可作為區(qū)別正常細胞與癌細胞之一.密度抑制密度抑制：當細胞密度進一步增大，培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少，代謝產物增多時，細胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，則發(fā)生密度抑制，導致細胞分裂停止的現象。17有限細胞系有限細胞系：原代細胞經過一次傳代后，形成的細胞系。如果不能繼續(xù)傳代或傳代有限，稱為“有限細胞系”無限細胞系無限細胞系：原代細胞經過一次傳代后，形成的細胞系。如果可以連續(xù)傳代則稱為“連續(xù)細胞系”，細胞獲得不死性（持久增殖能力）。

7、18飼養(yǎng)細胞飼養(yǎng)細胞：即滋養(yǎng)細胞，一層經過特殊處理的用做克隆細胞底物的細胞層。19干細胞干細胞：是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。20胚胎工程胚胎工程：指以動植物胚胎為研究對象而產生的一系列技術操作，如胚胎移植、胚胎冷凍保存、胚胎分割、體外胚胎生產、動物克隆、性別控制及基因導入等。21：胚胎移植胚胎移植：指對優(yōu)秀雌性動物進行超數排卵處理，在其發(fā)情配種后一定時間內從其生殖道取出早期胚胎，移植到同期發(fā)情的普通雌性動物生殖道的相應部位，讓其

8、生產后代的技術。22：超數排卵超數排卵：在動物發(fā)情周期的適當時期，用促性腺激素進行處理，誘發(fā)其卵巢上大量卵泡同時發(fā)育并排卵的技術，簡稱超排。23固定化培養(yǎng)固定化培養(yǎng)：將游離的細胞包埋或吸附在多糖或多聚化合物制備成的網狀支持物中或表面，培養(yǎng)液呈流動狀態(tài)進行無菌培養(yǎng)。種單細胞中所占的比例。植板率=（每個平板形成的細胞團數）(每個平板接種的細胞總數)31.植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)主要有懸浮培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)固定化培養(yǎng)32.成批培養(yǎng)分批培養(yǎng)：將

9、一定量細胞或細胞團接種到一定容積的密閉容器中進行培養(yǎng)。它是進行細胞生長和細胞分裂的生理生化研究常用的培養(yǎng)方法。特點：（1）除氣體交換外，培養(yǎng)系統(tǒng)不與外部進行物質交換。培養(yǎng)基體積固定；（2）必須適當攪拌；（3）培養(yǎng)過程中，細胞生長，其數目不斷發(fā)生變化，呈S增長；（4）當營養(yǎng)耗盡時，細胞停止分裂生長，完成培養(yǎng)過程，細胞和產物一次性收獲。但要進行下一批培養(yǎng)，則需要繼代轉移。半連續(xù)培養(yǎng)：每隔一定時間倒出一定量的懸浮液，同時補充加入等量的新鮮培養(yǎng)

10、液33.植物細胞懸浮培養(yǎng)的生物反應器有機械攪拌式生物反應器、氣升式生物反應器機械攪拌式生物反應器、氣升式生物反應器34.常用的超低溫保存方法可分為兩類，即冷凍誘導保護性脫水的超低溫保存冷凍誘導保護性脫水的超低溫保存和玻璃化處理的超低溫保存玻璃化處理的超低溫保存。超低溫保存植物種質資源的程序包括培養(yǎng)材料的準備、預處理、降溫冰凍及保存降溫冰凍及保存、解凍處理解凍處理、細胞活力和變異的評價、植株再生等幾個步聚。傳統(tǒng)的降溫冷凍方法：快速冰凍法、

11、慢速冰凍法、兩步法、逐級冰凍法解凍一般采用快速化凍方法，即將液氮保存后的材料在35?C－40?C溫水浴中化凍35.體外培養(yǎng)的動物細胞依據它們是否貼附在支持物表面生長而分為兩大類型，即：貼附型細胞和懸浮型細胞。貼附型細胞和懸浮型細胞。體外貼附型細胞形態(tài)大致可以分為：成纖維型細胞、上皮型細胞、游走型細胞、多形型細胞36.培養(yǎng)細胞生命周期有三個階段：原代培養(yǎng)期、傳代期、衰退期37.冷凍保存細胞應選擇原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)早期原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)早期

12、的細胞。進行各種實驗的每一代中最好階段是對數期對數期38.培養(yǎng)基和各種培養(yǎng)用液有平衡鹽溶液衡鹽溶液PBS、消化液、消化液。最常用的消化液有胰蛋白酶、胰蛋白酶、EDTA39.動物細胞培養(yǎng)基可分為天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基及合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基兩大類40.大多數哺乳動物細胞的培養(yǎng)適宜溫度：37℃，最適pH為7.27.4之間41.實驗室中動物細胞的培養(yǎng)方法有：懸滴培養(yǎng)法、培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法、旋轉管培養(yǎng)法、灌注小室培養(yǎng)法、培養(yǎng)板培養(yǎng)法、懸滴培養(yǎng)法、培養(yǎng)瓶培

13、養(yǎng)法、旋轉管培養(yǎng)法、灌注小室培養(yǎng)法、培養(yǎng)板培養(yǎng)法、克隆培養(yǎng)法（單細胞分離培養(yǎng)法）克隆培養(yǎng)法（單細胞分離培養(yǎng)法）42.細胞克?。▎渭毎蛛x培養(yǎng)），即把一個單細胞從一個群體中分離出來單獨培養(yǎng)，使之重新繁衍成為一個新的細胞群體的培養(yǎng)技術。最常用的克隆培養(yǎng)法是稀釋鋪板法。稀釋鋪板法。43.細胞轉化及惡性程度檢查一般利用軟瓊脂培養(yǎng)法軟瓊脂培養(yǎng)法檢測44.細胞生長狀況?①細胞計數，血球計數板和電子細胞計數儀?②生長曲線：（潛伏期，對數生長期，水平靜

14、止期）由于細胞基數和生長進度不同，生長曲線不一致。?③細胞分裂指數，分裂細胞占全部細胞的比例?④細胞貼壁率=貼壁存活細胞接種細胞100%?⑤細胞周期時間測定：用同位素標記，流式細胞儀測定細胞同期?⑥細胞活力檢測：MTT45.動植物細胞融合的方法：仙臺病毒法、PEG誘導融合法、電融合法46.干細胞按分化潛能大小來分類：全能干細胞、多能干細胞、單能干細胞；全能干細胞、多能干細胞、單能干細胞；根據來源來分：來源于胚胎來源于胚胎胚胎干細胚胎干細