宋銀宏病毒的感染與免疫診斷與防治

1、第19章 病毒的感染與免疫 viral infection and immunity,宋銀宏,第一節(jié) 病毒的感染,一、病毒感染的傳播方式與感染途徑1.水平傳播(horizontal transmission):,①粘膜：呼吸道、消化道、泌尿生殖道、 眼結(jié)膜②皮膚：輸血（或血制品）、注射 ；昆蟲叮咬；動(dòng)物咬傷,2.垂直傳播(vertical transmission): HBV、RV、HIV、CMV,感染途徑

2、：,呼吸道、消化道、經(jīng)皮膚（蟲媒）感染、血液傳播、泌尿生殖道感染、胎盤或產(chǎn)道感染,二、病毒感染的類型,㈠隱性感染(inapparent infection) subclinical infection㈡顯性感染(apparent infection)1.急性感染(acute infection)2.持續(xù)性感染(persistent infection)①慢性感染(chronic infection)②潛伏感染(la

3、tent infection)HSV→機(jī)體→急性口炎→三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞→口角→皰疹,慢性感染：,病程長病毒可檢出 如HBV,潛伏感染：,可反復(fù)激活，急性發(fā)作病毒只有在急性發(fā)作時(shí)才被檢出如 HSV,慢發(fā)病毒感染：,潛伏期長，發(fā)病后為亞急性進(jìn)行性直至死亡,尋常病毒,非尋常病毒,prion,麻疹病毒:SSPE; HIV:AIDS,,,,,,,持續(xù)性感染,三、病毒感染的致病機(jī)制㈠病毒感染對宿主細(xì)胞的直接作用1.溶細(xì)胞性感染

4、 殺細(xì)胞效應(yīng)(cytocidal effect)--無包膜病毒,無包膜病毒；阻斷細(xì)胞大分子合成；病毒蛋白的毒性作用；影響細(xì)胞溶酶體；細(xì)胞器的改變。用顯微鏡可以觀察到病毒感染的細(xì)胞出現(xiàn)腫脹、變性、壞死、從瓶壁脫落等現(xiàn)象，稱為細(xì)胞致病變作用（cytopathic effect，CPE）。,2.穩(wěn)定狀態(tài)感染(steady state infection):有包膜病毒 (1)細(xì)胞表面出現(xiàn)病毒基因編碼的新抗原(2)如果胞膜表面的病毒蛋白

5、有融合膜生物活性，則易造成細(xì)胞融合:形成多核巨細(xì)胞,如麻疹病毒,3.細(xì)胞凋亡(cellular apoptosis):1972年Kerr; 腺病毒、HIV等→細(xì)胞→鼓泡、細(xì)胞核濃縮→凋亡小體(apoptic body)→電泳：階梯式DNA條帶。（2002年獲諾貝爾獎(jiǎng)）,4.基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化:整合（integration）→細(xì)胞增生(hyper-plasia)或轉(zhuǎn)化(transformation)1911年, Rous;Rous

6、sarcoma virus, RSV.1966年獲諾貝爾獎(jiǎng),( Rous1879~1970）,,與人類惡性腫瘤密切相關(guān)的病毒有：⑴人乳頭瘤病毒（HPV）----宮頸癌⑵HBV、HCV--------原發(fā)性肝癌⑶EB病毒( EBV )----鼻咽癌、惡性淋巴瘤⑷人T細(xì)胞白血病病毒Ⅰ型（HTLV-Ⅰ）----白血病,5.包涵體(inclusion body)形成：有些病毒感染細(xì)胞后，在細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性、大

7、小數(shù)量不同的圓形或卵圓形斑塊結(jié)構(gòu)。,,㈡病毒感染的免疫病理作用:體液、細(xì)胞免疫1.抗體介導(dǎo)的免疫病理作用⑴ 靶細(xì)胞+抗體+補(bǔ)體→靶細(xì)胞溶解⑵ Ag+Ab→Ag-Ab→沉積→Ⅲ型超敏反應(yīng)2.細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病理作用:CTL→殺傷靶細(xì)胞TDTH→細(xì)胞損傷3.抑制免疫系統(tǒng)的功能:⑴麻疹病毒、RV、CMV →淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化⑵HIV →CD4+（TH）細(xì)胞的功能,持續(xù)性感染、惡性腫瘤,第二節(jié) 抗病毒免疫,一、非特異性免疫(non-s

8、pecific immunity)1.遺傳因素(hereditable factor):,2.屏障作用(action of protective screen):皮膚屏障,粘膜屏障,胎盤屏障,母體子宮的基蛻膜，另一部分是胎兒的絨毛膜。,血腦屏障,3.吞噬細(xì)胞(phagocyte)和NK細(xì)胞：,⑴巨噬細(xì)胞：,⑵NK細(xì)胞(natural killer cell): TNF-?, TNF- ?作用特點(diǎn)： 1）殺傷過程不受M

9、HC限制，也不依賴抗體 2）對靶細(xì)胞無特異性 3）殺傷作用出現(xiàn)早；4h 4）部分細(xì)胞因子可激活,⑶中性粒細(xì)胞：對病毒感染無防御作用,4.干擾素( interferon,IFN ):病毒或其他干擾素誘生劑刺激人或動(dòng)物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性的糖蛋白。,⑴種類：抗原性,⑵抗病毒機(jī)制：,通過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白 起作用。,⑶抗病毒作用的特點(diǎn)： a

10、廣譜抗病毒 b 抑制病毒而不是殺病毒 c 抗病毒作用具有種屬特異性 d 間接抗病毒,⑷IFN誘生劑(inducer):,病毒、細(xì)菌內(nèi)毒素、原蟲、poly I:C,二、特異性免疫(specific immunity)（一）體液免疫1.中和抗體(neutrolizing antibody):IgG、IgM、IgA（SIgA）2.非中和抗體(non- neutrolizing antibody):3.抗

11、體介導(dǎo)對靶細(xì)胞的作用:⑴靶細(xì)胞+抗體+補(bǔ)體→細(xì)胞溶解 ⑵靶細(xì)胞+抗體（ IgG-Fc）--NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞→靶細(xì)胞裂解：ADCC（二）細(xì)胞免疫(cellular immunity)T、K、NK、M?,,病毒→機(jī)體→致敏T細(xì)胞,CTL:穿孔素、細(xì)胞毒素,TH ：IFN、TNF、IL,CTL殺傷病毒感染的靶細(xì)胞,1.產(chǎn)生牢固免疫力:⑴全身性病毒感染 ⑵只有單一血清型的病毒感染2.產(chǎn)生短暫免疫力:⑴局部性病毒感染⑵病毒血清

12、型多⑶病毒抗原易發(fā)生變異,三、抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間,第20章 病毒感染的診斷與防治 Laboratory Diagnosis and prevention,一、標(biāo)本的采集與送檢：用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本：采取病程初期或急性期標(biāo)本、防止病毒滅活血清學(xué)診斷的標(biāo)本： 雙份血清(paired serum),第一節(jié) 病毒感染的檢查方法Laboratory Diagnosis,二、常規(guī)分離與鑒定,動(dòng)物接種animal

13、inoculation,雞胚接種egg inoculation,組織培養(yǎng),器官培養(yǎng),移植培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng),原代細(xì)胞培養(yǎng),二倍體細(xì)胞培養(yǎng),傳代細(xì)胞培養(yǎng),,,,三大培養(yǎng)方法,,,病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo),1、CPE,2、紅細(xì)胞吸附,正常細(xì)胞,病變細(xì)胞,病毒數(shù)量和感染性測定,1、蝕斑試驗(yàn),2、LD50 或 TCID50,感染雞胚動(dòng)物或細(xì)胞后，引起 50% 發(fā)生死亡或病變的最小量,病毒感染單層細(xì)胞后，產(chǎn)生的局限性病灶，稱蝕斑，蝕斑是由一個(gè)感染性病毒

14、體復(fù)制形成的，稱蝕斑形成單位，病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位(plaque forming unit, PFU)來表示,,病毒的血清學(xué)診斷,中和試驗(yàn),補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),血凝抑制試驗(yàn),免疫擴(kuò)散等,,,,,三、病毒感染的血清學(xué)診斷 (serodiagnosis ),,,四、病毒的快速診斷(rapid diagnosis),光鏡-----包涵體,電鏡,免疫熒光,ELISA,分子生物學(xué)技術(shù),雜交,Southern blot,PCR,

15、Northern blot,,,,,,,,,,,,,,,第二節(jié) 病毒感染的防治,免疫預(yù)防(immunoprophylaxis),人工主動(dòng)免疫(artificial active immunity),滅活疫苗：,乙腦疫苗,狂犬疫苗,流感滅活疫苗,減毒活疫苗：,脊髓灰質(zhì)炎疫苗,麻疹疫苗,腮腺炎疫苗,風(fēng)疹疫苗,HAV疫苗,亞單位疫苗：,,,,,Inactived vaccine,Live attenuated vaccine,牛痘疫苗,,,

16、流感 HBV,免疫預(yù)防(immunoprophylaxis),人工被動(dòng)免疫(artificial passive immunity),免疫血清：,丙種球蛋白：,細(xì)胞因子：,,,,,含有抗病毒中和抗體,含有抗病毒中和抗體,IL-2 IFN TNF,立即生效、免疫力維持時(shí)間短（1 m）,病毒感染的治療(therapy) 一、抑制病毒穿入與脫殼 金剛烷胺（amantadine）用于甲型流感

17、的治療 二、 抑制病毒生物合成 1、核苷類化合物(Nucleotide analogues)：通過阻抑子代病毒基因的合成與表達(dá)，抑制病毒復(fù)制。 常用藥物有: 用于DNA病毒感染:碘尿苷（皰疹凈）、無環(huán)鳥苷 （ 阿昔洛韋）、阿糖腺苷、丙氧鳥苷。 用于HIV感染:疊氮胸苷（AZT） 廣譜抗病毒:3-氮唑核苷（病毒唑），對多種RNA 或DNA病毒有抑

18、制作用。,2、病毒蛋白酶抑制劑：通過抑制病毒蛋白酶的活性，阻止病毒的復(fù)制。 常用藥物英迪納瓦（indinavir）、瑞托納瓦(ritonavir)等，對HIV有一定抑制作用。3、干擾素（Interferon）及干擾素誘生劑 : ★干擾素具有廣譜抗病毒作用，主要用IFN-α，副作用小，對某些病毒性疾病的防治有較好的效果。 ★ IFN誘生劑 ：（poly I:C）、甘草甜素及蕓芝多糖等,4、中草藥Chinese Her