偽狂犬病病毒

1、偽狂犬病病毒,動醫(yī)二班,偽狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)又稱豬皰疹病毒Ⅰ型、傳染性延髓麻痹病毒、奇癢癥病毒、奧葉茲基氏病病毒。是引起牛、羊、豬、犬和貓等多種家畜和野生動物發(fā)熱、奇癢（豬除外）及腦脊髓炎為主要癥狀的皰疹病毒。,.,,偽狂犬病毒,屬皰診病毒科皰疹病毒甲亞科，暫定水痘病毒屬，病毒粒子呈橢圓或圓形，無囊膜粒子直徑為110-150nm；有囊膜的成熟病毒粒子直徑180nm。囊膜表面有呈放射排列的纖突，長8

2、-10nm，相對分子量為8.7×l07。,形態(tài)特征,偽狂犬病毒具有皰疹病毒科成員所共有的一般形態(tài)特征。病毒粒子呈圓形或橢圓形，位于細(xì)胞核內(nèi)無囊膜的病毒粒子直徑為110~150nm，位于胞質(zhì)內(nèi)帶囊膜的成熟病毒粒子直徑為150~180nm。核衣殼呈二十面體對稱，沒有囊膜的裸露核衣殼亦具有感染性，但感染力約為帶囊膜的成熟病毒的五分之一。病毒囊膜表面有呈放射狀排列的纖突。,理化特性,PRV是皰疹病毒中抵抗力較強的一種。 1 在潮濕

3、條件下：pH6～8之間保持穩(wěn)定，溫度介于4-37℃，pH為4.3-9.7時，PRV 1-7 d失活。 2 腐敗條件下，病料中的病毒經(jīng)11d失去感染力。 3 PRV對乙醚、氯仿等脂溶劑，福爾馬林和紫外線照射等敏感。 4 5%石碳酸經(jīng)2min滅活，5-10 g/L氫氧化鈉使其滅活。 5 對熱的抵抗力較強，55-60℃經(jīng)30-50 min才能滅活，80℃經(jīng)3min滅活。,.,,流行病學(xué),PRV是感染動物種類多和致病性強的一種病

4、毒。（1）家養(yǎng)動物： 豬：豬是PRV的儲存宿主和傳染源，尤其耐過的呈隱性感染的成年豬是該病的主要傳染源。 牛羊：出現(xiàn)奇癢而死。（2）實驗動物：家兔、犬、貓、小鼠，但以家兔最敏感。（3）野生動物：狐貍、水貂等,.,,傳播形式,垂直傳播PRV可通過胎盤而傳遞給子體，而母體免疫球蛋白卻不能，所以對胎兒的感染是致命的,媒體傳播帶有病毒的空氣飛沫核可隨風(fēng)傳到9km或更遠(yuǎn)的地方，使健康豬群受到感染。被污染的飼料、或帶病毒

5、的鼠、羊等動物也可傳播。,生態(tài)學(xué),豬和鼠類是自然界中偽狂犬病病毒的主要貯存宿主，也是引起其他動物感染發(fā)病的疫原動物，其他家畜均是由于接觸這兩種帶毒動物或病死尸體而感染發(fā)病。病毒感染易染動物后，最初在扁桃體和咽部粘膜增殖，再經(jīng)嗅神經(jīng)、三叉神經(jīng)和咽神經(jīng)的神經(jīng)鞘淋巴到達(dá)脊髓和腦。亦可由鼻、咽粘膜經(jīng)呼吸道侵入肺泡。血液中的病毒呈間歇性出現(xiàn)，并可隨血液到達(dá)全身各部位,臨床癥狀,臨床癥狀以神經(jīng)癥狀、流涎，呼吸困難，繁殖障礙，生長停滯，失重及高死亡

6、率為主，其中，臨床表現(xiàn)隨年齡不同有很大差異。1）哺乳仔豬：出生后3天即可發(fā)病，癥狀表現(xiàn)為精神沉郁、不吃奶、腹瀉、嘔吐、呼吸困難、興奮不安、鳴叫、運動障礙、共濟失調(diào)、角弓反張等神經(jīng)癥狀，死前尖叫、口吐白沫。仔豬可于發(fā)病后1-2天內(nèi)死亡，死亡率高達(dá)100%。2）仔豬：仔豬（斷奶后至３０kg階段） 癥狀與乳豬相似，只是輕微一些，發(fā)病后主要表現(xiàn)為呼吸困難、嘔吐、腹瀉及一些神經(jīng)癥狀。其發(fā)病率與死亡率比乳豬低，死亡率達(dá)９５％以上。,仔豬腹瀉，

7、死亡前游泳狀、鳴叫聲音嘶啞,仔豬的瘙癢,運動障礙、共濟失調(diào)、犬坐式,口吐白沫,結(jié)膜炎，呼吸困難、流涎,仔豬可于發(fā)病后1-2天內(nèi)死亡,病理變化,新生仔豬和哺乳仔豬在自然感染和人工感染PRV時均表現(xiàn)出較為明顯的眼觀病變: 上呼吸道黏膜及扁桃體出血水腫，胃腸黏膜可見卡他性或出衄性炎癥;中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀明顯時，腦膜充血、出血、水腫，腦脊髓液增多;組織學(xué)病變主要是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的彌散性非化膿性腦膜腦炎及神經(jīng)節(jié)炎，有明顯的血管套及膠質(zhì)細(xì)胞壞死。

8、在腦神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)、鼻咽黏膜、脾及淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞內(nèi)可見核內(nèi)酸性包涵體。仔豬人工感染PRV強毒后出現(xiàn)了特征性的扁桃體壞死，淋巴結(jié)輕度充血或周邊出血，肝和脾的漿膜面下有時可見散在的黃白色皰疹樣壞死灶，腎臟柔軟腫脹，表面小點出血。成年豬感染PRV發(fā)生了壞死性腸炎。母豬感染PRV后可見輕微子宮內(nèi)膜炎和壞死性胎盤炎，公豬可發(fā)生陰囊炎。,軟腦膜充血，其下腦溝積有出血性水腫液,胃底區(qū)粘膜出血性卡他,偽狂犬患豬剖檢淋巴結(jié)腫大,偽狂犬患豬剖檢肺部病

9、變,腎上腺切面壞死點,腎上腺皮質(zhì)及隋質(zhì)部可見散發(fā)性的壞死點,微生物學(xué)診斷,感染本病的動物，除豬以外，都呈現(xiàn)體表局部高度瘙癢癥狀，并最終死亡，據(jù)此可做出初步診斷。但患豬通常無特殊癥狀，而且新生豬和仔豬發(fā)病突然，病程很短，多于昏睡狀態(tài)下死亡，診斷比較困難。本病最后確診要靠病毒分離、血清學(xué)反應(yīng)、實驗動物感染或核酸探針雜交等。,病毒分離與實驗室診斷,1、分離病毒的材料于發(fā)熱期最好采取中腦、橋腦及延腦，或采取病總部之水腫液、侵入部神經(jīng)干及脊髓。病

10、料用培養(yǎng)液制成1:10組織懸浮液。2、 兔體接種試驗 上述懸液經(jīng)2000r/min離心10min，取上清液1~2ml經(jīng)腹側(cè)皮下或肌肉接種家兔，通常在36-48h后注射部位出現(xiàn)劇癢，病兔啃咬注射部位皮膚，皮膚脫毛、破皮和出血，繼之四肢麻痹，體溫下降，臥地不起，最后角弓反張，抽搐死亡。但這種癥狀只維持幾小時，一般常于夜間死亡，可見死兔口內(nèi)有接種部位咬下的被毛。亦可腦內(nèi)接種小鼠，癥狀可維持12小時，但其敏感性不如兔。亦可用細(xì)胞培養(yǎng)來分離病毒

11、。許多種哺乳動物細(xì)胞均能繁殖本病毒，但最常用的是豬腎傳代細(xì)胞。,3、 兔、豬及牛腎原代細(xì)胞培養(yǎng)。病料接種細(xì)胞后最早經(jīng)18小時出現(xiàn)病變(病毒量大)，一般經(jīng)48小時，病毒量很低時要到96小時。其典型的病變是出現(xiàn)巨細(xì)胞圓形。部分病變細(xì)胞胞漿內(nèi)顆粒增多，細(xì)胞腫大變圓形，而不相互融合，漸漸萎縮壞死。當(dāng)細(xì)胞全面出現(xiàn)病變后漸自瓶壁脫落。自出現(xiàn)病變到整個細(xì)胞層破壞約經(jīng)24–48小時。4、特異性免疫熒光診斷：對可疑病畜或接種動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)如中腦、橋

12、腦、延腦 或脊髓可作冰凍切片或壓片，用免疫熒光直接法檢查，陽性病例可見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞漿及核 內(nèi)均有熒光。感染的組織細(xì)胞亦可用此法來確定感染的病毒。5、病毒中和試驗；用一株標(biāo)準(zhǔn)偽狂犬病細(xì)胞適應(yīng)毒，以每0.1ml病毒溶液中含有100TCID50的稀釋病毒與連續(xù)作2倍稀釋的被檢血清0.1ml混合，培養(yǎng)1.5小時，再接種于細(xì)胞培養(yǎng)物上。每個血清稀釋度至少要接種4個細(xì)胞培養(yǎng)物，每個培養(yǎng)物接種0.2ml?；謴?fù)豬的血清常有1:8到1:64的中和能

13、力。,免疫防治,病后康復(fù)動物具有較強的免疫力，人工接種強毒不能引發(fā)疾病。耐過母豬可經(jīng)過初乳將抗體傳給子代，使仔豬獲得對該病的抵抗力，這種母源抗體可存在仔豬體內(nèi)5-7周。對已感染豬群，檢疫是最迫切的任務(wù)，應(yīng)限制運輸并撲殺。如對新生仔豬注射高免血清，可降低死亡率。目前已有多種滅活疫苗和弱毒疫苗用于本病的預(yù)防，近年來的趨勢主要是發(fā)展弱毒疫苗和基因工程疫苗。目前已成功獲得了PRV的基因缺失突變株Telvid疫苗。該疫苗是目前為數(shù)不多的商業(yè)化