醫(yī)學(xué)寄生蟲阿米巴鞭毛蟲

1、Amoeba and flagella 阿米巴和鞭毛蟲,. Entamoeba histolytica (E. histolytica) 溶組織內(nèi)阿米巴 . Giardia lamblia (G. lamblia)　蘭氏賈第鞭毛蟲 . Trichomonas vaginalis (T. vaginalis)　陰道毛滴毛蟲 . Leishmania donovani (L. donovani)　杜氏利什曼原蟲,Purp

2、ose and Requirements,.Master morphological features of trophozoite and cyst of Entamoeba histolytica and Giardia lamblia; Master movement characteristics of trophozoites; .Master morphological features and movement

3、 characteristics of Trichomonas vaginalis; .Familiar with differtiations of E. histolytica cyst and other non-pathogenic amoebae cyst; .Familiar with iodine stain for cyst; .Understanding Balantidium

4、 coli; .Understanding morphological features of amastigote of Leishmania donovani and sandfly. .,1.獨(dú)立觀察玻片標(biāo)本 No.原-1至No.原-4：　　2.示教內(nèi)容學(xué)習(xí)：　　 1）圖片及視頻示教：　　 2）鏡下示教標(biāo)本：　　 　　3.完成實(shí)驗(yàn)操作：　?、僦苯油科ㄓ^察活動(dòng)的阿米巴滋養(yǎng)體；　　②直接涂片法觀察活動(dòng)的陰道毛

5、滴蟲；　?、鄣馊旧ㄓ^察包囊 4.完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告：,本次課學(xué)習(xí)任務(wù),1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,拿到玻片標(biāo)本后請(qǐng)馬上檢查核對(duì)是否有漏、重復(fù)或破損，有問題的請(qǐng)馬上舉手報(bào)告老師！,No.原-1: 溶組織內(nèi)阿米巴包囊、結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊、微小內(nèi)蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊　Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetsch

6、lii　　No. 原-2: 藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體 G. lamblia trophozoite (僅雙號(hào)同學(xué)有，2個(gè)同學(xué)共用1張)　　No. 原-3: 藍(lán)氏賈第鞭毛蟲包囊 G. lamblia cyst　　No. 原-4: 陰道毛滴蟲滋養(yǎng)體 T. vaginalis trophozoite,注意：①在觀察玻片標(biāo)本前，先將顯微鏡光線調(diào)到最強(qiáng)！　　　②本次課只使用10倍鏡和油鏡；,No. 原-4:陰道毛滴蟲滋養(yǎng)體T. vaginal

7、is trophozoite,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍鏡下調(diào)出焦距平面，然后轉(zhuǎn)油鏡下觀察細(xì)微結(jié)構(gòu),要求拍照,姬姆薩染色法(Giemsa staining method),No. 原-3:藍(lán)氏賈第鞭毛蟲包囊 G. lamblia cyst,Steined with iron-hematoxylin,. Cyst wall : . Axostyl

8、e : . Median body : . Nucleus :,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍鏡下調(diào)出焦距平面，然后轉(zhuǎn)油鏡下觀察細(xì)微結(jié)構(gòu),要求拍照,No. 原-2:藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體 　G. lamblia trophozoite,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍鏡下調(diào)出焦距平面，然后

9、轉(zhuǎn)油鏡下觀察細(xì)微結(jié)構(gòu),要求拍照,姬姆薩染色法(Giemsa staining method),No. 原-2:藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體 G. lamblia trophozoite,Steined with iron-hematoxylin,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,先10倍鏡下調(diào)出焦距平面，然后轉(zhuǎn)油鏡下觀察細(xì)微結(jié)構(gòu),要求拍照,No. 原-1:溶組織內(nèi)阿米巴包

10、囊、結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊、微小內(nèi)蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii (鐵蘇木素染色),E. histolytica cyst溶組織內(nèi)阿米巴包囊,要求拍照：未成熟包囊,先10倍鏡下找出焦距平面，然后轉(zhuǎn)油鏡下觀察細(xì)微結(jié)構(gòu),1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,E. coli cyst 結(jié)

11、腸內(nèi)阿米巴包囊,1.Observation of glass slide No.原-1至No.原-4,No. 原-1:溶組織內(nèi)阿米巴包囊、結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊、微小內(nèi)蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii,E. nana cyst 微小內(nèi)蜒阿米巴,,Very small, 6-12um, oval, only 4 nuclei,1.Obs

12、ervation of glass slide No.原-1至No.原-4,No. 原-1:溶組織內(nèi)阿米巴包囊、結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊、微小內(nèi)蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii,I. buetschlii cyst 布氏嗜碘阿米巴,Stained with Iron-hematoxylin,Stained with Iodine,1.O

13、bservation of glass slide No.原-1至No.原-4,No. 原-1:溶組織內(nèi)阿米巴包囊、結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊、微小內(nèi)蜓阿米巴包囊、布氏嗜碘阿米巴包囊Cyst of E. histolytica, E. coli, E. nana, I. buetschlii,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,1）圖片及視頻示教：,Stained with Iron-hematoxylin,E. histolytica trophozoite

14、,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,1）圖片及視頻示教：,Amastigote (Leishman-Donovan body ) 無鞭毛體(利杜體),,,Amastigotes parasitize in mononuclear cell-macrophage (單核-巨噬細(xì)胞)of human,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,Sandfly(白蛉),駝背、眼大、多毛、翅豎,1）圖片及視頻示教：,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,1）圖片及視頻示教：,Balanti

15、dium coli trophozoite 結(jié)腸小袋纖毛蟲滋養(yǎng)體,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,1）圖片及視頻示教：,Balantidium coli trophozoite 結(jié)腸小袋纖毛蟲包囊,Round or near-round, diameter 40-60um,知識(shí)花絮: 染色方法,1 鐵蘇木素染色(Iron-hematoxylin staining method) 主要用于各種阿米巴和藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體和包囊的鑒定，具有操作簡

16、單，現(xiàn)象明顯的特點(diǎn)，呈墨藍(lán)色?！　? 碘液染色(Iodine staining method) 可以使真核細(xì)胞的細(xì)胞核呈黃褐色，所以,加碘液可以用來觀察細(xì)胞核。 3 姬姆薩染色法(Giemsa staining method) 姬姆薩染液(天青色素、伊紅、次甲藍(lán)的混合液)的染色法。 最適于血液涂抹標(biāo)本,用以染血球、瘧原蟲、立克次體以及骨髓細(xì)胞、脊髓細(xì)胞等的染色，呈祡紅色?！　? 瑞氏染色法(Wright’s stain

17、ing method) 用瑞氏染色液對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色以便進(jìn)行顯微鏡檢查的染色法。瑞氏染色液是由酸性染料伊紅和堿性染料美藍(lán)組成的復(fù)合染料,溶于甲醇后解離為帶正電的美藍(lán)和帶負(fù)電的伊紅離子?！　? 瑞氏-姬姆薩染色法(Wright-Giemsa staining method) 主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色，它是利用Romanowwsky Stain技術(shù)原理改良而成的。標(biāo)本涂片經(jīng)瑞氏-姬姆薩染色液染色后，各類細(xì)胞呈現(xiàn)不同的著色，紅細(xì)胞呈淺

18、紅色，白細(xì)胞的核著色非常明顯，易于對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類?！　? 蘇木精(hematoxylin)和伊紅(eosin)染色方法 簡稱HE染色方法，是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的細(xì)胞與組織學(xué)最廣泛應(yīng)用的染色方法。教學(xué)和研究都是用HE染色方法觀察正常和病變組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,1）圖片及視頻示教：,Iodine stain 碘液染色法,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,1）圖片及視頻示教：,Iron-hematoxylin stain 鐵蘇木素染色法

19、,2）鏡下示教：請(qǐng)拿上實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)移步到示教顯微鏡，觀察時(shí)請(qǐng)勿移動(dòng)視野！,.溶組織內(nèi)阿米巴滋養(yǎng)體和包囊 E. histolytica trophozoite and cyst　.結(jié)腸內(nèi)阿米巴包囊 E. coli cyst 　.微小內(nèi)蜒阿米巴包囊 E. nana cyst 　.布氏嗜碘阿米巴包囊 I. buetschlii cyst 　.藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體和包囊 G. lamblia trophozoite and cyst .

20、陰道毛滴蟲 T. vaginalis trophozoite .杜氏利什曼原蟲利杜體 Amastigote (Leishman-Donovan body) .白蛉 Sandfly .結(jié)腸小袋纖毛蟲滋養(yǎng)體 Balantidium coli trophozoite .結(jié)腸小袋纖毛蟲包囊 Balantidium coli trophozoite,2. 示教內(nèi)容學(xué)習(xí):,3.Operation and observation

21、操作和觀察,.直接涂片法觀察活動(dòng)阿米巴滋養(yǎng)體和碘染色法觀察包囊：　　　　　　?、俨僮髑跋瓤础暗庖喝旧ā币曨l；　　②取1張載玻片，先用吸管吸取阿米巴培養(yǎng)基，在載玻片左右各滴1滴，然后在其中1滴另滴加1滴碘液（如右圖），加蓋玻片，先10鏡下觀察，然后轉(zhuǎn)40倍鏡觀察；　?、塾眠^的載玻片請(qǐng)放到指定的鋁鍋內(nèi)！,3.Operation and observation 操作和觀察,.直接涂片法觀察活動(dòng)的陰道毛滴蟲：用吸管吸取陰道毛滴蟲培養(yǎng)基，

22、滴1滴玻片上，加蓋玻片即可，先10鏡下觀察，光線稍弱，然后轉(zhuǎn)40倍鏡觀察；用過的載玻片請(qǐng)放到指定的鋁鍋內(nèi)！,3）提交實(shí)驗(yàn)報(bào)告方法： 　雙擊“教師機(jī)”圖標(biāo)→打開文件夾“上傳” →打開你本人所在組別對(duì)應(yīng)的文件夾，如“1組”→粘貼實(shí)驗(yàn)報(bào)告。,2）實(shí)驗(yàn)報(bào)告命名格式：　　學(xué)號(hào)姓名-4，例如 20070001張三-4,3.實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求及提交：,1）本次實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容: 要求 4 張圖片?、偃芙M織內(nèi)阿米巴未成熟包囊 E. histolytic

23、aI mmature cyst ②藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體 G. lamblia trophozoite ③藍(lán)氏賈第鞭毛蟲包囊 G. lamblia cyst　 ④陰道毛滴蟲滋養(yǎng)體 T. vaginalis trophozoite,離開實(shí)驗(yàn)室前做好以下工作：,1. 清點(diǎn)玻片標(biāo)本，按順序擺放整齊并放到指定地方；　　2. 清理桌面，包括清理垃圾、將油瓶、擦鏡液和擦鏡紙歸位，擺放整齊；　　3. 本次課特別強(qiáng)調(diào)用擦鏡紙沾擦鏡液擦

24、干凈油鏡頭和高倍鏡頭！ 　　4. 整理好顯微鏡、電腦關(guān)機(jī)；　　5. 將凳子收入桌子下面；　　5. 值日生留下做實(shí)驗(yàn)室清潔工作。,1.簡述溶組織內(nèi)阿米巴的致病機(jī)制。 2.如何用病原學(xué)方法診斷急性阿米巴痢疾病人？檢查時(shí)應(yīng)注意什么？ 3.陰道毛滴蟲是怎樣傳播的，如何進(jìn)行防治？ 4.藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體引起腹瀉的原因？ 5.簡述黑熱病的貧血機(jī)制。,課后思考：,患者，女，28歲

25、，浙江寧波人，已婚，患者自農(nóng)村來滬做保姆已有2年，自覺勞累后腰酸，白帶多，有時(shí)伴黃色帶有泡沫伴黏液，陰道經(jīng)常瘙癢，時(shí)聞腥臭味，月經(jīng)正常，但經(jīng)量較大。婦科檢查：外陰部有紅腫，子宮頸糜爛Ⅱ度，陰道涂片查到大量陰道毛滴蟲，還有紅細(xì)胞、白細(xì)胞和上皮細(xì)胞，遵醫(yī)囑服滅滴靈并外用栓劑后，癥狀好轉(zhuǎn)，但年終探親返回后癥狀又出現(xiàn)，再次服藥后得以痊愈。,問題：1．陰道毛滴蟲傳播的因素有哪些？ 2. 患者后來為何又有癥狀出現(xiàn)？患者應(yīng)如何防治？,課后

26、討論 Case 1,患者，女，6歲，因“腹瀉9天，發(fā)燒、腹痛及膿血便7天”入院，發(fā)病前8天有跌入糞坑史。查體：體溫38℃，全腹有輕壓痛，腹中部可觸及移動(dòng)的腸樣腫塊，入院數(shù)日后大便呈果醬色，腹痛加重，2日后出現(xiàn)全腹痛伴肌緊張，剖腹探查，見右下腹有一炎性腫塊，盲腸壞疽,有3cm×2cm的穿孔灶，闌尾已壞疽脫落。術(shù)后采用抗阿米巴治療，因治療無效，術(shù)后46小時(shí)死亡。尸檢：腹腔右側(cè)有散在小膿腫20余處，結(jié)腸、空腸、回腸均可見潰瘍，以結(jié)腸