傳染性胃腸炎tgev

1、傳染性胃腸炎,TGEV,豬傳染性胃腸炎研究概況,豬傳染性胃腸炎（TGE）是豬的一種急性傳染病，由豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）引起。在 1933 年，美國(guó)依利諾斯州記載了 TGE。1945 年，Doyle 和Hutchings在美國(guó)首次報(bào)道了該病，直到1946 年才確定該病的病原為冠狀病毒。隨后歐州國(guó)家、中南美洲、加拿大、韓國(guó)、朝鮮、菲律賓和中國(guó)大陸都報(bào)道了本病。豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）是一種豬傳染性胃腸炎病毒的致病性突變體。隨著

2、PRCV的出現(xiàn)，由 PRCV 誘導(dǎo)交叉保護(hù)性免疫，使 TGE 在歐洲變得不那么普遍。1956年，我國(guó)廣東省有關(guān)于本病的報(bào)道,近年來(lái)，TGEV 在國(guó)內(nèi)的流行形勢(shì)嚴(yán)峻，并且經(jīng)常伴隨著與豬輪狀病毒病和豬流行性腹瀉病的混合感染，無(wú)有效的治療藥物，因此已經(jīng)成為嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病之一，給我國(guó)豬養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。,一、病原學(xué),1、形態(tài)學(xué)特征TGEV 屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬,電鏡負(fù)染觀察，TGE病毒粒子呈圓形、橢圓形或多邊形。病毒直

3、徑為90-200nm，有雙層膜，病毒表面有囊膜和明顯的花瓣?duì)罾w突，纖突的長(zhǎng)度約在 12～25 nm 之間。因 TGEV 是 RNA 病毒，所以 TGEV 的纖突容易脫落，導(dǎo)致在電鏡下觀察病毒粒子的結(jié)構(gòu)時(shí)不易看到纖突。3 種膜相關(guān)蛋白（S、M、sM）鑲嵌在囊膜脂質(zhì)雙層中，其中，M 為膜糖蛋白且多次橫穿脂質(zhì)雙層；S 為重要的纖突糖蛋白。sM為鑲嵌于囊膜中的小包膜蛋白。,TGEV模型圖,一、病原學(xué),2、培養(yǎng)特性TGEV 可在本屬動(dòng)物或其細(xì)胞

4、系上繁殖,在不同細(xì)胞系上的生物學(xué)特性表現(xiàn)的也不一致，比較敏感的細(xì)胞系有豬唾液腺細(xì)胞、豬甲狀腺細(xì)胞、豬睪丸(Swin Testicle，ST)細(xì)胞、仔豬的腎細(xì)胞（pk-15）。經(jīng)研究表明最為敏感的傳代細(xì)胞系為豬睪丸細(xì)胞（Swine testicle，ST），適應(yīng) ST 細(xì)胞后的病毒效價(jià)提高的較快，其次是PK15細(xì)胞系，兩者是實(shí)驗(yàn)室常用的繁殖 TGEV 的細(xì)胞系。,一、病原學(xué),3、理化特性TGEV 并不耐熱，加熱56℃45min或65℃

5、10min可被完全滅活，隨著溫度的升高，病毒滴度也會(huì)隨著下降。TGEV 在冷凍環(huán)境下貯存非常穩(wěn)定，在室溫下或更高的溫度下相對(duì)不穩(wěn)定。用甲醛溶液處理病毒，37℃ 20 min亦能使病發(fā)生滅活。TGEV對(duì)光和紫外線敏感，二者在一定條件下均能很容易的將 TGEV 滅活。TGEV 在膽汁中存在相當(dāng)穩(wěn)定而對(duì)乙醚、氯仿和去氧膽酸鈉這三種試劑敏感。此毒對(duì)胰酶有抵抗力，能耐受 0.5%胰蛋白酶時(shí)間長(zhǎng)達(dá)1 h。TGEV 在 pH 為 4-8 的區(qū)

6、間時(shí)表現(xiàn)穩(wěn)定。,一、病原學(xué),4、抗原性病毒存在于豬的各器官、體液和排泄物中,但病豬的空腸、十二指腸組織,腸系膜淋巴結(jié)含毒量最高。在病的早期,呼吸道和腎的含毒量也相當(dāng)高。對(duì)來(lái)自美國(guó)、英國(guó)和日本的用豬傳代及用細(xì)胞培養(yǎng)傳代的10個(gè)毒株進(jìn)行交叉中和實(shí)驗(yàn)和蝕斑減數(shù)實(shí)驗(yàn),證明TGEV只有一個(gè)血清型,各毒株之間抗原性密切相關(guān)。近年來(lái),在歐洲及北美發(fā)現(xiàn)一種被認(rèn)為是TGEV基因缺失變異株的冠狀病毒—豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）。TGEV和PRCV能

7、誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生交叉反應(yīng)的中和抗體，但PRCV只能引起輕微臨床癥狀。,二、流行病學(xué),1、傳染源、傳播途徑和易感動(dòng)物 ⑴豬傳染性胃腸炎病的傳染源主要為發(fā)病豬、帶毒豬，其它帶毒動(dòng)物也可作為傳染源。 ⑵TGEV 的傳播可以通過(guò)消化道和呼吸道與受感染的個(gè)體或攜帶疾病的豬的糞便、乳汁、嘔吐物、呼吸及鼻腔分泌物的直接接觸而發(fā)生,病毒也可能存在于被污染的飼料、飲水、空氣和飼喂用具中。 ⑶感染動(dòng)物為豬，各種年齡的豬都易感，但以10日齡以內(nèi)的仔豬

8、發(fā)病率和病死率高。狗、貓、狐貍等可帶毒排毒，但不發(fā)病。,二、流行病學(xué),2、流行特點(diǎn)TGE的發(fā)生和流行有明顯的季節(jié)性，多見(jiàn)于初春和冬季，發(fā)病高峰期為每年的 1-2 月。這種流行特點(diǎn)可能與病毒的理化特性有關(guān)，TGEV 不耐熱，但在冰凍的條件下比較穩(wěn)定。豬場(chǎng)一旦感染 TGEV，便大量暴發(fā)感染。哺乳母豬常發(fā)病，表現(xiàn)為厭食和無(wú)乳，從而進(jìn)一步導(dǎo)致仔豬死亡率的上升。本病還呈周期性地方流行性，其流行的間歇期，病毒隱藏在豬體而成為仔豬的傳染源，每年

9、的冬季豬群可重新感染。曾感染過(guò) TGE 的母豬具有免疫力，能夠抵抗病毒侵害，一般不重復(fù)感染。,,爆發(fā)圖 分布圖,三、臨床癥狀,本病潛伏期短,18 h～ 72 h大部分豬感染發(fā)病,根據(jù)此特點(diǎn)可作為臨床診斷的依據(jù)。仔豬潛伏期很短,一般為12 h～ 24 h,突然發(fā)生嘔吐,接著頻繁劇烈水樣腹瀉,糞便黃色、綠色或灰色,腥臭,

10、常夾有未消化的凝乳塊。病豬極度口渴,迅速脫水,消瘦,日齡越小、病程越短、病死率越高。10日齡以內(nèi)的仔豬多在2 d～ 5 d內(nèi)死亡,隨著日齡的增長(zhǎng)病死率逐漸降低。病愈仔豬生長(zhǎng)發(fā)育不良。后備豬、架子豬和成年豬癥狀輕重不一,表現(xiàn)為停食,個(gè)別病豬出現(xiàn)嘔吐,急性腹瀉,排出灰色或灰褐色水樣便,伴有未消化的飼料,5 d～ 7 d自愈,很少死亡。,四、病理變化,主要病變?cè)谖负托∧c,胃內(nèi)充滿未消化的凝乳塊,胃底黏膜充血,小腸內(nèi)充滿黃綠色或灰白色液狀物,

11、含有泡沫和未消化的凝乳塊,小腸壁變薄,彈性降低,以致腸管擴(kuò)張,呈半透明狀,腸系膜血管充血擴(kuò)張,淋巴結(jié)腫脹。將空腸縱向剪開,用生理鹽水將腸內(nèi)容物沖掉,置于玻璃平皿內(nèi)鋪平,加入少量生理鹽水,在低倍顯微鏡下觀察,可見(jiàn)到空腸絨毛顯著縮短,是本病重要病理變化特征。,五、發(fā)病機(jī)理,小腸是本病毒的靶器官。無(wú)論是口腔還是鼻腔途徑感染,病毒都被吞咽進(jìn)入消化道,它能抵抗胃酸和蛋白水解酶而保持活性進(jìn)入小腸。大量小腸上皮細(xì)胞受感染后,腸粘膜的功能性上皮細(xì)胞迅

12、速遭到破壞,導(dǎo)致小腸內(nèi)的酶活性明顯降低,不能分解乳糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。乳糖在腸腔中的存在,使?jié)B透壓升高,致使體液滯留甚至從身體組織內(nèi)吸收體液而引起腹瀉和脫水。TGEV的感染還可引起空腸鈉運(yùn)輸?shù)母淖兒脱芡獾鞍踪|(zhì)丟失而引起腸道內(nèi)電解質(zhì)和水積聚。死亡的原因可能是脫水和代謝性酸中毒以及由于高血鉀而引起的心功能異常和腎功能減退。新生仔豬小腸內(nèi)正常絨毛細(xì)胞的更換速度較慢,免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善及TGEV易于在新生豬絨毛吸收細(xì)胞的尖端小血管系統(tǒng)積聚,而

13、使病毒數(shù)量大增,可能是仔豬易感和高死亡率的主要原因。,六、診斷,1　病毒抗原檢測(cè) 常用免疫熒光法(IF)2　病毒的電鏡檢測(cè) 免疫電鏡(IEM)比常規(guī)EM技術(shù)更好3　血清學(xué)診斷 病毒中和試驗(yàn)(VN)，ELISA法較之以往的血清學(xué)方法具有敏感性高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。 4 病毒核酸檢測(cè)RT-PCR法是目前鑒別診斷TGEV和PEDV最敏感、特異的方法。,七、防治,抗生素等常規(guī)藥物無(wú)治療作用,因此該病以

14、預(yù)防為主。目前獸用疫苗的研究主要經(jīng)歷了滅活疫苗,減毒弱毒疫苗以及基因工程疫苗等三個(gè)階段。隨著分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的推廣和成熟,基因工程苗已經(jīng)成為疫苗研究中的熱點(diǎn)。其中核酸疫苗與傳統(tǒng)疫苗相比有許多潛在的優(yōu)勢(shì),被譽(yù)為第三次疫苗革命。聯(lián)合疫苗：二聯(lián)、三聯(lián)。,八、TGEV的分子生物學(xué),1、TGEV基因組結(jié)構(gòu) TGEV基因組為單股正鏈不分節(jié)段的RNA,大小約為2.86x104bp。分為7個(gè)區(qū),每個(gè)區(qū)有一個(gè)或多個(gè)開放閱讀框架(Open

15、 Reading Frames,ORFs)。2、S基因 S基因長(zhǎng)約4.3kb,翻譯并指導(dǎo)S蛋白(E2)的合成,形成病毒的囊膜突起。 核苷酸數(shù)目因不同毒株而有差別,Purdue一115株為4341個(gè)堿基,而Miller和FS772/70株為4347個(gè)堿基。,八、TGEV的分子生物學(xué),3、TGEV結(jié)構(gòu)蛋白與功能 TGEV由四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)成。 ⑴S蛋白又稱E2,為大的糖蛋白,它形成病毒粒子的冠狀突起。