大孔樹(shù)脂純化茶梗中茶多酚的研究

1、大孔樹(shù)脂純化茶梗中茶多酚的研究大孔樹(shù)脂純化茶梗中茶多酚的研究陳沛鑫1，高英2，李衛(wèi)民1※，李競(jìng)1（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，廣州510006；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥研究開(kāi)發(fā)中心，廣州510006）［摘要］目的目的:篩選大孔吸附樹(shù)脂純化茶梗中茶多酚的最佳工藝，為茶梗二次開(kāi)發(fā)提供參考。方法方法:采用靜態(tài)吸附解吸和動(dòng)態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)9種不同的樹(shù)脂進(jìn)行篩選；以茶多酚的含量為指標(biāo)，探討優(yōu)選樹(shù)脂純化茶多酚的工藝參數(shù)。結(jié)果:LX18型大孔吸附

2、樹(shù)脂純化效果較好，其最佳工藝條件為:樣品液中生藥與樹(shù)脂重量比1:1，取適當(dāng)質(zhì)量濃度的供試品溶液上樣，吸附速度為2mLmin1，吸附飽和后，依次用10倍量蒸餾水、10倍量50%乙醇洗脫。純化產(chǎn)物中茶多酚含量為53.79%。結(jié)論結(jié)論:本方法簡(jiǎn)便可行、純化效果好，可為茶多酚相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供參考。［關(guān)鍵詞］茶梗；茶多酚；吸附；解吸；最佳工藝PurificationPurificationofofteapolyphenolteapolyphen

3、olfromfromteateastalkstalkbybymacropousmacropousresinresinCHENCHENPeixinPeixin1GAOGAOYingYing2LILIWeiminWeimin1LILIJingJing1(1.School(1.SchoolofofChineseChinesemateriamateriamedicamedicaGuangzhouGuangzhouUniversityUniver

4、sityofofChineseChineseMedicineGuangzhouMedicineGuangzhou510006China510006China；2.2.NewNewdrugdrugRteapolyphenoladsptiondesptionoptimumprocess收稿日期：作者簡(jiǎn)介：陳沛鑫，男，研究生，專業(yè)方向：中藥新藥開(kāi)發(fā)與研究，Tel：13719128109，Email:cpxfighting2010@※通訊作者：

5、李衛(wèi)民，男，教授，博導(dǎo)，從事中藥新藥研究與開(kāi)發(fā)，Tel：（020）39358290，E2方法與結(jié)果2.1含量測(cè)定參考中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)“茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法”[7]，取沒(méi)食子酸11.28m，分別吸取00.10.20.30.40.5mL，加水至1mL，精密加入5mL福林酚試劑，搖勻，于50℃水浴內(nèi)反應(yīng)5min，冷卻后，精密加入4ml7.5%碳酸鈉，搖勻。室溫下放置60min。以相應(yīng)試劑為空白，按照2010年版《中國(guó)藥典

6、》附錄ⅤA的紫外可見(jiàn)分光光度法，在765nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度。以吸光度(A)為縱坐標(biāo)，沒(méi)食子酸質(zhì)量(C)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為:A=14.698C0.006（r=0.999），表明沒(méi)食子酸在0.01128mg0.0564mg之間，其質(zhì)量與吸光度成良好線性關(guān)系。2.2樣品制備取茶梗粗粉100g，加入8BV50%乙醇回流提取3次，每次20min，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，加1倍量水混懸，以8000rmin1

7、速度離心2次，每次10min，上清液轉(zhuǎn)移并加水稀釋至1000mL，即得樣品溶液。2.3大孔樹(shù)脂的篩選2.3.1靜態(tài)吸附洗脫性能試驗(yàn)參考文獻(xiàn)[8]，以吸附及解吸性能對(duì)9種大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行考察。精密稱取已處理的各型號(hào)樹(shù)脂適量（約相當(dāng)于濕樹(shù)脂3.0g），置100mL錐形瓶中，精密加入樣品液20mL，振蕩(溫度:37℃，頻率:56次min1)24h，濾過(guò)，定容。將過(guò)濾后的樹(shù)脂另置100mL錐形瓶中，精密加入70%乙醇50mL，振蕩(溫度:37℃

8、，頻率:56次min1)2h，濾過(guò)，定容。依2.1方法分別測(cè)定茶多酚的含量，并按以下公式計(jì)算吸附率及解吸率:吸附率=（M1M2）M1100%解吸率=M3(M1M2)100%。式中M1、M2及M3分別為供試品溶液、未吸附液及70%乙醇解吸液中茶多酚的質(zhì)量(mg)。結(jié)果見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，9種樹(shù)脂中ADS7、HP20、LX18、D101對(duì)茶多酚的吸附率及洗脫率明顯優(yōu)于其他樹(shù)脂，選用這4種樹(shù)脂做進(jìn)一步篩選。2.3.2動(dòng)態(tài)吸附洗脫性能試驗(yàn)精密稱取

9、HP20、ADS7、LX18和D101四種樹(shù)脂(相當(dāng)于濕樹(shù)脂3.0g)，精密吸取樣品液40mL，流速1mLmin1，上柱，預(yù)吸附2h，過(guò)柱液重吸附一次，放置12h。收集過(guò)柱液，加水稀釋至50mL。樹(shù)脂柱先水洗，棄水液，再以70%乙醇洗脫至無(wú)色并稀釋至100mL。按“2.3.1”方法中的吸附率及解吸率公式計(jì)算該參數(shù)，結(jié)果見(jiàn)圖2。結(jié)果表明，4種樹(shù)脂對(duì)茶多酚的吸附率及解吸率均為:LX18＞ADS7＞HP20＞D101，故選擇LX18大孔樹(shù)脂做