實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及其控制要求

1、屏障系統(tǒng)的原理、控制要求及進(jìn)出管理,蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 周正宇,一、普通動(dòng)物（Conventional animal，CV）： 又稱為一級(jí)動(dòng)物。指在一般自然環(huán)境中飼養(yǎng)的，允許帶有寄生蟲和細(xì)菌，但不允許帶有人畜共患疾病和動(dòng)物烈性傳染病的動(dòng)物稱之。 1、人畜共患疾病及烈性傳染病病原體： 鼠痘病毒、流行性出血熱病毒、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、沙門氏菌、弓形體等。,第一節(jié) 按微生物控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

2、的分類,2、飼養(yǎng)環(huán)境： 開放系統(tǒng)3、特點(diǎn)及應(yīng)用： 一般微生物要求控制最低，多用于要求不嚴(yán)的普通實(shí)驗(yàn)和教學(xué)用動(dòng)物，難以得到正確的結(jié)果；或用于預(yù)試驗(yàn)，不可用于科研和檢定。,二、清潔動(dòng)物（Clean Animal，CL）： 又稱為二級(jí)動(dòng)物。即除普通動(dòng)物排除的病原外，不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原。 清潔動(dòng)物是根據(jù)我國(guó)國(guó)情而設(shè)定的等級(jí)動(dòng)物，目前在我國(guó)已成為適用于科研的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、,2、飼養(yǎng)環(huán)境： 溫濕度恒定的半屏障系統(tǒng)，飼料、墊料、籠器具消毒滅菌，水：滅菌或PH2.5-2.8的酸化水。3、特點(diǎn)及應(yīng)用： 用于短期或部分科研驗(yàn)。,三、無(wú)特定病原菌動(dòng)物 （specific pathogen free，SPF），三級(jí)動(dòng)物。 是指動(dòng)物體內(nèi)外均無(wú)特定的寄生蟲和特殊病原菌，除一、二級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科研實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的動(dòng)物。稱為無(wú)特定病原菌動(dòng)

4、物。,2、飼養(yǎng)環(huán)境： 溫濕度恒定的屏障系統(tǒng)，飼料、墊料、籠器具消毒滅菌，水：滅菌或PH2.5-2.8的酸化水。3、特點(diǎn)及應(yīng)用： 本身不帶病原微生物，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員有益，不會(huì)出現(xiàn)自身疾病癥狀，排除實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷的干擾。而普通群體中帶有穩(wěn)定性感染病原體，一旦接受刺激而激發(fā)，造成非實(shí)驗(yàn)性死亡。國(guó)外SPF已成為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，國(guó)內(nèi)用量不斷增加。 用于所有科研實(shí)驗(yàn)，各種疫苗的生產(chǎn)。,四、無(wú)菌動(dòng)物 （Ge

5、rm free，GF）四級(jí)動(dòng)物。 指在無(wú)菌的環(huán)境下，用無(wú)菌飼料、飲水飼養(yǎng)的動(dòng)物，或經(jīng)剖腹取胎后，轉(zhuǎn)移到無(wú)菌條件下飼養(yǎng)，體表及腸管中均不能檢出任何活的微生物和寄生蟲，這種動(dòng)物稱為無(wú)菌動(dòng)物。,2、飼養(yǎng)環(huán)境： 溫濕度恒定的隔離系統(tǒng)，飼料、墊料、籠器具消毒滅菌，水：滅菌或PH2.5-2.8的酸化水。3、特點(diǎn)： 盲腸大壁薄。 淋巴結(jié)、脾臟均小，白細(xì)胞增多，脾臟無(wú)二級(jí)濾細(xì)胞，單核吞噬細(xì)

6、胞功能下降。 不能合成維生素B和K，易產(chǎn)生缺乏癥。 抗輻射能力強(qiáng)。,,4、應(yīng)用： 1）微生物學(xué)的研究：菌群之間的拮抗作用。 2）免疫學(xué)的研究：特異性的抗體。 3）放射醫(yī)學(xué)的研究： 4）老年病學(xué)的研究： 5）腫瘤學(xué)的研究：免疫抑制劑。,表2-1 按微生物控制程度的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類原則,屏障系統(tǒng)（1萬(wàn)級(jí)） 用來(lái)飼養(yǎng)SPF動(dòng)物，動(dòng)物來(lái)源于無(wú)菌、悉生或SPF動(dòng)物種群。一切進(jìn)入屏

7、障的人、動(dòng)物、飼料、水、空氣、墊料及各種用品均需經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理。利用空調(diào)送風(fēng)系統(tǒng)形成清潔走廊 動(dòng)物房 污染走廊 室外的靜亞差梯度，以防止空氣逆流形成的污染。屏障內(nèi)人和動(dòng)物盡量減少直接接觸。,,,,SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室二樓人員流向,屏障設(shè)施示意圖,,,,屏障系統(tǒng)內(nèi)部管理要求 人、物嚴(yán)格單向流動(dòng)為保證屏障內(nèi)各單元間的靜壓差，每進(jìn)出一道門后要隨即關(guān)上盡量減少進(jìn)出屏障的頻率，杜絕不必要的

8、進(jìn)出及時(shí)將動(dòng)物尸體帶出屏障，送達(dá)指定位置,第二節(jié) 影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境因素及控制要求一、氣候因素（一）溫度（二）濕度（三）氣流和風(fēng)速二、理化因素（一）光照（二）噪聲（三）粉塵（四）有害氣體三、生物因素（一）空氣中 的微生物（二）社會(huì)因素和飼養(yǎng)密度,1.溫度表1 同環(huán)境溫度時(shí)戊巴比妥鈉給藥導(dǎo)致大鼠死亡率比較,2.濕度對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響表3 一些國(guó)家對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施內(nèi)相對(duì)濕度的規(guī)定,3. 光照對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)

9、物的影響（1）影響視力（2）影響生理及生殖機(jī)能光照的調(diào)控 1）動(dòng)物照明：10-20Lux 明暗周期12/12或10/14 2)工作照明:100-200Lux,,4. 噪聲及其來(lái)源噪聲對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響（1）影響神經(jīng)及心血管等系統(tǒng)功能（2）影響消化及內(nèi)分泌系統(tǒng)功能（3）影響幼小動(dòng)物生存噪聲控制要求：≦60dB,5. 空氣潔凈度 氣體污染 ：NH3 （≦14mg/m3 ）、SH2 顆粒物污染: 粉塵

10、 氣溶膠6. 通風(fēng)和換氣 換氣頻率： 10-20次/h 氣流速度： 0.1-0.2m/s7. 壓差梯度： 20-50Pa8. 動(dòng)物的種間影響,,,,屏障設(shè)施環(huán)境指標(biāo)（靜態(tài)）,注意：隨手關(guān)門，動(dòng)物房任何時(shí)候都不允許兩道門同時(shí)打開在動(dòng)物房?jī)?nèi)，絕不允許裸手與小鼠接觸,屏障系統(tǒng)進(jìn)出管理,1.人員,2、物料,總則：物品進(jìn)入動(dòng)物房盡可能采取高壓滅菌的方式，不能高壓的物品方可使用紫外照射滅菌，只有試劑和小鼠可使用過(guò)氧乙酸

11、噴霧消毒。,,注意：1、非常規(guī)試劑（如ENU）、病毒等需申請(qǐng)并得到批準(zhǔn)后方可拿進(jìn)動(dòng)物房2、動(dòng)物房?jī)?nèi)的非常用物品和耗材放置超過(guò)1周的，要拿出重新滅菌,2、物料,物品在動(dòng)物房?jī)?nèi)以及向動(dòng)物房外都應(yīng)保持單向流動(dòng) 動(dòng)物飼養(yǎng)室或?qū)嶒?yàn)室→污染走廊→緩沖間→洗刷間 即從相對(duì)清潔的區(qū)域流向污染的區(qū)域，不能反向流動(dòng)

12、

13、

14、 物品從緩沖間拿出后，請(qǐng)務(wù) 必打開緩沖間紫外燈,2. 物料出動(dòng)物房：,3.動(dòng)

15、物的進(jìn)出,動(dòng)物進(jìn)入屏障系統(tǒng)： 1.來(lái)源：來(lái)自國(guó)家法定單位，并有質(zhì)量合格證；境外動(dòng)物需經(jīng)過(guò)隔離并通過(guò)相應(yīng)微生物檢測(cè)合格后方可進(jìn)入。 2.進(jìn)入方式：包裝完整，對(duì)外包裝噴霧消毒后由傳遞窗進(jìn)入,動(dòng)物出屏障系統(tǒng)： 外發(fā)動(dòng)物需打包后從傳遞窗傳出；短期帶出屏障系統(tǒng)進(jìn)行輻照處理的動(dòng)物需打包后帶出。動(dòng)物一經(jīng)帶出屏障，原則上不得返回屏障設(shè)施內(nèi)！,3、嚴(yán)格遵守SPF動(dòng)物房SOP,進(jìn)動(dòng)物房人員不要與寵物及其他野生動(dòng)物接觸關(guān)