咖啡因的測(cè)定論文

1、咖啡中咖啡因的測(cè)定前言咖啡因(caffeine)又名咖啡堿，屬甲基黃嘌呤化合物，化學(xué)名稱為1，3，7－三甲基黃嘌呤，具有提神醒腦等刺激中樞神經(jīng)作用，但易上癮。為此，各國(guó)制定了咖啡因在飲料中的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。美國(guó)、加拿大、阿根廷、日本、菲律賓規(guī)定飲料中咖啡因的含量不得超過(guò)200mgL，南斯拉夫規(guī)定不得超過(guò)120mgL，到目前為止我國(guó)僅允許咖啡因加入到可樂(lè)型飲料中，其含量不得超過(guò)150mgKg，為了加強(qiáng)食品衛(wèi)生監(jiān)督管理，建立咖啡因的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方

2、法十分必要。紫外分光光度法和高效液相色譜法(HPLC)是可樂(lè)型飲料、咖啡和茶葉以及制成品中咖啡因含量的測(cè)定方法。其方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確。最低檢出濃度：紫外法對(duì)可樂(lè)型飲料為3mgL；對(duì)咖啡、茶葉及其固體制品為5mg100g；對(duì)咖啡和茶葉的液體制品為5mgL。HPLC法對(duì)可樂(lè)型飲料為0.72mgL；對(duì)茶葉、咖啡及其制品為1.8mg100g。第一篇紫外分光光譜法1儀器分析原理：通過(guò)研究物質(zhì)分子對(duì)紫外光的吸收情況進(jìn)行定性，定量和結(jié)構(gòu)分析的方法。

3、2原理：咖啡因的三氯甲烷溶液在2765nm波長(zhǎng)下有最大吸收，其吸收值的大小與咖啡因濃度成正比，從而可進(jìn)行定量。3試劑(本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為分析純?cè)噭?，?shí)驗(yàn)用水為蒸餾水)31無(wú)水硫酸鈉。32三氯甲烷：使用前重新蒸餾。3315％(mzV)高錳酸鉀溶液：稱取15g高錳酸鉀，用水溶解并稀釋至100mL。34亞硫酸鈉和硫氰酸鉀混合溶液：稱取10g無(wú)水亞硫酸鈉(Na2SO3)，用水溶解并稀釋至100mL。另取10g硫氰酸鉀，用水溶解并稀釋至100mL

4、，然后二者均勻混合。3515％(VV)磷酸溶液：吸取15mL磷酸置于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。3620％(mV)氫氧化鈉溶液；稱取20g氫氧化鈉，用水溶解，冷卻后稀釋至100mL。3720％(mV)乙酸鋅溶液：稱取20g乙酸鋅[Zn(CH3COO)22H2O]，加入3mL冰乙酸，用水溶解并稀釋至100mL。3810％(mV)亞鐵氰化鉀溶液：稱取10g亞鐵氰化鉀[K4Fe(CN)63H2O]用水溶解并稀釋至100mL。39

5、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品；含量980％以上。310咖啡因標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：根據(jù)咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品的含量用重蒸三氯甲烷配制成每毫升相當(dāng)于05mg咖啡因的溶液，置于冰箱中保存。第二篇高效液相色譜法(HPLC)1儀器分析原理：根據(jù)各組分在固定相及流動(dòng)相中的吸附能力，分配系數(shù)，離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。2原理：咖啡因的甲醇液在286nm波長(zhǎng)下有最大吸收，其吸收值的大小與咖啡因濃度成正比，從而可進(jìn)行定量。3試劑3.1甲醇：HPLC試劑。3.2乙腈：HPL

6、C試劑。3.3三氯甲烷：分析純(必要時(shí)須重蒸)。3.4超純水(18.2MΩ)。3.5無(wú)水硫酸鈉：分析純。3.6氯化鈉：分析純。3.7咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品：純度98%以上。4儀器和設(shè)備4.1液相色譜。4.2色譜柱BondapakTMC18(30cm3.9m)。4.3預(yù)柱RESAVETMC18。4.4超聲清洗器(CQ250)。4.5混纖微孔濾膜。5分析步驟5.1樣品的處理5.1.2咖啡：稱取2g已經(jīng)粉碎且小于30目的均勻樣品或液體樣品放入150mL

7、燒杯中，先加2～3mL超純水，再加50mL三氯甲烷，搖勻，在超聲處理機(jī)上萃取1min(30s二次)，靜置30min，分層。將萃取液傾入另一150mL燒杯。在樣品中再加50mL三氯甲烷，重復(fù)上述萃取操作步驟，棄去樣品，合并二次萃取液，加入少許無(wú)水硫酸鈉和5mL飽和氯化鈉，過(guò)濾，濾入100mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至100mL。最后取10mL濾液按10.1.1.2操作進(jìn)行。5.2色譜條件5.2.1流動(dòng)相：甲醇：乙腈：水＝57∶29∶14(