松材線蟲攜帶菌纖維素酶理化特性研究.pdf

1、松樹萎蔫病是松屬植物的毀滅性病害。對(duì)于該病的成因，主要有‘線蟲學(xué)說(shuō)’和‘菌蟲共同作用’兩種觀點(diǎn)。本研究以自長(zhǎng)島松材線蟲(Bursaphelenchusxylophilus)體表分離得到的4株細(xì)菌為研究對(duì)象，通過(guò)纖維素酶的理化性質(zhì)及組分測(cè)定，結(jié)合攜帶菌生物學(xué)特性分析，從病原物的侵襲力，包括侵入、定植和擴(kuò)散能力的角度，對(duì)攜帶細(xì)菌致萎的酶學(xué)基礎(chǔ)和致病能力進(jìn)行了分析研究，探究松樹萎蔫病的病因和機(jī)理。主要研究結(jié)果如下： 1、長(zhǎng)島線蟲體表分

2、離物，經(jīng)鑒定分別為：蠟狀芽孢菌(Bacilluscereus)、魯氏不動(dòng)桿菌(Acintobacterluoffi)、中間腸桿菌(Enterobacterintermedium)和嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌(Stemotrophomonasmaltrophilia)。與已報(bào)道的具有產(chǎn)解壁酶能力的菌種在種屬特性上存在一致性，且具有產(chǎn)酶能力。 2、生物學(xué)特性分析表明，線蟲體表同時(shí)攜帶有好氧菌和兼性菌，菌株間需氧情況的差異，與病原由表及里的侵染

3、過(guò)程相符，顯示其在致萎過(guò)程中具有協(xié)同作用。 3、攜帶細(xì)菌與致萎相關(guān)酶系的特性分析表明，細(xì)菌具備獨(dú)立分解纖維素和木質(zhì)素的能力，并非依賴線蟲降解物生存，提示攜帶細(xì)菌與松材線蟲之間的關(guān)系不符合專性寄生或共生的生態(tài)關(guān)系，可理解為條件致病因子。 4、酶學(xué)性質(zhì)分析表明，攜帶菌具有完整的纖維素降解酶系。細(xì)菌纖維素酶的最適pH值為8.5，最適反應(yīng)溫度為50℃，在25℃～60℃范圍內(nèi)，酶活力可保持在60％以上。其中Chx1分泌的CMC酶在

4、最適培養(yǎng)條件下酶活力可達(dá)237.328U，提示其在侵染初期對(duì)淺表組織細(xì)胞壁的分解起主要作用；而假單胞菌產(chǎn)生的纖維素酶主要表現(xiàn)為β-葡萄糖苷酶，具有植物內(nèi)部的繼發(fā)作用特性。進(jìn)一步的酶學(xué)特性、酶活力測(cè)定，以及電泳分析結(jié)果證實(shí)，不同菌株之間在酶系的組分和活力上都存在差異，在侵染和致萎過(guò)程中，顯示出時(shí)序性和生化協(xié)同的作用特點(diǎn)。 5、研究證實(shí)，不僅攜帶細(xì)菌具備侵染和致萎的酶學(xué)基礎(chǔ)，松材線蟲本身同樣也具備致萎的酶學(xué)基礎(chǔ)；綜合分析纖維素酶理化